以下是從動物病毒中快速提取DNA的方法,請參考該方案採用離心操作,適合於從動物組織樣品中快速提取病毒基因組DNA。以下步驟都在室溫下進行。
1.取50-100mg的動物組織加入約3倍體積的生理鹽水進行勻漿,充分勻漿後10,000rpm離心2min去除殘餘組織。
2.取150μl上清液至新的潔淨離心管中。
3.加入500μlDNA提取液至上清液中,顛倒混勻,室溫靜置5-10min裂解病毒。
4.把DNA吸附柱裝在2ml收集管中,把裂解後的液體全部轉移至DNA吸附柱中,10,000rpm離心1min。
5.倒棄濾液,把DNA吸附柱裝回收集管中,加入400μl洗滌液至DNA吸附柱中,10,000rpm離心1min。注:洗滌液初次使用前請先加入48ml無水乙醇。使用完立即蓋上蓋,以防乙醇揮發。
6.重複步驟5。
7.倒棄收集管中的濾液,把DNA吸附柱裝回收集管中,10,000rpm離心3min。
8.把DNA吸附柱裝在新的潔淨離心管中,加入30-50μl洗脫液至吸附柱中央,靜置1-2min,10,000rpm離心1min,所得即為DNA溶液,可用於後續實驗,若暫時不用,應於-20℃可儲存。
以下是從動物病毒中快速提取DNA的方法,請參考該方案採用離心操作,適合於從動物組織樣品中快速提取病毒基因組DNA。以下步驟都在室溫下進行。
1.取50-100mg的動物組織加入約3倍體積的生理鹽水進行勻漿,充分勻漿後10,000rpm離心2min去除殘餘組織。
2.取150μl上清液至新的潔淨離心管中。
3.加入500μlDNA提取液至上清液中,顛倒混勻,室溫靜置5-10min裂解病毒。
4.把DNA吸附柱裝在2ml收集管中,把裂解後的液體全部轉移至DNA吸附柱中,10,000rpm離心1min。
5.倒棄濾液,把DNA吸附柱裝回收集管中,加入400μl洗滌液至DNA吸附柱中,10,000rpm離心1min。注:洗滌液初次使用前請先加入48ml無水乙醇。使用完立即蓋上蓋,以防乙醇揮發。
6.重複步驟5。
7.倒棄收集管中的濾液,把DNA吸附柱裝回收集管中,10,000rpm離心3min。
8.把DNA吸附柱裝在新的潔淨離心管中,加入30-50μl洗脫液至吸附柱中央,靜置1-2min,10,000rpm離心1min,所得即為DNA溶液,可用於後續實驗,若暫時不用,應於-20℃可儲存。