液色迷人 的液相色譜峰柱嚴重拖尾 解決方法 篩板阻塞1、a、反衝色譜柱 b、更換進口篩板 c、更換色譜 2、色譜柱塌填充色譜柱 3、干擾峰 3、a、使用更長的色譜柱 b、改變流動相或更換色譜柱 4、流動相PH選擇錯誤 4、調整PH值。對於鹼性化合物,低PH值更有利於得到對稱峰 5、樣品與填料表面的溶化點發生反應圖 5、a、加入離子對試劑或鹼性揮發性修飾劑 b、更改色譜柱 F、 早出的峰拖尾程度大於晚出的峰 原因 解決方法 柱外效應 1、a、調整系統連線(使用更短、內徑更小的管路) b、使用小體積的流通池 G、 K’增加時,脫尾更嚴重 原因 解決方法 1、二級保留效應,反相模式 1、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入鹽或緩衝劑(或離子化樣品) d、更換一支柱子 2、二級保留效應,正相模式 2、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入水(或多官能團化合物) d、試用另一種方法 3、二級保留效應,離子對 3、加入三乙胺(或鹼性樣品) H、 酸性或鹼性化合物的峰拖尾 原因 解決方法 1、緩衝不合適 1、a、使用濃度50-100mM的緩衝液 b、使用Pka等於流動相PH值的緩衝液 I、 額外的峰 原因 樣品中有其他組份 1、正常 2、前一次進樣的洗脫峰 2、a、增加執行時間或梯度斜率 b、提高流速 3、空位或鬼峰 3、a、檢查流動相是否純淨 b、使用流動相作為樣品溶劑 c、減少進樣體積色譜柱走出來的峰型拖尾很嚴重,這個有好幾種原因:流動相的比例,如甲醇:水的比例不一樣,出峰時間和拖尾程度不一樣的,還有你的柱型是否和檢測物質匹配。我經常能遇到流動相的比例不同,分離度差別很大的情況。 出峰快結束的時候又出來一個不全的峰,對於這種情況,很有可能是你的柱子不乾淨,才用梯度洗脫法沖洗柱子。單元泵的話,用幾個不同比例的流動相沖洗柱子,至基線穩定。 色譜柱走出來的峰型拖尾很嚴重,這個有好幾種原因:流動相的比例,如甲醇:水的比例不一樣,出峰時間和拖尾程度不一樣的,還有你的柱型是否和檢測物質匹配。我經常能遇到流動相的比例不同,分離度差別很大的情況。 拖尾原 因 篩板阻塞 1、a、反衝色譜柱 b、更換進口篩板 c、更換色譜柱 2、色譜柱塌陷 2、填充色譜柱 3、干擾峰 3、a、使用更長的色譜柱 b、改變流動相或更換色譜柱 4、流動相PH選擇錯誤 4、調整PH值。對於鹼性化合物,低PH值更有利於得到對稱峰 5、樣品與填料表面的溶化點發生反應圖 5、a、加入離子對試劑或鹼性揮發性修飾劑 b、更改色譜柱 F、 早出的峰拖尾程度大於晚出的峰 柱外效應 1、a、調整系統連線(使用更短、內徑更小的管路) b、使用小體積的流通池 G、 K’增加時,脫尾更嚴重 原因 解決方法 1、二級保留效應,反相模式 1、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入鹽或緩衝劑(或離子化樣品) d、更換一支柱子 2、二級保留效應,正相模式 2、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入水(或多官能團化合物) d、試用另一種方法 3、二級保留效應,離子對 3、加入三乙胺(或鹼性樣品) H、 酸性或鹼性化合物的峰拖尾 原因 緩衝不合適 1、a、使用濃度50-100mM的緩衝液 b、使用Pka等於流動相PH值的緩衝液 I、 額外的峰 原因 解決方法 1、樣品中有其他組份 1、正常 2、前一次進樣的洗脫峰 2、a、增加執行時間或梯度斜率 b、提高流速 3、空位或鬼峰 3、a、檢查流動相是否純淨 b、使用流動相作為樣品溶劑 c、減少進樣體積
液色迷人 的液相色譜峰柱嚴重拖尾 解決方法 篩板阻塞1、a、反衝色譜柱 b、更換進口篩板 c、更換色譜 2、色譜柱塌填充色譜柱 3、干擾峰 3、a、使用更長的色譜柱 b、改變流動相或更換色譜柱 4、流動相PH選擇錯誤 4、調整PH值。對於鹼性化合物,低PH值更有利於得到對稱峰 5、樣品與填料表面的溶化點發生反應圖 5、a、加入離子對試劑或鹼性揮發性修飾劑 b、更改色譜柱 F、 早出的峰拖尾程度大於晚出的峰 原因 解決方法 柱外效應 1、a、調整系統連線(使用更短、內徑更小的管路) b、使用小體積的流通池 G、 K’增加時,脫尾更嚴重 原因 解決方法 1、二級保留效應,反相模式 1、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入鹽或緩衝劑(或離子化樣品) d、更換一支柱子 2、二級保留效應,正相模式 2、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入水(或多官能團化合物) d、試用另一種方法 3、二級保留效應,離子對 3、加入三乙胺(或鹼性樣品) H、 酸性或鹼性化合物的峰拖尾 原因 解決方法 1、緩衝不合適 1、a、使用濃度50-100mM的緩衝液 b、使用Pka等於流動相PH值的緩衝液 I、 額外的峰 原因 樣品中有其他組份 1、正常 2、前一次進樣的洗脫峰 2、a、增加執行時間或梯度斜率 b、提高流速 3、空位或鬼峰 3、a、檢查流動相是否純淨 b、使用流動相作為樣品溶劑 c、減少進樣體積色譜柱走出來的峰型拖尾很嚴重,這個有好幾種原因:流動相的比例,如甲醇:水的比例不一樣,出峰時間和拖尾程度不一樣的,還有你的柱型是否和檢測物質匹配。我經常能遇到流動相的比例不同,分離度差別很大的情況。 出峰快結束的時候又出來一個不全的峰,對於這種情況,很有可能是你的柱子不乾淨,才用梯度洗脫法沖洗柱子。單元泵的話,用幾個不同比例的流動相沖洗柱子,至基線穩定。 色譜柱走出來的峰型拖尾很嚴重,這個有好幾種原因:流動相的比例,如甲醇:水的比例不一樣,出峰時間和拖尾程度不一樣的,還有你的柱型是否和檢測物質匹配。我經常能遇到流動相的比例不同,分離度差別很大的情況。 拖尾原 因 篩板阻塞 1、a、反衝色譜柱 b、更換進口篩板 c、更換色譜柱 2、色譜柱塌陷 2、填充色譜柱 3、干擾峰 3、a、使用更長的色譜柱 b、改變流動相或更換色譜柱 4、流動相PH選擇錯誤 4、調整PH值。對於鹼性化合物,低PH值更有利於得到對稱峰 5、樣品與填料表面的溶化點發生反應圖 5、a、加入離子對試劑或鹼性揮發性修飾劑 b、更改色譜柱 F、 早出的峰拖尾程度大於晚出的峰 柱外效應 1、a、調整系統連線(使用更短、內徑更小的管路) b、使用小體積的流通池 G、 K’增加時,脫尾更嚴重 原因 解決方法 1、二級保留效應,反相模式 1、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入鹽或緩衝劑(或離子化樣品) d、更換一支柱子 2、二級保留效應,正相模式 2、a、加入三乙胺(或鹼性樣品) b、加入乙酸(或酸性樣品) c、加入水(或多官能團化合物) d、試用另一種方法 3、二級保留效應,離子對 3、加入三乙胺(或鹼性樣品) H、 酸性或鹼性化合物的峰拖尾 原因 緩衝不合適 1、a、使用濃度50-100mM的緩衝液 b、使用Pka等於流動相PH值的緩衝液 I、 額外的峰 原因 解決方法 1、樣品中有其他組份 1、正常 2、前一次進樣的洗脫峰 2、a、增加執行時間或梯度斜率 b、提高流速 3、空位或鬼峰 3、a、檢查流動相是否純淨 b、使用流動相作為樣品溶劑 c、減少進樣體積