一、區別

1、意義不同

do和does雖然都可以作為助動詞原形，但does是do的第三人稱單數形式，兩者所指的人稱不同。

2、主語搭配不同

do可以和表示第一人稱（即表示“我”“我們”的英語單詞）和第二人稱（表示“你”“你們”的人稱代詞）的主語搭配，而does只能和表示第三人稱單數的主語搭配，比如他（he）、她（she）以及它（it）搭配，若是第三人稱複數的人稱代詞，則與do搭配使用。

3、單復搭配不同

do既可以與第一、二人稱單數形式搭配，也可與第一、二、三人稱的複數形式搭配，而does則只能與第三人稱單數形式搭配。

二、用法

do和does都可以用作動詞和助動詞：

1、動詞

作為實義動詞（有實在意義的動詞）都可以表示做，乾等意思。

2、助動詞

1）都可以構成一般疑問句；

2） 都可以構成否定句，如do + not ，does + not ；

3）構成否定祈使句；說明：構成否定祈使句只用do，不用did和does。

4）放在動詞原形前，加強該動詞的語氣；

5）用於倒裝句；

6）用作代動詞