【實驗操作】
1.檢查721A型分光光度計的旋鈕和開關，使其回覆零點。
2.按要求接通電源，按下“T鍵”，開啟暗盒蓋和電源開關，指示燈亮。預熱20分鐘。
3.調節波長旋鈕至所需波長。
4.取比色皿分別盛裝B、S、U液，置入檢測室（比色皿先用蒸餾水洗後，再用比色液潤洗才能裝比色液）。B液對準光路。
5.調節面板“零位細調”，使指示為00.0，即透射比“T”的零點，同時“一”號閃躍。
6.合下檢測室蓋.調節“光量粗、細調”電位器，使指示為100.0，須反覆5、6兩點操作達到穩定。
7.按下“A”鍵，指示為“.000”同時“一”閃躍，如果指示讀數不是比值時，應調節“消光調零“電位器，使其達到要求。
8.拉出或推入拉桿，使U、S液分別置於光路讀取A值，然後移動拉桿，讀B管A值，如為0，則前述A值有效。
9.在穩定時，重複讀數一次，並按下“T”鍵。
10.開啟檢測室蓋，取出比色皿，傾去比色液於水槽中，用自來水沖洗乾淨，倒置於表面皿（鋪有濾紙）中。
11.關上電源開關，拔出電源插頭，取出比色皿架，檢查檢測室內是否有液體濺出，並擦淨。檢測室內放入矽膠袋，合上蓋，套上儀器罩。
【計算】
1.利用標準管計算測定物含量 實際測定過程中，用一已知濃度的測定物按測定管同樣處理顯色，讀取吸光度，再根據（6）式計算，即
A1= K1C1l1 A2= K2C2l2
式中A1、A2分別為已知濃度標準和未知濃度測定吸光度。
c1、c2分別為已知濃度標準管和未知濃度測定管中測定物濃度。
因盛標準液和測定液的比色杯徑長相同（l1=l2），故上二式可寫成：
A1/K1C1= A2/K2C2……………………………………………(7)
因標準液和測定液中溶質為同一物，K值相同，即：
（7）式可換算成下式：
C2=（A2/A1）× C1 …………………………………………(8)
因測定液和標準液在處理過程中體積相同，故（8）式可寫成：
m2 =（A2/A??1）×??m1…………………………………………(9)
式中m1、m2分別表示標準液和測定液中待測物的含量。
（9）式為實驗操作中常用計算式。
【注意事項】
1.儀器須安放在穩固的工作臺上，不能隨意搬動。嚴防震動，潮溼和強光直射。
2.盛裝比色液時，約達比色皿2/3體積，不宜過多或過少。若不慎使溶液流至比色皿外面須用棉花或拭鏡紙擦乾，才能放入比色架。拉比色杆時要輕，以防溶液濺出，腐蝕機械。
3.千萬不可用手或濾紙等物摩擦比色皿的透光面。
4.比色皿用後應立即用自來水沖洗乾淨，若不能洗淨，用5%中性皂溶液或洗衣粉溶液浸泡，也可用新鮮配製的重鉻酸鉀洗液短時間浸泡，然後用水沖洗乾淨，倒置晾乾。
5.每套分光光度計上的比色皿和比色皿架不得隨意更換。
6.試管或試劑不得放置於儀器上，以防試劑濺出腐蝕機殼。
7.如果試劑濺在儀器上，應立即用棉花或紗布擦乾。
8.測定溶液濃度的光密度值宜在0.1—0.7之間最符合光吸收定律，線性好，讀數誤差較小。如光密度超過0.1—1.0範圍，可調節比色液濃度，適當稀釋或加濃，再進行比色。
9.合上檢測室蓋連續工作的時間不宜過長，以防光電管疲乏。每次讀完比色架內的一組讀數後，立即開啟檢測室蓋。
10.儀器連續使用不應超過2小時，必要時間歇半小時再用。
11.測定未知液時，先作該溶液的吸收光譜曲線，再選擇最大吸收峰的波長作為測定波長。
12.721分光光度計的放大器暗盒及單色器箱處放有兩個矽膠筒，檢測室內放矽膠袋，應經常檢查，發現矽膠變色，應更換新矽膠或烘乾再用。
13.儀器較長時間不使用，應定期通電、預熱。
14.儀器用完之後，須拔去電源，套上儀器罩。
【實驗操作】
1.檢查721A型分光光度計的旋鈕和開關，使其回覆零點。
2.按要求接通電源，按下“T鍵”，開啟暗盒蓋和電源開關，指示燈亮。預熱20分鐘。
3.調節波長旋鈕至所需波長。
4.取比色皿分別盛裝B、S、U液，置入檢測室（比色皿先用蒸餾水洗後，再用比色液潤洗才能裝比色液）。B液對準光路。
5.調節面板“零位細調”，使指示為00.0，即透射比“T”的零點，同時“一”號閃躍。
6.合下檢測室蓋.調節“光量粗、細調”電位器，使指示為100.0，須反覆5、6兩點操作達到穩定。
7.按下“A”鍵，指示為“.000”同時“一”閃躍，如果指示讀數不是比值時，應調節“消光調零“電位器，使其達到要求。
8.拉出或推入拉桿，使U、S液分別置於光路讀取A值，然後移動拉桿，讀B管A值，如為0，則前述A值有效。
9.在穩定時，重複讀數一次，並按下“T”鍵。
10.開啟檢測室蓋，取出比色皿，傾去比色液於水槽中，用自來水沖洗乾淨，倒置於表面皿（鋪有濾紙）中。
11.關上電源開關，拔出電源插頭，取出比色皿架，檢查檢測室內是否有液體濺出，並擦淨。檢測室內放入矽膠袋，合上蓋，套上儀器罩。
【計算】
1.利用標準管計算測定物含量 實際測定過程中，用一已知濃度的測定物按測定管同樣處理顯色，讀取吸光度，再根據（6）式計算，即
A1= K1C1l1 A2= K2C2l2
式中A1、A2分別為已知濃度標準和未知濃度測定吸光度。
c1、c2分別為已知濃度標準管和未知濃度測定管中測定物濃度。
因盛標準液和測定液的比色杯徑長相同（l1=l2），故上二式可寫成：
A1/K1C1= A2/K2C2……………………………………………(7)
因標準液和測定液中溶質為同一物，K值相同，即：
（7）式可換算成下式：
C2=（A2/A1）× C1 …………………………………………(8)
因測定液和標準液在處理過程中體積相同，故（8）式可寫成：
m2 =（A2/A??1）×??m1…………………………………………(9)
式中m1、m2分別表示標準液和測定液中待測物的含量。
（9）式為實驗操作中常用計算式。
【注意事項】
1.儀器須安放在穩固的工作臺上，不能隨意搬動。嚴防震動，潮溼和強光直射。
2.盛裝比色液時，約達比色皿2/3體積，不宜過多或過少。若不慎使溶液流至比色皿外面須用棉花或拭鏡紙擦乾，才能放入比色架。拉比色杆時要輕，以防溶液濺出，腐蝕機械。
3.千萬不可用手或濾紙等物摩擦比色皿的透光面。
4.比色皿用後應立即用自來水沖洗乾淨，若不能洗淨，用5%中性皂溶液或洗衣粉溶液浸泡，也可用新鮮配製的重鉻酸鉀洗液短時間浸泡，然後用水沖洗乾淨，倒置晾乾。
5.每套分光光度計上的比色皿和比色皿架不得隨意更換。
6.試管或試劑不得放置於儀器上，以防試劑濺出腐蝕機殼。
7.如果試劑濺在儀器上，應立即用棉花或紗布擦乾。
8.測定溶液濃度的光密度值宜在0.1—0.7之間最符合光吸收定律，線性好，讀數誤差較小。如光密度超過0.1—1.0範圍，可調節比色液濃度，適當稀釋或加濃，再進行比色。
9.合上檢測室蓋連續工作的時間不宜過長，以防光電管疲乏。每次讀完比色架內的一組讀數後，立即開啟檢測室蓋。
10.儀器連續使用不應超過2小時，必要時間歇半小時再用。
11.測定未知液時，先作該溶液的吸收光譜曲線，再選擇最大吸收峰的波長作為測定波長。
12.721分光光度計的放大器暗盒及單色器箱處放有兩個矽膠筒，檢測室內放矽膠袋，應經常檢查，發現矽膠變色，應更換新矽膠或烘乾再用。
13.儀器較長時間不使用，應定期通電、預熱。
14.儀器用完之後，須拔去電源，套上儀器罩。