篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法

碭山酥梨是中國主要梨出口品種之一，其種植面積大、產量高，因為其自花授粉座 果率極低，所以在生產上必須配置合適的授粉樹。但由於授粉品種配置不恰當和田間管理 不科學等原因，導致碭山酥梨品質逐漸下滑，主要表現為果實大小不均勻，果肉多渣、含糖 量低且口感較差。相關研究表明，梨果實石細胞的密度、含量是影響梨果實品質的重要因素 之一，它不僅影響梨果實口感、果肉質地，還與果實含糖量及果汁含量密切相關，而且石細 胞的大小與含量主要受遺傳控制，是一種數量性狀遺傳。

因為梨具有花粉直感現象，所以父本授粉會直接影響梨果實性狀，選擇不同的梨 品種授粉，梨果實相關性狀如石細胞大小及含量會有所不同，且父本梨與母本梨親緣關係 的遠近不同，子代果實性狀會有一定的差異性。由此可見，授粉樹的選擇對梨果實品質的優 劣有著重要影響，然而，大部分地區果農都是根據生產經驗選擇當地固定的授粉樹，往往由 於配置不當，降低了果園整體產量和經濟效益，打擊種植積極性。

目標起始密碼子多型性（start codon targeted polymorphism, SCoT)標記是近 年來興起的一種新的DNA分子標記技術，具有多型性高，重複性好，引物通用性強等特點， 目前，SCoT標記在植物種質資源多樣性方面有著廣泛的應用，但是對於梨種質資源多樣性 和親緣關係方面研究鮮見報道。利用SCoT標記可以從分子層面更快速準確地對梨資源進 行遺傳歸類，從而選擇與碭山酥梨不同親緣關係的授粉樹對碭山酥梨進行授粉，調控果實 石細胞團大小及含量，為篩選出恰當親緣關係的優良授粉品種，提高梨果實品質，提供理論 和實踐依據。

透過分子標記篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法， 該方法可為碭山酥梨授粉品種配置、果實品質改良及品種選育提供技術指導。

為了達到本發明目的，採用方案如下：

種篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法，其特點在於，按如下步驟進行：

(1)提取授粉梨品種葉片的DNA ;

(2)進行SCoT-PCR反應，對反應產物電泳檢測，）透過⑷電泳結果，記錄清晰而 且可辨認的條帶，計算遺傳相似係數，進而進行聚類分析，構建授粉梨品種之間的親緣關係 聚類圖；

(3)根據SCoT分子標記聚類分析結果，選取親緣關係遠、中、近的授粉品種樹給碭 山酥梨進行授粉；

(4)對每個授粉品種所結成熟果實果肉組織的石細胞團數目及面積進行顯微觀 察、計算；並測定石細胞含量；

(5)透過步驟（4)的分析結果，帥選出最優親緣關係授粉梨品種。

不同的品種對環境條件要求差異很大，要堅持適地適栽的原則。主栽品種根據當地立地條件、市場需求而定，注意早、中、晚熟品種合理搭配。一般早熟品種佔10%～20%，中熟品種佔20%～30%，晚熟品種佔50%～70%。

梨樹自花不結實，生產上要合理配置授粉樹。授粉樹與主栽品種相互授粉坐果率高；能適應當地的自然環境，抗逆性強；果實有較高的經濟價值。

主栽品種與授粉樹之間的比例一般為（4～6）∶1。目前國內梨主栽品種及其適宜的授粉樹如表5-1所示。

表5-1梨樹主栽品種及其適宜的授粉樹品種

梨樹主栽品種其適宜的授粉樹品種黃冠冀蜜、鴨梨、雪花梨、中梨1號圓黃鮮黃、早生黃金、黃花、華山豐水黃花、新興、新水、雪青南果蘋果梨、巴梨、茌梨新高鴨梨、京白梨、碭山酥梨、金花梨、豐水西子綠早酥、杭青、黃冠、中梨1號翠冠清香、黃花、新雅、雪青碭山酥梨茌梨、鴨梨、碭山馬蹄黃、中梨1號、黃冠雪花梨黃冠、早酥、冀蜜、豐水鴨梨碭山酥梨、京白梨、黃冠、金花梨、雪青庫爾勒香梨鴨梨、雪花梨、碭山酥梨、黃冠紅香酥碭山酥梨、雪花梨、鴨梨、豐水

　　雪梨：味甘性寒，含蘋果酸、檸檬酸、維生素B1、B2、C、胡蘿蔔素等，具生津潤燥、清熱化痰之功效，特別適合秋天食用。《本草綱目》記載，梨者，利也，其性下行流利。它藥用能治風熱、潤肺、涼心、消痰、降火、解毒。現代醫學研究證明，梨確有潤肺清燥、止咳化痰、養血生肌的作用。因此對急性氣管炎和上呼吸道感染的患者出現的咽喉幹、癢、痛、音啞、痰稠、便秘、尿赤均有良效。梨又有降低血壓和養陰清熱的效果，所以高血壓、肝炎、肝硬化病人常吃梨有好處。梨可以生吃，也可以蒸，還可以做成湯和羹。但是梨性寒，一次不宜多吃。尤其脾胃虛寒、腹部冷痛和血虛者，不可以多吃。　　碭山酥梨馳名中外，果大核小、黃亮美觀、皮薄多汁、酥脆甘甜，併兼有止渴生津、社熱消暑、化痰潤肺、止咳平喘、通便利尿之功能。碭山是以酥梨生產為龍頭，多種水果並存的綜合水果大區，縣園藝場獲“國際龍馬金獎”的“碭園”牌酥梨，果園場的“翡翠”牌酥梨，縣果科所的無公害套袋酥梨，西南門鎮的囗子貢梨，良梨鎮的“皇考梨”，唐寨 、李莊鎮的高產、優質的高檔品種酥梨等數家拳頭產品，以及縣市力集園藝場被頒發了綠色食品證書並評為“中華名果”的“仙園牌”酥梨，更是名馳九洲，譽滿天下。　　碭山酥梨　　果實大，平均重270g。近圓柱形。黃綠色，貯存後黃色，果皮光滑，果點小而密。果肉白色，肉稍粗，但酥脆爽口，汁多味甜，有香氣。果心小，品質上，9月上旬成熟，果實供應期從9月至次年5月。

碭山酥梨是中國主要梨出口品種之一，其種植面積大、產量高，因為其自花授粉座 果率極低，所以在生產上必須配置合適的授粉樹。但由於授粉品種配置不恰當和田間管理 不科學等原因，導致碭山酥梨品質逐漸下滑，主要表現為果實大小不均勻，果肉多渣、含糖 量低且口感較差。相關研究表明，梨果實石細胞的密度、含量是影響梨果實品質的重要因素 之一，它不僅影響梨果實口感、果肉質地，還與果實含糖量及果汁含量密切相關，而且石細 胞的大小與含量主要受遺傳控制，是一種數量性狀遺傳。

因為梨具有花粉直感現象，所以父本授粉會直接影響梨果實性狀，選擇不同的梨 品種授粉，梨果實相關性狀如石細胞大小及含量會有所不同，且父本梨與母本梨親緣關係 的遠近不同，子代果實性狀會有一定的差異性。由此可見，授粉樹的選擇對梨果實品質的優 劣有著重要影響，然而，大部分地區果農都是根據生產經驗選擇當地固定的授粉樹，往往由 於配置不當，降低了果園整體產量和經濟效益，打擊種植積極性。

目標起始密碼子多型性（start codon targeted polymorphism, SCoT)標記是近 年來興起的一種新的DNA分子標記技術，具有多型性高，重複性好，引物通用性強等特點， 目前，SCoT標記在植物種質資源多樣性方面有著廣泛的應用，但是對於梨種質資源多樣性 和親緣關係方面研究鮮見報道。利用SCoT標記可以從分子層面更快速準確地對梨資源進 行遺傳歸類，從而選擇與碭山酥梨不同親緣關係的授粉樹對碭山酥梨進行授粉，調控果實 石細胞團大小及含量，為篩選出恰當親緣關係的優良授粉品種，提高梨果實品質，提供理論 和實踐依據。

透過分子標記篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法， 該方法可為碭山酥梨授粉品種配置、果實品質改良及品種選育提供技術指導。

為了達到本發明目的，採用方案如下：

種篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法，其特點在於，按如下步驟進行：

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(2)進行SCoT-PCR反應，對反應產物電泳檢測，）透過⑷電泳結果，記錄清晰而 且可辨認的條帶，計算遺傳相似係數，進而進行聚類分析，構建授粉梨品種之間的親緣關係 聚類圖；

(3)根據SCoT分子標記聚類分析結果，選取親緣關係遠、中、近的授粉品種樹給碭 山酥梨進行授粉；

(4)對每個授粉品種所結成熟果實果肉組織的石細胞團數目及面積進行顯微觀 察、計算；並測定石細胞含量；

(5)透過步驟（4)的分析結果，帥選出最優親緣關係授粉梨品種。

篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法

碭山酥梨是中國主要梨出口品種之一，其種植面積大、產量高，因為其自花授粉座 果率極低，所以在生產上必須配置合適的授粉樹。但由於授粉品種配置不恰當和田間管理 不科學等原因，導致碭山酥梨品質逐漸下滑，主要表現為果實大小不均勻，果肉多渣、含糖 量低且口感較差。相關研究表明，梨果實石細胞的密度、含量是影響梨果實品質的重要因素 之一，它不僅影響梨果實口感、果肉質地，還與果實含糖量及果汁含量密切相關，而且石細 胞的大小與含量主要受遺傳控制，是一種數量性狀遺傳。

因為梨具有花粉直感現象，所以父本授粉會直接影響梨果實性狀，選擇不同的梨 品種授粉，梨果實相關性狀如石細胞大小及含量會有所不同，且父本梨與母本梨親緣關係 的遠近不同，子代果實性狀會有一定的差異性。由此可見，授粉樹的選擇對梨果實品質的優 劣有著重要影響，然而，大部分地區果農都是根據生產經驗選擇當地固定的授粉樹，往往由 於配置不當，降低了果園整體產量和經濟效益，打擊種植積極性。

目標起始密碼子多型性（start codon targeted polymorphism, SCoT)標記是近 年來興起的一種新的DNA分子標記技術，具有多型性高，重複性好，引物通用性強等特點， 目前，SCoT標記在植物種質資源多樣性方面有著廣泛的應用，但是對於梨種質資源多樣性 和親緣關係方面研究鮮見報道。利用SCoT標記可以從分子層面更快速準確地對梨資源進 行遺傳歸類，從而選擇與碭山酥梨不同親緣關係的授粉樹對碭山酥梨進行授粉，調控果實 石細胞團大小及含量，為篩選出恰當親緣關係的優良授粉品種，提高梨果實品質，提供理論 和實踐依據。

透過分子標記篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法， 該方法可為碭山酥梨授粉品種配置、果實品質改良及品種選育提供技術指導。

為了達到本發明目的，採用方案如下：

種篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法，其特點在於，按如下步驟進行：

(1)提取授粉梨品種葉片的DNA ;

(2)進行SCoT-PCR反應，對反應產物電泳檢測，）透過⑷電泳結果，記錄清晰而 且可辨認的條帶，計算遺傳相似係數，進而進行聚類分析，構建授粉梨品種之間的親緣關係 聚類圖；

(3)根據SCoT分子標記聚類分析結果，選取親緣關係遠、中、近的授粉品種樹給碭 山酥梨進行授粉；

(4)對每個授粉品種所結成熟果實果肉組織的石細胞團數目及面積進行顯微觀 察、計算；並測定石細胞含量；

(5)透過步驟（4)的分析結果，帥選出最優親緣關係授粉梨品種。

黃梨和鴨梨適合做碭山酥梨的授粉樹，每年的清明節前後是碭山酥梨花盛開的時候，聰明的農民提前把黃梨花從樹上摘下來，用電風扇打梨花，就是把電扇開啟，扇葉就轉動，然後把梨花一點一點放進去，打下的是花瓣 和花蕊，再把花蕊和花瓣分開。找一個大箱子，提前準備一個帶線和插頭的白熾燈，然後放倒箱子挖個小洞，插頭從小洞穿過插到插座上，把清理乾淨的花蕊分幾堆放到白紙上，然後放進紙箱裡，開啟白熾燈，旁邊放個溫度計，把紙箱封好，外面用被子裹好，一般兩三天就可以照好了，花粉是黃色的，等到梨花開的好天氣也好的時候，授粉最好，用雞毛撣子沾上花粉往花蕊上輕輕地抹 ，等到花粉變黑色，要立刻換新的，一般收授2-3遍就可以的，

篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法

碭山酥梨是中國主要梨出口品種之一，其種植面積大、產量高，因為其自花授粉座 果率極低，所以在生產上必須配置合適的授粉樹。但由於授粉品種配置不恰當和田間管理 不科學等原因，導致碭山酥梨品質逐漸下滑，主要表現為果實大小不均勻，果肉多渣、含糖 量低且口感較差。相關研究表明，梨果實石細胞的密度、含量是影響梨果實品質的重要因素 之一，它不僅影響梨果實口感、果肉質地，還與果實含糖量及果汁含量密切相關，而且石細 胞的大小與含量主要受遺傳控制，是一種數量性狀遺傳。

因為梨具有花粉直感現象，所以父本授粉會直接影響梨果實性狀，選擇不同的梨 品種授粉，梨果實相關性狀如石細胞大小及含量會有所不同，且父本梨與母本梨親緣關係 的遠近不同，子代果實性狀會有一定的差異性。由此可見，授粉樹的選擇對梨果實品質的優 劣有著重要影響，然而，大部分地區果農都是根據生產經驗選擇當地固定的授粉樹，往往由 於配置不當，降低了果園整體產量和經濟效益，打擊種植積極性。

目標起始密碼子多型性（start codon targeted polymorphism, SCoT)標記是近 年來興起的一種新的DNA分子標記技術，具有多型性高，重複性好，引物通用性強等特點， 目前，SCoT標記在植物種質資源多樣性方面有著廣泛的應用，但是對於梨種質資源多樣性 和親緣關係方面研究鮮見報道。利用SCoT標記可以從分子層面更快速準確地對梨資源進 行遺傳歸類，從而選擇與碭山酥梨不同親緣關係的授粉樹對碭山酥梨進行授粉，調控果實 石細胞團大小及含量，為篩選出恰當親緣關係的優良授粉品種，提高梨果實品質，提供理論 和實踐依據。

透過分子標記篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法， 該方法可為碭山酥梨授粉品種配置、果實品質改良及品種選育提供技術指導。

為了達到本發明目的，採用方案如下：

種篩選碭山酥梨適宜授粉梨品種的方法，其特點在於，按如下步驟進行：

(1)提取授粉梨品種葉片的DNA ;

(2)進行SCoT-PCR反應，對反應產物電泳檢測，）透過⑷電泳結果，記錄清晰而 且可辨認的條帶，計算遺傳相似係數，進而進行聚類分析，構建授粉梨品種之間的親緣關係 聚類圖；

(3)根據SCoT分子標記聚類分析結果，選取親緣關係遠、中、近的授粉品種樹給碭 山酥梨進行授粉；

(4)對每個授粉品種所結成熟果實果肉組織的石細胞團數目及面積進行顯微觀 察、計算；並測定石細胞含量；

(5)透過步驟（4)的分析結果，帥選出最優親緣關係授粉梨品種。

給碭山酥梨授粉的品種很多，每畝配15棵即可達到目的，比如鴨梨，黃冠梨，雪花梨，紅梨，香梨等都不是很好的授粉樹。

碭山酥梨栽培歷史悠久，是中國傳統三大名梨之首，原產於安徽省碭山縣。以其汁多味甜且具有潤肺止作用而馳名中外。碭山酥梨已有千年歷史，古時候作為上奉給朝廷。碭山酥梨不僅酥脆爽口，入口即化，營養價值與養生價值也極高。

上世紀80年代，碭山酥梨被引進到我的家鄉--陝西省蒲城縣。

蒲城是國家農業部命名的“中國酥梨之鄉”，是國內外專家公認的"世界優等酥梨最佳生態區"。蒲城酥梨以形美、果大、皮薄、色亮、質脆、含糖量高、鬱香爽口、耐儲存等特點得了消費者的青睞，人們形象的比喻為“大如拳、甜如蜜、脆如菱”，被評為“中華名果”。當前，蒲城在全縣建立了25萬畝綠色果品基地，推廣生態果園技術，按照綠色果品生產標準和操作規程對果品生產實行全程質量控制，特別是無菌害套袋的運用，使果品外觀更美，果面更潔淨，農藥殘留小，大大提高了果品質量，從而使“蒲城酥梨”得以出口國外。

碭山酥梨的植物學特性

碭山酥梨樹勢中等偏強，萌芽力強，成枝力中等。一般定植後3年可以初步開花見果，4-5年進入豐產期。碭山酥梨在引進蒲城初期，大多采用密植技術，株行距3×1.5米，根據這麼多年的種植實踐，近年採用間伐形式改進稱4×2.5米，進一步改善通風透光條件，加上無菌套袋技術的普遍應用，使酥梨品質更上了一個臺階。

碭山酥梨高產的重要因素之一是提高座果率，而座果和授粉有著很大的關係。梨屬異花授粉植物，同品種內授粉座果率很低，必須由其他品種的梨花授粉才能結果。研究表明，碭山酥梨為自花不孕品種，種植中必須配備一定的授粉樹。

授粉品種的選用原則

品種間親和性良好 一些品種間，特別是不同品種間，常見有不親和現象。對於不親和的花粉授粉後，儘管性器官發育正常，但授粉後花粉在柱頭上不萌發，或發芽而花粉管段短或先端膨大破裂而不能正常受精。花期時間 所選授粉品種應和主栽的碭山酥梨花期相同，以確保花粉量的充分。授粉品種所結果實任應具有一定的商品性，確保足夠收入。

透過多年的生產實踐，蒲城地區碭山酥梨配備的授粉品種以黃縣長把梨、河北雪花梨為主，以黃縣長把梨居多。在定植時，以10:1的比例配備授粉樹較為適宜，以每行隔9-10株碭山酥梨栽1株長把梨，在園內均勻分佈定植就好了。

蒲城是國家農業部命名的“中國酥梨之鄉”，是國內外專家公認的"世界優等酥梨最佳生態區"。蒲城酥梨以形美、果大、皮薄、色亮、質脆、含糖量高、鬱香爽口、耐儲存等特點得了消費者的青睞，人們形象的比喻為“大如拳、甜如蜜、脆如菱”，被評為“中華名果”。當前，蒲城在全縣建立了25萬畝綠色果品基地，推廣生態果園技術，按照綠色果品生產標準和操作規程對果品生產實行全程質量控制，特別是無菌害套袋的運用，使果品外觀更美，果面更潔淨，農藥殘留小，大大提高了果品質量，從而使“蒲城酥梨”得以出口國外。

碭山酥梨的植物學特性

碭山酥梨樹勢中等偏強，萌芽力強，成枝力中等。一般定植後3年可以初步開花見果，4-5年進入豐產期。碭山酥梨在引進蒲城初期，大多采用密植技術，株行距3×1.5米，根據這麼多年的種植實踐，近年採用間伐形式改進稱4×2.5米，進一步改善通風透光條件，加上無菌套袋技術的普遍應用，使酥梨品質更上了一個臺階。

碭山酥梨高產的重要因素之一是提高座果率，而座果和授粉有著很大的關係。梨屬異花授粉植物，同品種內授粉座果率很低，必須由其他品種的梨花授粉才能結果。研究表明，碭山酥梨為自花不孕品種，種植中必。

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