PCR擴增過程中汙染的預防與對策
PCR技術是聚合酶鏈反應該技術可將極微量的靶DNA特異的擴增上百萬倍從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。 PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性操作複雜所以在其操作過程中常有汙染髮生 即使極少量的汙染也會造成假陽性稍有差錯就會出現假陰性。
汙染的原因調查
標本間的汙染採集標本的容器被汙染提取過程中加樣槍汙染試劑的汙染提取過程中氣溶膠的汙染等。
防止汙染的預防與對策
實驗人員要熟練掌握PCR操作技術嚴格規範操作程式操作過程中加樣槍的使用手套、槍頭、離心管應一次性使用。嚴格按試劑生產廠家提供的程式進行操作。
嚴把質量關在操作當中總結馬上到期的試劑或剛過期試劑對PCR結果影響很大。
設立陰性質控和陽性質控陰性質控以監測試劑是否汙染陽性質控以監測PCR反應是否成功產物大小是否合本理論要求。
實驗室設定及裝置的規範化
實驗室劃分為4區試劑準備區、 標本準備區、 PCR迴圈擴增區、檢測區。擴增儀的設定要符合要求取樣器刻度準確減少PCR 迴圈次數只要PCR產物過剩檢測水。
近年來PCR技術已普及到各基層醫院廣泛地用於感染性病原體如HBV HCV的臨床檢測 由於缺乏對核酸擴增檢驗技術完整的瞭解以及缺乏質量保證措施導致部分實驗室結果出現假陽性、假陰性的出現所以操作者必須熟練掌握技術嚴格按操作規程操作防止假陽
PCR擴增過程中汙染的預防與對策
PCR擴增過程中汙染的預防與對策
PCR技術是聚合酶鏈反應該技術可將極微量的靶DNA特異的擴增上百萬倍從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力。 PCR反應的最大特點是具有較大擴增能力與極高的靈敏性操作複雜所以在其操作過程中常有汙染髮生 即使極少量的汙染也會造成假陽性稍有差錯就會出現假陰性。
汙染的原因調查
標本間的汙染採集標本的容器被汙染提取過程中加樣槍汙染試劑的汙染提取過程中氣溶膠的汙染等。
防止汙染的預防與對策
實驗人員要熟練掌握PCR操作技術嚴格規範操作程式操作過程中加樣槍的使用手套、槍頭、離心管應一次性使用。嚴格按試劑生產廠家提供的程式進行操作。
嚴把質量關在操作當中總結馬上到期的試劑或剛過期試劑對PCR結果影響很大。
設立陰性質控和陽性質控陰性質控以監測試劑是否汙染陽性質控以監測PCR反應是否成功產物大小是否合本理論要求。
實驗室設定及裝置的規範化
實驗室劃分為4區試劑準備區、 標本準備區、 PCR迴圈擴增區、檢測區。擴增儀的設定要符合要求取樣器刻度準確減少PCR 迴圈次數只要PCR產物過剩檢測水。
近年來PCR技術已普及到各基層醫院廣泛地用於感染性病原體如HBV HCV的臨床檢測 由於缺乏對核酸擴增檢驗技術完整的瞭解以及缺乏質量保證措施導致部分實驗室結果出現假陽性、假陰性的出現所以操作者必須熟練掌握技術嚴格按操作規程操作防止假陽