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1 # 棠棠愛學習吖
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2 # 阡白陌雪
pET-his載體必須在BL21(DE3)菌，而不能在DH5α中表達的原因
pET系列載體都用來自於λ 噬菌體的T7啟動子，該啟動子轉錄需要用到T7 RNA聚合酶。而野生的大腸桿菌（比方說DH5α或BL21）體內沒有該酶的基因，所以無法啟動該啟動子後面基因的表達。BL21（DE3）菌株是在野生型BL21菌株的基礎上，整合了一段來源於λ 噬菌體的DE3片段，該片段中包含了編碼T7RNA聚合酶的基因，能夠在IPTG或乳糖誘導下表達T7RNA聚合酶，而該聚合酶又能進一步轉錄T7啟動子，從而啟動載體上外源基因的表達。因此說，理論上只要整合了DE3片段的大腸桿菌（比如BL21（DE3）或JM109（DE3）等）都能用作pET系列載體的表達。
pET-his載體必須在BL21(DE3)菌，而不能在DH5α中表達的原因
pET系列載體都用來自於λ 噬菌體的T7啟動子，該啟動子轉錄需要用到T7 RNA聚合酶。而野生的大腸桿菌（比方說DH5α或BL21）體內沒有該酶的基因，所以無法啟動該啟動子後面基因的表達。BL21（DE3）菌株是在野生型BL21菌株的基礎上，整合了一段來源於λ 噬菌體的DE3片段，該片段中包含了編碼T7RNA聚合酶的基因，能夠在IPTG或乳糖誘導下表達T7RNA聚合酶，而該聚合酶又能進一步轉錄T7啟動子，從而啟動載體上外源基因的表達。因此說，理論上只要整合了DE3片段的大腸桿菌（比如BL21（DE3）或JM109（DE3）等）都能用作pET系列載體的表達。