1、結晶紫染液：結晶紫乙醇飽和液(結晶紫2g溶於20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸銨水溶液80mL 將兩液混勻置24h後過濾即成。2、番紅溶液：番紅O(safranine，又稱沙黃O)2.5g, 95%乙醇100mL，溶解後可貯存於密閉的棕色瓶中，用時取20mL與80mL蒸餾水混勻即可。結晶紫染液、番紅染液都是革蘭氏染色液的兩種主要試劑，革蘭氏染色劑不僅用來觀察細菌的形態，而且它還是細菌鑑定的重要方法，它可將全部細菌區分別革蘭氏陽性菌和陰性菌兩大類。擴充套件資料:一、革蘭氏染色法的步驟為：塗片→固定→結晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脫色→番紅復染→水洗→乾燥→觀察。二、結晶紫染色法測定細胞數1、在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164細胞的培養液（含10%小牛血清的RPMI-1640培養液），37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養2～3小時，讓細胞帖壁。2、用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標準品，根據需要3～5倍遞次稀釋待檢樣品，每孔加0.1ml稀釋的標準品或待檢樣品，每個稀釋度3個重複孔。對照孔6個，3個陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養液，3個陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養液。繼續培養18～24小時。3、甩去培養液，用PBS小心洗滌一次，每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細胞30秒鐘。4、吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml結晶紫染液，室溫中放置20分鐘。5、輕輕甩去染色液，用蒸餾水洗滌各孔，將培養板倒置於吸水紙上吸乾水分。自然乾燥或37℃烘乾。此板可以在室溫中長期儲存。6、測定前，每孔加0.1ml 33%醋酸脫色，充分振盪後在570nm處測定光吸收度。用光吸收度（OD）值對樣品稀釋度作圖，比較標準品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子活性
1、結晶紫染液：結晶紫乙醇飽和液(結晶紫2g溶於20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸銨水溶液80mL 將兩液混勻置24h後過濾即成。2、番紅溶液：番紅O(safranine，又稱沙黃O)2.5g, 95%乙醇100mL，溶解後可貯存於密閉的棕色瓶中，用時取20mL與80mL蒸餾水混勻即可。結晶紫染液、番紅染液都是革蘭氏染色液的兩種主要試劑，革蘭氏染色劑不僅用來觀察細菌的形態，而且它還是細菌鑑定的重要方法，它可將全部細菌區分別革蘭氏陽性菌和陰性菌兩大類。擴充套件資料:一、革蘭氏染色法的步驟為：塗片→固定→結晶紫色染色→水洗→碘液媒染→水洗→酒精脫色→番紅復染→水洗→乾燥→觀察。二、結晶紫染色法測定細胞數1、在96孔細胞培養板各孔中加0.1ml含5×104～10×4 WEHI-164細胞的培養液（含10%小牛血清的RPMI-1640培養液），37℃ 5% CO2的二氧化碳培養箱中培養2～3小時，讓細胞帖壁。2、用RPMI-1640培養液10倍遞次稀釋TNF標準品，根據需要3～5倍遞次稀釋待檢樣品，每孔加0.1ml稀釋的標準品或待檢樣品，每個稀釋度3個重複孔。對照孔6個，3個陽性對照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培養液，3個陰性對照孔各加100μl RPMI-1640培養液。繼續培養18～24小時。3、甩去培養液，用PBS小心洗滌一次，每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定細胞30秒鐘。4、吸去甲醇溶液，每孔加0.1ml結晶紫染液，室溫中放置20分鐘。5、輕輕甩去染色液，用蒸餾水洗滌各孔，將培養板倒置於吸水紙上吸乾水分。自然乾燥或37℃烘乾。此板可以在室溫中長期儲存。6、測定前，每孔加0.1ml 33%醋酸脫色，充分振盪後在570nm處測定光吸收度。用光吸收度（OD）值對樣品稀釋度作圖，比較標準品曲線和待檢樣品曲線即可得到待測樣品中的細胞因子活性