eGFP: enhanced Green Fluorescent Protein 增強綠色熒光蛋白, EGFP是GFP突變系 目前應用 較多的是 GF P的突變體：增強型綠色熒光蛋 白( E G F P )( 6 4位苯丙一亮) ， 發射出的熒光強度 比G F P大 6 倍以上， 因此， 比G F P更適合作為 一種報告基 因來研究基因表達、 調控、 細胞分化及蛋 白質 在生 物體 內定位和 轉運等 綠色熒光蛋白(GreenFluorescent Protein,簡稱GFP)是一種在美國西北海岸所盛產的水母中所發現的一種蛋白質。這類學名為Aequorea victoria的水母有著美麗的外表,生存歷史超過1.6億年。1962年,下村修正是在這種水母的發光器官內發現天然綠色熒光蛋白。它之所以能夠發光,是因在其包含238個氨基酸的序列中,第65至67個氨基酸(絲氨酸—酪氨酸—甘氨酸)殘基,可自發地形成一種熒光髮色團。發光機理 當蛋白質鏈摺疊時,這段被深埋在蛋白質內部的氨基酸片段,得以“親密接觸”,導致經環化形成咪唑酮,併發生脫水反應。但此時還不能發射熒光,只有當有分子氧存在的條件下,發生氧化脫氫,方能導致綠色熒光蛋白髮色團的“成熟”,形成可發射熒光的形式。上述綠色熒光蛋白髮色團的形成過程,系由幾位科學家分別研究完成的。 綠色熒光蛋白分子綠色熒光蛋白不僅無毒,而且不需要藉助其他輔酶,自身就能發光,可以讓科學家在分子水平上研究活細胞的動態過程。當綠色熒光蛋白的基因和我們感興趣的有機體內所擬研究的蛋白質基因相融合時,蛋白質既能保持其原有的活性,綠色熒光蛋白的發光能力也不受影響。透過顯微鏡觀察這種發光的“標籤”,科學家就能做到對蛋白質的位置、運動、活性以及相互作用等一目瞭然。在一個活體中有數萬種不同的蛋白質,這些蛋白質精細地控制著重要的化學程序。如果蛋白機制發生故障,通常就會t發生疾病。綠色熒光蛋白可幫助研究這類機制,這就是為什麼綠色熒光蛋白成為生物科學極其重要的工具。在它的幫助下,科學家還能對各種細胞的命運瞭如指掌,比如,腦神經細胞是如何發育起來的,或者癌症細胞是如何擴散的…… 今天,已經有了許多新的不同的綠色熒光蛋白變體,這就進一步完善了綠色熒光蛋白作為基因標誌在生物研究中的廣泛應用。
eGFP: enhanced Green Fluorescent Protein 增強綠色熒光蛋白, EGFP是GFP突變系 目前應用 較多的是 GF P的突變體：增強型綠色熒光蛋 白( E G F P )( 6 4位苯丙一亮) ， 發射出的熒光強度 比G F P大 6 倍以上， 因此， 比G F P更適合作為 一種報告基 因來研究基因表達、 調控、 細胞分化及蛋 白質 在生 物體 內定位和 轉運等 綠色熒光蛋白(GreenFluorescent Protein,簡稱GFP)是一種在美國西北海岸所盛產的水母中所發現的一種蛋白質。這類學名為Aequorea victoria的水母有著美麗的外表,生存歷史超過1.6億年。1962年,下村修正是在這種水母的發光器官內發現天然綠色熒光蛋白。它之所以能夠發光,是因在其包含238個氨基酸的序列中,第65至67個氨基酸(絲氨酸—酪氨酸—甘氨酸)殘基,可自發地形成一種熒光髮色團。發光機理 當蛋白質鏈摺疊時,這段被深埋在蛋白質內部的氨基酸片段,得以“親密接觸”,導致經環化形成咪唑酮,併發生脫水反應。但此時還不能發射熒光,只有當有分子氧存在的條件下,發生氧化脫氫,方能導致綠色熒光蛋白髮色團的“成熟”,形成可發射熒光的形式。上述綠色熒光蛋白髮色團的形成過程,系由幾位科學家分別研究完成的。 綠色熒光蛋白分子綠色熒光蛋白不僅無毒,而且不需要藉助其他輔酶,自身就能發光,可以讓科學家在分子水平上研究活細胞的動態過程。當綠色熒光蛋白的基因和我們感興趣的有機體內所擬研究的蛋白質基因相融合時,蛋白質既能保持其原有的活性,綠色熒光蛋白的發光能力也不受影響。透過顯微鏡觀察這種發光的“標籤”,科學家就能做到對蛋白質的位置、運動、活性以及相互作用等一目瞭然。在一個活體中有數萬種不同的蛋白質,這些蛋白質精細地控制著重要的化學程序。如果蛋白機制發生故障,通常就會t發生疾病。綠色熒光蛋白可幫助研究這類機制,這就是為什麼綠色熒光蛋白成為生物科學極其重要的工具。在它的幫助下,科學家還能對各種細胞的命運瞭如指掌,比如,腦神經細胞是如何發育起來的,或者癌症細胞是如何擴散的…… 今天,已經有了許多新的不同的綠色熒光蛋白變體,這就進一步完善了綠色熒光蛋白作為基因標誌在生物研究中的廣泛應用。