關於建設PCR實驗室基本裝置與要求
摘要：規範臨床基擴增檢驗實驗室管理保證臨床基擴增檢驗質量使臨床診斷治療更科、合理特制定本辦
關鍵詞：PCR 實驗室
臨床基擴增檢驗實驗室管理暫行辦
第章 總 則
第條 規範臨床基擴增檢驗實驗室管理保證臨床基擴增檢驗質量使臨床診斷治療更科、合理特制定本辦
第二條 臨床基擴增檢驗技術指臨床診斷治療目擴增檢測DNA或RNA檢測技術聚合酶鏈反應（PCR）、連線酶鏈反應（LCR）、轉錄依賴放系統（TAS）自主序列複製系統（3SR）鏈替代擴增（SDA）等
第三條 本辦適用於展臨床基擴增檢驗實驗室臨床基擴增檢驗實驗室設立二級醫院
第四條 臨床基擴增檢驗實驗室必須使用經家藥品監督管理局批准臨床檢驗試劑展臨床基擴增檢驗專案
第五條 衛部臨床檢驗（簡稱衛部臨檢）省、自治區、直轄市臨床檢驗（簡稱省臨檢）負責所轄行政區域內臨床基擴增檢驗實驗室質量監督管理工作
第二章 實驗室設定驗收
第六條 擬設定臨床基擴增檢驗實驗室醫療機構按照《臨床基擴增檢驗實驗室基本設定標準》（見附件）籌建實驗室；籌建完由定代表向衛部臨檢提技術驗收申請申請需提交材料：
（）《醫療機構執業許證》影印件；
（二）行性研究報告；
1、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室機構所醫療衛資源狀況、本機構基本情況、臨床基擴增檢驗需求及臨床基擴增實驗室執行預測析；
2、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室設定平面圖；
3、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室展檢驗專案、實驗裝置條件關技術員資料
第七條 衛部臨檢省臨檢共同組織相關專業專家組（簡稱專家組）按照《臨床基擴增檢驗實驗室基本設定標準》提申請臨床基擴增檢驗實驗室進行技術驗收驗收完20內驗收報告寄送至申請機構
第八條 經專家組技術驗收合格醫療機構本辦第六條規定材料及專家組驗收報告送至省級行政部備案符合規定全部材料送達省級衛行政部門15內未收省級衛行政部門同意意見展專家組技術驗收合格臨床基擴增檢驗專案
第九條 未經專家組驗收合格並報省級衛行政部門備案醫療機構擅自展臨床基擴增檢驗專案
第三章 實驗室監督管理
第十條 臨床基檢驗實驗室必須按照《臨床基擴增檢驗實驗室工作規範》（另發）展臨床基擴增檢驗工作
第十條 臨床基擴增檢驗實驗室技術員必須進行崗培訓經培訓合格者由培訓單位發給合格證書並培訓合格員名單報衛部臨檢備案獲培訓合格證書者事臨床基擴增檢驗工作
培訓單位衛部臨檢或由省級衛行政部門指定並經衛部臨檢認定機構培訓使用規定統教材
第十二條 科研目基擴增檢驗專案向臨床具檢驗報告向病收取任何費用
第十三條 臨床基擴增檢驗實驗室必須按照《臨床基擴增實驗室工作規範》展室內質量控制並參加衛部臨檢組織室內質量評價
第十四條 衛部臨檢按照本《臨床基擴增實驗室工作規範》協調、組織省臨檢臨床基擴增檢驗實驗室檢驗質量進行監測監測結報省級衛行政部門同抄送監測臨床基擴增檢驗實驗室所醫療機構
第十五條 衛部臨檢或省級臨檢受省級衛行政部門委託臨床基擴增檢驗實驗室進行現場檢查現場檢查工作員履行職責應示證件進行現場檢查檢查員權調閱關資料檢查機構拒絕或隱瞞
第十六條 衛部臨檢室間質量評價合格臨床基擴增檢驗實驗室提警告連續二或三二發現臨床基擴增檢驗結合格臨床基擴增檢驗實驗室衛部臨檢報省級衛行政部門由省級衛行政部門責令其暫停關臨床基擴增檢驗專案限期整改經專家組進行再技術驗收併合格並報省級衛行政部門核准重新展臨床基擴增檢驗專案
第十七條 於未經衛部臨檢組織專家組技術驗收合格並報省級衛部門備案擅自展臨床基檢驗專案醫療機構由省級衛行政部門依據《醫療機構管理條例》第四十七條《醫療機構管理條例實施細則》第八十條予處罰並予公告公告所需費用由公告機構支付
第十八條 現列情況臨床基擴增檢驗實驗室由省級衛行政部門責令其停止展臨床基擴增檢驗並其所醫療機構予公告公告所需費用由公告機構支付：
（） 展超衛部臨檢組織技術驗收合格並報省級衛行政部門備案 臨床基擴增檢驗專案；
（二） 使用未經家藥品監督管理局批准試劑展臨床基擴增檢驗；
（三） 臨床基擴增檢驗未展室內質量控制；
（四） 臨床基擴增檢驗未參加室間質量評價；
（五） 臨床基擴增檢驗弄虛作假；
（六） 科研目基擴增檢驗專案向病收取費用；
（七） 使用未經培訓合格專業技術員事臨床基擴增檢驗；
第四章 附 則
第十九條 採供血機構基擴增檢驗實驗室展基擴增檢驗專案管理參照本辦執行
第二十條 衛部臨檢組織專家組申請展臨床基擴增檢驗實驗室進行技術驗收所需費用按家關規定執行
第二十條 本辦由衛部負責解釋
第二十二條 本辦自發布起施行
附：臨床基擴增檢驗實驗室基本設定標準
根據《臨床檢驗擴增檢驗實驗室管理暫行辦》制定本標準
、 臨床基擴增檢驗實驗室區域設定原則
（） 臨床基擴增檢驗實驗室區域設定原則
1、 試劑儲存準備區
2、 標本製備區
3、 擴增反應混合物配製擴增區
4、 擴增產物析區
使用全自析儀區域適合並
（二） 各工作區域必須明確標記避免同工作區域內裝置、物品混用
（三） 進入各工作區域必須嚴格按照單向進行即試劑儲存準備區 —>標本製備區—>擴增反應混合物配製擴增區—>擴增產物析區
（四） 同工作區域使用同工作服（例同顏色）工作員離各工作區域工作服帶
二、 工作區域儀器裝置配置標準
（） 試劑儲存準備區
1、2-8C-15C冰箱
2、混勻器
3、微量加器（覆蓋1-1000ul）
4、移紫外燈（近工作臺面）
5、消耗品：性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸（帶濾）
6、專用工作服工作鞋
7、專用辦公用品
（二） 標本製備區
1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱
2、高速臺式冷凍離機
3、混允器
4、水浴箱或加熱模組
5、微量加器（覆蓋1-1000ul）
6、移紫外燈（近工作臺面）
7、超淨工作臺
8、消耗品：性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸（帶濾）
9、專用工作服工作鞋
10、專用辦公用品
需處理DNA應具超聲波水浴儀
（三） 擴增反應混合物配製擴增區
1、 核酸擴增儀
2、 微量加器（覆蓋1-1000ul）
3、 移紫外燈（近工作臺面）
4、 消耗品：性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸（帶濾）
5、 專用工作服工作鞋
6、 專用辦公用品
(四)擴增產物析區
視檢驗同定基本儀器裝置：
1、 微量加器（覆蓋1-1000ul）
2、 移紫外燈（近工作臺面）
3、 消耗品：性手套、性吸水紙、加器吸（帶濾）
4、 專用工作服工作鞋
5、 專用辦公用品
特定序列進行PCR做重複檢測,需要三同區域,每區域具體技術操作試劑面詳細列.
1、品準備區
區域專門用作品準備製備操作用於核酸提取試劑應該採
取預防措施：
1）PCR產物帶要擴增序列DNA克隆能房間操作
2）組織培養物、組織標本血清品都帶進品準備間處理根據應用需要提取DNA或RNA
3）用於品處理工具能用作普通克隆工具能用作操作靶序列
4）DNA品應該用專門防護或壓塞式移液管操作防止吸取品氣溶膠遺留
5）體積品應該用單獨包裝菌性移液管吸取
6）管打前都要簡短離減少氣溶膠產且管能用力崩產氣溶膠
7）任何候都應該穿實驗服帶手套手套要經更換尤其抽提程每步間都要更換實驗服要專門用於品準備間經清洗
2、品準備RNA-PCR
3、前PCR區
必須專門用於準備各種反應區域區域必須保持乾淨且沒自克隆品準備汙染前PCR區必須要試劑準備特別專門用於前PCR區壓塞式移液管
4、PCR實驗室試劑操作
1）所用所溶液都應該沒核酸（或）核酸酶（DNaseRNase）汙染
2）所PCR試劑使用水都應該高質量－新鮮蒸餾離水用0.22μm濾並且高壓滅菌
3）20℃25℃貯存試劑建議加點像疊氮鈉類抗微物劑擴增試劑或品製備試劑加入0.025%疊氮鈉抑制擴增反應
4）所用試劑都應該體積配製實驗看試劑否滿意裝僅夠使用量進行貯存
5）所試劑品準備程都要使用性滅菌瓶管
6）新配製試劑用於準備新標本前應該加檢驗
7）品準備前PCR區所使用移液管使用都應該儲存
5、前PCR區建立PCR混合物
1）即刻用主混合物溶液配、裝並儲存-20℃或4℃實驗室涉及擴增種或少數幾種特異序列做用
2）實驗室使用套引物致於配製包括所試劑單反應混合物夠經濟考慮裝儲存夠PCR
3）作規則應該儲存套陰性、弱陽性強陽性照品析品配製PCR前程效率潔淨程度且希望通使用已知弱陽性品驗證品緩衝液證明面含擴增抑制物
4）陰性品要與每組品同做析否存品與品間汙染及否存PCR產物汙染陰性照應該包括核酸外所試劑
5）做陽性照兩理由決定應該使用少數量核酸
6）由於必須照反應照模板特點應該予考慮
6、控制汙染
已設計力酶用消除種形式汙染—使用UNG技術能效消除由PCR產物引起汙染另種控制汙染使用紫外線種能完全消除汙染問題汙染降低幾數量級
7、PCR儀位置
8、PCR區
PCR完需要析品並解釋資料應該留專門用於反應處理品PCR使用所用試劑、性耗材儀器都必須專門用於目決能實驗室區域試劑或儀器用於任何前PCR更問題請諮詢廣州雅瑪實驗室
關於建設PCR實驗室基本裝置與要求
摘要：規範臨床基擴增檢驗實驗室管理保證臨床基擴增檢驗質量使臨床診斷治療更科、合理特制定本辦
關鍵詞：PCR 實驗室
臨床基擴增檢驗實驗室管理暫行辦
第章 總 則
第條 規範臨床基擴增檢驗實驗室管理保證臨床基擴增檢驗質量使臨床診斷治療更科、合理特制定本辦
第二條 臨床基擴增檢驗技術指臨床診斷治療目擴增檢測DNA或RNA檢測技術聚合酶鏈反應（PCR）、連線酶鏈反應（LCR）、轉錄依賴放系統（TAS）自主序列複製系統（3SR）鏈替代擴增（SDA）等
第三條 本辦適用於展臨床基擴增檢驗實驗室臨床基擴增檢驗實驗室設立二級醫院
第四條 臨床基擴增檢驗實驗室必須使用經家藥品監督管理局批准臨床檢驗試劑展臨床基擴增檢驗專案
第五條 衛部臨床檢驗（簡稱衛部臨檢）省、自治區、直轄市臨床檢驗（簡稱省臨檢）負責所轄行政區域內臨床基擴增檢驗實驗室質量監督管理工作
第二章 實驗室設定驗收
第六條 擬設定臨床基擴增檢驗實驗室醫療機構按照《臨床基擴增檢驗實驗室基本設定標準》（見附件）籌建實驗室；籌建完由定代表向衛部臨檢提技術驗收申請申請需提交材料：
（）《醫療機構執業許證》影印件；
（二）行性研究報告；
1、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室機構所醫療衛資源狀況、本機構基本情況、臨床基擴增檢驗需求及臨床基擴增實驗室執行預測析；
2、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室設定平面圖；
3、 擬設臨床基擴增檢驗實驗室展檢驗專案、實驗裝置條件關技術員資料
第七條 衛部臨檢省臨檢共同組織相關專業專家組（簡稱專家組）按照《臨床基擴增檢驗實驗室基本設定標準》提申請臨床基擴增檢驗實驗室進行技術驗收驗收完20內驗收報告寄送至申請機構
第八條 經專家組技術驗收合格醫療機構本辦第六條規定材料及專家組驗收報告送至省級行政部備案符合規定全部材料送達省級衛行政部門15內未收省級衛行政部門同意意見展專家組技術驗收合格臨床基擴增檢驗專案
第九條 未經專家組驗收合格並報省級衛行政部門備案醫療機構擅自展臨床基擴增檢驗專案
第三章 實驗室監督管理
第十條 臨床基檢驗實驗室必須按照《臨床基擴增檢驗實驗室工作規範》（另發）展臨床基擴增檢驗工作
第十條 臨床基擴增檢驗實驗室技術員必須進行崗培訓經培訓合格者由培訓單位發給合格證書並培訓合格員名單報衛部臨檢備案獲培訓合格證書者事臨床基擴增檢驗工作
培訓單位衛部臨檢或由省級衛行政部門指定並經衛部臨檢認定機構培訓使用規定統教材
第十二條 科研目基擴增檢驗專案向臨床具檢驗報告向病收取任何費用
第十三條 臨床基擴增檢驗實驗室必須按照《臨床基擴增實驗室工作規範》展室內質量控制並參加衛部臨檢組織室內質量評價
第十四條 衛部臨檢按照本《臨床基擴增實驗室工作規範》協調、組織省臨檢臨床基擴增檢驗實驗室檢驗質量進行監測監測結報省級衛行政部門同抄送監測臨床基擴增檢驗實驗室所醫療機構
第十五條 衛部臨檢或省級臨檢受省級衛行政部門委託臨床基擴增檢驗實驗室進行現場檢查現場檢查工作員履行職責應示證件進行現場檢查檢查員權調閱關資料檢查機構拒絕或隱瞞
第十六條 衛部臨檢室間質量評價合格臨床基擴增檢驗實驗室提警告連續二或三二發現臨床基擴增檢驗結合格臨床基擴增檢驗實驗室衛部臨檢報省級衛行政部門由省級衛行政部門責令其暫停關臨床基擴增檢驗專案限期整改經專家組進行再技術驗收併合格並報省級衛行政部門核准重新展臨床基擴增檢驗專案
第十七條 於未經衛部臨檢組織專家組技術驗收合格並報省級衛部門備案擅自展臨床基檢驗專案醫療機構由省級衛行政部門依據《醫療機構管理條例》第四十七條《醫療機構管理條例實施細則》第八十條予處罰並予公告公告所需費用由公告機構支付
第十八條 現列情況臨床基擴增檢驗實驗室由省級衛行政部門責令其停止展臨床基擴增檢驗並其所醫療機構予公告公告所需費用由公告機構支付：
（） 展超衛部臨檢組織技術驗收合格並報省級衛行政部門備案 臨床基擴增檢驗專案；
（二） 使用未經家藥品監督管理局批准試劑展臨床基擴增檢驗；
（三） 臨床基擴增檢驗未展室內質量控制；
（四） 臨床基擴增檢驗未參加室間質量評價；
（五） 臨床基擴增檢驗弄虛作假；
（六） 科研目基擴增檢驗專案向病收取費用；
（七） 使用未經培訓合格專業技術員事臨床基擴增檢驗；
第四章 附 則
第十九條 採供血機構基擴增檢驗實驗室展基擴增檢驗專案管理參照本辦執行
第二十條 衛部臨檢組織專家組申請展臨床基擴增檢驗實驗室進行技術驗收所需費用按家關規定執行
第二十條 本辦由衛部負責解釋
第二十二條 本辦自發布起施行
附：臨床基擴增檢驗實驗室基本設定標準
根據《臨床檢驗擴增檢驗實驗室管理暫行辦》制定本標準
、 臨床基擴增檢驗實驗室區域設定原則
（） 臨床基擴增檢驗實驗室區域設定原則
1、 試劑儲存準備區
2、 標本製備區
3、 擴增反應混合物配製擴增區
4、 擴增產物析區
使用全自析儀區域適合並
（二） 各工作區域必須明確標記避免同工作區域內裝置、物品混用
（三） 進入各工作區域必須嚴格按照單向進行即試劑儲存準備區 —>標本製備區—>擴增反應混合物配製擴增區—>擴增產物析區
（四） 同工作區域使用同工作服（例同顏色）工作員離各工作區域工作服帶
二、 工作區域儀器裝置配置標準
（） 試劑儲存準備區
1、2-8C-15C冰箱
2、混勻器
3、微量加器（覆蓋1-1000ul）
4、移紫外燈（近工作臺面）
5、消耗品：性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸（帶濾）
6、專用工作服工作鞋
7、專用辦公用品
（二） 標本製備區
1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱
2、高速臺式冷凍離機
3、混允器
4、水浴箱或加熱模組
5、微量加器（覆蓋1-1000ul）
6、移紫外燈（近工作臺面）
7、超淨工作臺
8、消耗品：性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸（帶濾）
9、專用工作服工作鞋
10、專用辦公用品
需處理DNA應具超聲波水浴儀
（三） 擴增反應混合物配製擴增區
1、 核酸擴增儀
2、 微量加器（覆蓋1-1000ul）
3、 移紫外燈（近工作臺面）
4、 消耗品：性手套、性吸水紙、耐高壓處理離管加器吸（帶濾）
5、 專用工作服工作鞋
6、 專用辦公用品
(四)擴增產物析區
視檢驗同定基本儀器裝置：
1、 微量加器（覆蓋1-1000ul）
2、 移紫外燈（近工作臺面）
3、 消耗品：性手套、性吸水紙、加器吸（帶濾）
4、 專用工作服工作鞋
5、 專用辦公用品
特定序列進行PCR做重複檢測,需要三同區域,每區域具體技術操作試劑面詳細列.
1、品準備區
區域專門用作品準備製備操作用於核酸提取試劑應該採
取預防措施：
1）PCR產物帶要擴增序列DNA克隆能房間操作
2）組織培養物、組織標本血清品都帶進品準備間處理根據應用需要提取DNA或RNA
3）用於品處理工具能用作普通克隆工具能用作操作靶序列
4）DNA品應該用專門防護或壓塞式移液管操作防止吸取品氣溶膠遺留
5）體積品應該用單獨包裝菌性移液管吸取
6）管打前都要簡短離減少氣溶膠產且管能用力崩產氣溶膠
7）任何候都應該穿實驗服帶手套手套要經更換尤其抽提程每步間都要更換實驗服要專門用於品準備間經清洗
2、品準備RNA-PCR
3、前PCR區
必須專門用於準備各種反應區域區域必須保持乾淨且沒自克隆品準備汙染前PCR區必須要試劑準備特別專門用於前PCR區壓塞式移液管
4、PCR實驗室試劑操作
1）所用所溶液都應該沒核酸（或）核酸酶（DNaseRNase）汙染
2）所PCR試劑使用水都應該高質量－新鮮蒸餾離水用0.22μm濾並且高壓滅菌
3）20℃25℃貯存試劑建議加點像疊氮鈉類抗微物劑擴增試劑或品製備試劑加入0.025%疊氮鈉抑制擴增反應
4）所用試劑都應該體積配製實驗看試劑否滿意裝僅夠使用量進行貯存
5）所試劑品準備程都要使用性滅菌瓶管
6）新配製試劑用於準備新標本前應該加檢驗
7）品準備前PCR區所使用移液管使用都應該儲存
5、前PCR區建立PCR混合物
1）即刻用主混合物溶液配、裝並儲存-20℃或4℃實驗室涉及擴增種或少數幾種特異序列做用
2）實驗室使用套引物致於配製包括所試劑單反應混合物夠經濟考慮裝儲存夠PCR
3）作規則應該儲存套陰性、弱陽性強陽性照品析品配製PCR前程效率潔淨程度且希望通使用已知弱陽性品驗證品緩衝液證明面含擴增抑制物
4）陰性品要與每組品同做析否存品與品間汙染及否存PCR產物汙染陰性照應該包括核酸外所試劑
5）做陽性照兩理由決定應該使用少數量核酸
6）由於必須照反應照模板特點應該予考慮
6、控制汙染
已設計力酶用消除種形式汙染—使用UNG技術能效消除由PCR產物引起汙染另種控制汙染使用紫外線種能完全消除汙染問題汙染降低幾數量級
7、PCR儀位置
8、PCR區
PCR完需要析品並解釋資料應該留專門用於反應處理品PCR使用所用試劑、性耗材儀器都必須專門用於目決能實驗室區域試劑或儀器用於任何前PCR更問題請諮詢廣州雅瑪實驗室