1，準備工作：

人工授精所有器械消毒結束後按順序擺放在恆溫乾燥箱中（37度），授精室內清潔消毒後將紫外線燈開20分鐘，準備好毛巾（種公犬消毒用）、兩個水盆（一個盛放消毒種公犬的消毒水。另一個盛放消毒用後器械的消毒水）、贓物桶，提前30分鐘將恆溫水浴鍋啟動（加熱稀釋液到30度），將室內溫度提升到20度後，輸精人員方可進入，人員著裝後（白大衣、拖鞋、手套、帽子、口罩）即可開始人工授精工作。

2，採精：

種公採精後，先用毛巾將種公犬胯下及臀部至後腿上部的毛擦溼（避免採精時落入灰塵），然後採精，採出的精液連同採精杯應立刻放入加熱的水浴鍋中，用膠頭滴管吸取一滴精液進行顯微鏡（搭配37度恆溫載物臺上）檢測，檢測合格方可進行稀釋。

注意：種公犬頭兩次採精精液活力較弱、死精較多為正常現象，是因為貯藏在睪丸裡的精液時間過長，不要驚慌，多采幾次後即可正常。

3，輸精：

母狗保定後，先用醫用棉籤或手紙將母狗外陰部擦淨，即可進行輸精操作，先把開膣器或者膣鏡燈外緣均勻塗上潤滑劑，一邊輕輕按摩母犬外陰，一邊緩慢插入陰道；然後用一次性注射器套上輸精針抽取精液，將母狗垂直提起臀部朝上，把精液緩慢注入子宮。

注意：如果在拔出開膣器或輸精針時發現帶有膿性分泌物，請提醒狗主人立即治療，器械應單獨消毒處理。如果在拔出開膣器或輸精針時發現帶有膿性分泌物，請提醒狗主人立即治療，器械應單獨消毒處理。開膣器和膣鏡燈必須用小試管刷或者牙刷通入內部仔細刷洗，尤其是管的前端。消毒過的器械應該立即放入事先消毒好的醫用托盤中或者消毒櫃中分別盛放，進行消毒儲存。使用前先將消毒櫃的溫度升至37度方可使用。