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  • 1 # 使用者2458114238191884

    目前應用最廣泛的是由FrederickSanger發明的Sanger雙脫氧鏈終止法(ChainTerminationMethod)。新的測序方法,例如454生物科學的方法和焦磷酸測序法。

    Sanger(桑格)雙脫氧鏈終止法是Sanger於1975年發明的。測序過程需要先做一個PCR反應。PCR過程中,雙脫氧核糖核酸可能隨機的被加入到正在合成中的DNA片段裡。由於雙脫氧核糖核酸多脫了一個氧原子,一旦它被加入到DNA鏈上,這個DNA鏈就不能繼續增加長度。最終的結果是獲得所有可能獲得的、不同長度的DNA片段。目前最普遍最先進的方法,是將雙脫氧核糖核酸進行不同熒游標記。將PCR反應獲得的總DNA透過毛細管電泳分離,跑到最末端的DNA就可以在鐳射的作用下發出熒光。由於ddATP,ddGTP,ddCTP,ddTTP(4種雙脫氧核糖核酸)熒游標記不同,計算機可以自動根據顏色判斷該位置上鹼基究竟是A,T,G,C中的哪一個。

    454生物科學和焦磷酸測序法

    454測序法由454生物科學發明,是一個類似焦磷酸測序法的新方法。2003年向GenBank提交了一個腺病毒全序列,使得他們的技術成為Sanger測序法後第一個被用來測生物基因組全序列的新方法。454使用類似於焦磷酸測序的方法,有著相當高的讀取速度,大約為5小時可以測兩千萬鹼基對

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