根據生物製品的用途可分為預防用生物製品、治療用生物製品和診斷用生物製品三大類。
預防用生物製品 均用於傳染病的預防。
包括疫苗、類毒素和γ -球蛋白三類。
疫苗是由細菌或病毒加工製成的。
過去中國生物製品界和衛生防疫界習慣將細菌製備的稱作菌苗,病毒製備的稱作疫苗,有的國家將二者都稱作疫苗。
類毒素也可稱作疫苗。
疫苗分滅活疫苗和活疫苗。
①滅活疫苗。
製備過程是先從病人分離得到致病的病原細菌或病毒,經過選擇,將細菌放在人工培養基上培養,收穫大量細菌,再用物理或化學法將其滅活(殺),可除掉其致病性而保留其抗原性(免疫原理);病毒只能在活體上培養,如動物、雞胚或細胞培養中複製增殖,從這些培養物中收穫病毒,滅活後製成疫苗。
②活疫苗。
指人工選育的減毒或自然無毒的細菌或病毒,具有免疫原性而不致病,經大量培養收穫病毒或細菌製成。
活疫苗用量小,只需接種一次,便可在體內增殖而達到免疫功效,而滅活疫苗用量大,並且需接種2~3次方能達到免疫功效。
二者各有優缺點。
現在,疫苗可透過基因重組技術來製備,主要用於尚不能用人工培養的細菌或病毒。
外毒素 一些細菌在培養過程中產生的毒性物質稱為外毒素,外毒素經化學法處理後,失去毒力作用,而保留抗原這種類似毒素而無毒力作用的稱為類毒素,如破傷風類毒素。
接種人體可產生相應抗體,保持不患相應疾病。
γ-球蛋白 是血液成分之一,含有各種抗體。
人在一生中不免要患一些疾病,病癒後血液中即存在相應抗體,胎盤血也是一樣。
有些傳染病在沒有特異疫苗時,可用γ-球蛋白作為預防制劑。
現今給獻血人員接種某些疫苗或類毒素,從而產生高效價抗體,用其製備的γ-球蛋白稱特異γ-球蛋白,如破傷風、狂犬病、乙型肝炎特異γ-球蛋白。
有人認為γ-球蛋白是“補品”而當作保健品用,這是不對的。
註冊分類 1.未在國內外上市銷售的疫苗。
2.DNA疫苗。
3.已上市銷售疫苗變更新的佐劑,偶合疫苗變更新的載體。
4.由非純化或全細胞(細菌、病毒等)疫苗改為純化或者組份疫苗。
5.採用未經國內批准的菌毒種生產的疫苗(流感疫苗、鉤端螺旋體疫苗等除外)。
6.已在國外上市銷售但未在國內上市銷售的疫苗。
7.採用國內已上市銷售的疫苗製備的結合疫苗或者聯合疫苗。
8.與已上市銷售疫苗保護性抗原譜不同的重組疫苗。
9.更換其他已批准表達體系或者已批准細胞基質生產的疫苗;採用新工藝製備並且實驗室研究資料證明產品安全性和有效性明顯提高的疫苗。
10.改變滅活劑(方法)或者脫毒劑(方法)的疫苗。
11.改變給藥途徑的疫苗。
12.改變國內已上市銷售疫苗的劑型,但不改變給藥途徑的疫苗。
13.改變免疫劑量或者免疫程式的疫苗。
14.擴大使用人群(增加年齡組)的疫苗。
15.已有國家藥品標準的疫苗。
治療用生物製品 包括各種血液製劑、免疫製劑如干擾素。
按治療作用機理可分為特異的(如抗毒素和γ-球蛋白)和非特異的(如干擾素和人白蛋白等)。
臨床醫生將抗毒素及γ-球蛋白作常規治療用藥品,實際上也起預防作用。
血液製劑在治療用生物製品中佔非常大的比例。
中國生產和正在研製的血液製劑已有50餘種。
有些單克隆抗體已用於治療。
血液中某些含量少的組分整合到微生物基因中,可大量生產,如□因子。
主要的預防和治療用生物製品見表主要的預防和治療用生物製品註冊分類: 1.未在國內外上市銷售的生物製品。
2.單克隆抗體。
3.基因治療、體細胞治療及其製品。
4.變態反應原製品。
5.由人的、動物的組織或者體液提取的,或者透過發酵製備的具有生物活性的多組份製品。
6.由已上市銷售生物製品組成新的複方製品。
7.已在國外上市銷售但尚未在國內上市銷售的生物製品。
8.含未經批准菌種製備的微生態製品。
9.與已上市銷售製品結構不完全相同且國內外均未上市銷售的製品(包括氨基酸位點突變、缺失,因表達系統不同而產生、消除或者改變翻譯後修飾,對產物進行化學修飾等)。
10.與已上市銷售製品製備方法不同的製品(例如採用不同表達體系、宿主細胞等)。
11.首次採用DNA重組技術製備的製品(例如以重組技術替代合成技術、生物組織提取或者發酵技術等)。
12.國內外尚未上市銷售的由非注射途徑改為注射途徑給藥,或者由區域性用藥改為全身給藥的製品。
13.改變已上市銷售製品的劑型但不改變給藥途徑的生物製品。
14.改變給藥途徑的生物製品(不包括上述12項)。
15.已有國家藥品標準的生物製品。
診斷用生物製品 大都用於檢測相應抗原、抗體或機體免疫狀態,屬於免疫學方法診斷。
隨著免疫學技術的發展,診斷用生物製品的種類不斷增多,不僅用於傳染病,也用於其他疾病。
主要包括兩類:①診斷血清,包括細菌類、病毒立克次氏體類、抗毒素類、腫瘤類、激素類、血型及 HLA、免疫球蛋白診斷血清、轉鐵蛋白、紅細胞溶血素、生化製劑等。
②診斷抗原,包括細菌類、病毒立克次氏體類、毒素類、梅毒診斷抗原、鼠疫噬菌體等。
此外還有紅細胞類、熒光抗體、酶聯免疫的酶標記製劑、放射性核標記的放射免疫製劑、妊娠診斷製劑(激素類)、診斷用單克隆抗體。
應用 分預防、治療和診斷三個方面。
預防 疫苗 (包括類毒素)的發明是為了預防傳染病。
大多數烈性傳染病已有疫苗,根據各種傳染病的性質特點、傳染源、傳播方式,用於預防的疫苗有以下幾種: ①消滅傳染病的疫苗。
有些人類傳染病病原體沒有中間寄主,有可能用疫苗高度免疫人群,使病原體不能在人群中傳播並最終被消滅,如天花已被消滅。
麻疹、脊髓灰質炎用疫苗高度免疫後,有可能被徹底消滅。
②保護群體的疫苗。
如中國的乙型腦炎疫苗、乙型肝炎疫苗、流感桿菌多糖疫苗、流腦多糖疫苗、卡介苗等。
例如,以昆蟲為中間寄主的傳染病,往往難以消滅其傳染源,但當群體達到一定免疫水平,即易感人群接種疫苗覆蓋率達到85%以上時,就能控制其流行。
儘管人群中有少數人沒有接種疫苗,但由於群體具備足夠的免疫能力,阻斷了傳染源,這些人也可受到保護。
對傷寒、霍亂、鼠疫、森林腦炎、黃熱病、斑疹傷寒等疾病,在人群中疫苗免疫有針對性,如疫區人群、常發病地區易感部分人群進行普遍接種疫苗。
④保護個體的疫苗。
有些疾病只侵襲某種型別的人,或某些人感染了某種疾病後,具有很大的危險性,如流行性感冒對老年體弱的人,水痘病毒對病房體弱兒童。
這類疫苗有多價滅活流感疫苗、水痘疫苗、肺炎球菌多糖疫苗、鏈球菌疫苗等。
⑤控制先天性疾病的疫苗。
如風疹活疫苗。
風疹病毒對受感者本身沒有多大危害,但若孕婦感染,可侵犯子宮內發育的胎兒,造成新生兒先天性畸形。
⑥有接觸某些傳染病危險的人用疫苗。
如接觸狂犬病後或去疫區應接種這種疫苗。
中國無黃熱病,但去非洲、南美洲的人員必須接種黃熱病疫苗。
疫苗類製劑都含有抗原,接種人體後,刺激體內免疫系統細胞,產生體液免疫或細胞免疫,以防止相應病原體的感染,這種免疫稱作自動免疫。
γ-球蛋白(包括一些抗毒素)是起預防作用的抗體,給人注射後可不感染相應疾病,這種免疫稱作被動免疫。
由於體內的新陳代謝,所注入的抗體半衰期很短,1~2周即消失,但其優點在於生效快。
各種疫苗的使用大多有一定物件,不同疫苗有不同的接種途徑。
接種方法有肌肉、皮下、皮內、皮上劃痕;口服有糖丸、膠囊或液體;氣霧法分氣溶膠法(如腮腺炎活疫苗)、噴鼻法(如流感疫苗)。
一般來說,濃度較大的疫苗宜採用肌肉或深部皮下注射,如果注射皮下淺層,往往區域性出現硬塊或無菌化膿。
皮上劃痕疫苗不可注射。
皮內注射疫苗用量少,但有的可能反應較強,有的免疫永續性差。
口服疫苗方法簡便,較為理想。
常規用的只有脊髓灰質炎活疫苗和口服卡介苗,正在研製的有口服傷寒疫苗、口服痢疾和霍亂疫苗等。
治療 用於治療的生物製品包括各種血液製劑、抗毒素和其他免疫製劑。
按其作用機理可分為特異性免疫治療和非特異性治療。
前者如各種抗毒素和特異的丙種球蛋白;後者如干擾素、轉移因子、白蛋白等。
血液製劑是指健康人或胎盤血液經分離提純後製成的多種有效的血液成分,每種成分都有其獨特生理效能。
對病人來說,除大量失血者外,絕大多數人只需要某一種或幾種成分,如甲型血友病人只缺□因子,補充□因子即可滿足需要,這樣既節省血液,又可提高療效。
血漿可代替全血功能,白蛋白可代替血漿。
γ-球蛋白除用於防治某些傳染病外,還可用於治療γ-球蛋白缺乏症。
干擾素有廣譜抗病毒、抗腫瘤生長、調節機體的免疫反應等多種物質活性,是免疫反應介質之一。
轉移因子是細胞免疫中的重要介質,能啟用細胞免疫反應,凡細胞免疫低下引起的疾病均可採用。
轉移因子還可抗感染(增強細胞免疫功能),可用於治療惡性腫瘤和自身免疫病。
診斷 用於診斷的生物製品可分以下幾類: ①體內試驗診斷製劑類。
常用的有布魯斯氏菌素、結核菌素和錫克試驗毒素(白喉)三種,皮內注射0.1ml,觀察反應,判斷是否患過相應疾病或免疫接種成功否。
②一般傳染病的診斷製劑類。
包括各種診斷菌液、病毒液和診斷血清。
如甲胎蛋白血清、癌胚抗原診斷試劑盒等。
④測定免疫水平的診斷製劑。
測定人體內所含的五種免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgD、IgE),以Ig單價診斷血清與患者血清作定量測定,用於疾病診斷、治療以及機體免疫功能的測定,亦是臨床診斷某些疾病的重要指標。
⑤激素用診斷製劑。
如妊娠診斷製劑。
不良反應 使用生物製品後可能會發生不良反應,這與製品的菌種毒種、型別、抗原濃度、所用培養基、滅活或減毒過程、佐劑、保護劑、受者個體差異、年齡、性別、接種史、傳染病史、被動獲得抗體等因素有關。
接種疫苗和類毒素常見的反應,如細菌內毒素引起的毒性反應,所有細菌製劑都可引起發燒和區域性的腫、痛、熱的炎症反應,一般在接種後48小時內發生。
精製類毒素和病毒類疫苗,一般反應比較輕微。
活疫苗類接種後實際上產生一次輕度感染過程,在活菌或病毒增殖到引起發燒或其他反應之前,常有幾天或長一些的潛伏期,這些感染反應常伴有低熱,有的有皮疹、淋巴結腫大等。
細菌多糖疫苗 細菌多糖疫苗是提取有效抗原成分,去掉內毒素,其反應也較輕微。
馬血清製備的抗毒素引起的主要不良反應是血清病。
現今製品透過精製提純,反應減少,人血液製劑克服了異性蛋白反應。
這些製品的反應,有時伴有發熱、蕁麻疹、哮喘,少數偶爾出現一過性血壓降低,過敏性休克和血管性水腫罕見,干擾素等治療免疫製劑,反應情況類似疫苗類,反應輕微。
根據生物製品的用途可分為預防用生物製品、治療用生物製品和診斷用生物製品三大類。
預防用生物製品 均用於傳染病的預防。
包括疫苗、類毒素和γ -球蛋白三類。
疫苗是由細菌或病毒加工製成的。
過去中國生物製品界和衛生防疫界習慣將細菌製備的稱作菌苗,病毒製備的稱作疫苗,有的國家將二者都稱作疫苗。
類毒素也可稱作疫苗。
疫苗分滅活疫苗和活疫苗。
①滅活疫苗。
製備過程是先從病人分離得到致病的病原細菌或病毒,經過選擇,將細菌放在人工培養基上培養,收穫大量細菌,再用物理或化學法將其滅活(殺),可除掉其致病性而保留其抗原性(免疫原理);病毒只能在活體上培養,如動物、雞胚或細胞培養中複製增殖,從這些培養物中收穫病毒,滅活後製成疫苗。
②活疫苗。
指人工選育的減毒或自然無毒的細菌或病毒,具有免疫原性而不致病,經大量培養收穫病毒或細菌製成。
活疫苗用量小,只需接種一次,便可在體內增殖而達到免疫功效,而滅活疫苗用量大,並且需接種2~3次方能達到免疫功效。
二者各有優缺點。
現在,疫苗可透過基因重組技術來製備,主要用於尚不能用人工培養的細菌或病毒。
外毒素 一些細菌在培養過程中產生的毒性物質稱為外毒素,外毒素經化學法處理後,失去毒力作用,而保留抗原這種類似毒素而無毒力作用的稱為類毒素,如破傷風類毒素。
接種人體可產生相應抗體,保持不患相應疾病。
γ-球蛋白 是血液成分之一,含有各種抗體。
人在一生中不免要患一些疾病,病癒後血液中即存在相應抗體,胎盤血也是一樣。
有些傳染病在沒有特異疫苗時,可用γ-球蛋白作為預防制劑。
現今給獻血人員接種某些疫苗或類毒素,從而產生高效價抗體,用其製備的γ-球蛋白稱特異γ-球蛋白,如破傷風、狂犬病、乙型肝炎特異γ-球蛋白。
有人認為γ-球蛋白是“補品”而當作保健品用,這是不對的。
註冊分類 1.未在國內外上市銷售的疫苗。
2.DNA疫苗。
3.已上市銷售疫苗變更新的佐劑,偶合疫苗變更新的載體。
4.由非純化或全細胞(細菌、病毒等)疫苗改為純化或者組份疫苗。
5.採用未經國內批准的菌毒種生產的疫苗(流感疫苗、鉤端螺旋體疫苗等除外)。
6.已在國外上市銷售但未在國內上市銷售的疫苗。
7.採用國內已上市銷售的疫苗製備的結合疫苗或者聯合疫苗。
8.與已上市銷售疫苗保護性抗原譜不同的重組疫苗。
9.更換其他已批准表達體系或者已批准細胞基質生產的疫苗;採用新工藝製備並且實驗室研究資料證明產品安全性和有效性明顯提高的疫苗。
10.改變滅活劑(方法)或者脫毒劑(方法)的疫苗。
11.改變給藥途徑的疫苗。
12.改變國內已上市銷售疫苗的劑型,但不改變給藥途徑的疫苗。
13.改變免疫劑量或者免疫程式的疫苗。
14.擴大使用人群(增加年齡組)的疫苗。
15.已有國家藥品標準的疫苗。
治療用生物製品 包括各種血液製劑、免疫製劑如干擾素。
按治療作用機理可分為特異的(如抗毒素和γ-球蛋白)和非特異的(如干擾素和人白蛋白等)。
臨床醫生將抗毒素及γ-球蛋白作常規治療用藥品,實際上也起預防作用。
血液製劑在治療用生物製品中佔非常大的比例。
中國生產和正在研製的血液製劑已有50餘種。
有些單克隆抗體已用於治療。
血液中某些含量少的組分整合到微生物基因中,可大量生產,如□因子。
主要的預防和治療用生物製品見表主要的預防和治療用生物製品註冊分類: 1.未在國內外上市銷售的生物製品。
2.單克隆抗體。
3.基因治療、體細胞治療及其製品。
4.變態反應原製品。
5.由人的、動物的組織或者體液提取的,或者透過發酵製備的具有生物活性的多組份製品。
6.由已上市銷售生物製品組成新的複方製品。
7.已在國外上市銷售但尚未在國內上市銷售的生物製品。
8.含未經批准菌種製備的微生態製品。
9.與已上市銷售製品結構不完全相同且國內外均未上市銷售的製品(包括氨基酸位點突變、缺失,因表達系統不同而產生、消除或者改變翻譯後修飾,對產物進行化學修飾等)。
10.與已上市銷售製品製備方法不同的製品(例如採用不同表達體系、宿主細胞等)。
11.首次採用DNA重組技術製備的製品(例如以重組技術替代合成技術、生物組織提取或者發酵技術等)。
12.國內外尚未上市銷售的由非注射途徑改為注射途徑給藥,或者由區域性用藥改為全身給藥的製品。
13.改變已上市銷售製品的劑型但不改變給藥途徑的生物製品。
14.改變給藥途徑的生物製品(不包括上述12項)。
15.已有國家藥品標準的生物製品。
診斷用生物製品 大都用於檢測相應抗原、抗體或機體免疫狀態,屬於免疫學方法診斷。
隨著免疫學技術的發展,診斷用生物製品的種類不斷增多,不僅用於傳染病,也用於其他疾病。
主要包括兩類:①診斷血清,包括細菌類、病毒立克次氏體類、抗毒素類、腫瘤類、激素類、血型及 HLA、免疫球蛋白診斷血清、轉鐵蛋白、紅細胞溶血素、生化製劑等。
②診斷抗原,包括細菌類、病毒立克次氏體類、毒素類、梅毒診斷抗原、鼠疫噬菌體等。
此外還有紅細胞類、熒光抗體、酶聯免疫的酶標記製劑、放射性核標記的放射免疫製劑、妊娠診斷製劑(激素類)、診斷用單克隆抗體。
應用 分預防、治療和診斷三個方面。
預防 疫苗 (包括類毒素)的發明是為了預防傳染病。
大多數烈性傳染病已有疫苗,根據各種傳染病的性質特點、傳染源、傳播方式,用於預防的疫苗有以下幾種: ①消滅傳染病的疫苗。
有些人類傳染病病原體沒有中間寄主,有可能用疫苗高度免疫人群,使病原體不能在人群中傳播並最終被消滅,如天花已被消滅。
麻疹、脊髓灰質炎用疫苗高度免疫後,有可能被徹底消滅。
②保護群體的疫苗。
如中國的乙型腦炎疫苗、乙型肝炎疫苗、流感桿菌多糖疫苗、流腦多糖疫苗、卡介苗等。
例如,以昆蟲為中間寄主的傳染病,往往難以消滅其傳染源,但當群體達到一定免疫水平,即易感人群接種疫苗覆蓋率達到85%以上時,就能控制其流行。
儘管人群中有少數人沒有接種疫苗,但由於群體具備足夠的免疫能力,阻斷了傳染源,這些人也可受到保護。
對傷寒、霍亂、鼠疫、森林腦炎、黃熱病、斑疹傷寒等疾病,在人群中疫苗免疫有針對性,如疫區人群、常發病地區易感部分人群進行普遍接種疫苗。
④保護個體的疫苗。
有些疾病只侵襲某種型別的人,或某些人感染了某種疾病後,具有很大的危險性,如流行性感冒對老年體弱的人,水痘病毒對病房體弱兒童。
這類疫苗有多價滅活流感疫苗、水痘疫苗、肺炎球菌多糖疫苗、鏈球菌疫苗等。
⑤控制先天性疾病的疫苗。
如風疹活疫苗。
風疹病毒對受感者本身沒有多大危害,但若孕婦感染,可侵犯子宮內發育的胎兒,造成新生兒先天性畸形。
⑥有接觸某些傳染病危險的人用疫苗。
如接觸狂犬病後或去疫區應接種這種疫苗。
中國無黃熱病,但去非洲、南美洲的人員必須接種黃熱病疫苗。
疫苗類製劑都含有抗原,接種人體後,刺激體內免疫系統細胞,產生體液免疫或細胞免疫,以防止相應病原體的感染,這種免疫稱作自動免疫。
γ-球蛋白(包括一些抗毒素)是起預防作用的抗體,給人注射後可不感染相應疾病,這種免疫稱作被動免疫。
由於體內的新陳代謝,所注入的抗體半衰期很短,1~2周即消失,但其優點在於生效快。
各種疫苗的使用大多有一定物件,不同疫苗有不同的接種途徑。
接種方法有肌肉、皮下、皮內、皮上劃痕;口服有糖丸、膠囊或液體;氣霧法分氣溶膠法(如腮腺炎活疫苗)、噴鼻法(如流感疫苗)。
一般來說,濃度較大的疫苗宜採用肌肉或深部皮下注射,如果注射皮下淺層,往往區域性出現硬塊或無菌化膿。
皮上劃痕疫苗不可注射。
皮內注射疫苗用量少,但有的可能反應較強,有的免疫永續性差。
口服疫苗方法簡便,較為理想。
常規用的只有脊髓灰質炎活疫苗和口服卡介苗,正在研製的有口服傷寒疫苗、口服痢疾和霍亂疫苗等。
治療 用於治療的生物製品包括各種血液製劑、抗毒素和其他免疫製劑。
按其作用機理可分為特異性免疫治療和非特異性治療。
前者如各種抗毒素和特異的丙種球蛋白;後者如干擾素、轉移因子、白蛋白等。
血液製劑是指健康人或胎盤血液經分離提純後製成的多種有效的血液成分,每種成分都有其獨特生理效能。
對病人來說,除大量失血者外,絕大多數人只需要某一種或幾種成分,如甲型血友病人只缺□因子,補充□因子即可滿足需要,這樣既節省血液,又可提高療效。
血漿可代替全血功能,白蛋白可代替血漿。
γ-球蛋白除用於防治某些傳染病外,還可用於治療γ-球蛋白缺乏症。
干擾素有廣譜抗病毒、抗腫瘤生長、調節機體的免疫反應等多種物質活性,是免疫反應介質之一。
轉移因子是細胞免疫中的重要介質,能啟用細胞免疫反應,凡細胞免疫低下引起的疾病均可採用。
轉移因子還可抗感染(增強細胞免疫功能),可用於治療惡性腫瘤和自身免疫病。
診斷 用於診斷的生物製品可分以下幾類: ①體內試驗診斷製劑類。
常用的有布魯斯氏菌素、結核菌素和錫克試驗毒素(白喉)三種,皮內注射0.1ml,觀察反應,判斷是否患過相應疾病或免疫接種成功否。
②一般傳染病的診斷製劑類。
包括各種診斷菌液、病毒液和診斷血清。
如甲胎蛋白血清、癌胚抗原診斷試劑盒等。
④測定免疫水平的診斷製劑。
測定人體內所含的五種免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM、IgD、IgE),以Ig單價診斷血清與患者血清作定量測定,用於疾病診斷、治療以及機體免疫功能的測定,亦是臨床診斷某些疾病的重要指標。
⑤激素用診斷製劑。
如妊娠診斷製劑。
不良反應 使用生物製品後可能會發生不良反應,這與製品的菌種毒種、型別、抗原濃度、所用培養基、滅活或減毒過程、佐劑、保護劑、受者個體差異、年齡、性別、接種史、傳染病史、被動獲得抗體等因素有關。
接種疫苗和類毒素常見的反應,如細菌內毒素引起的毒性反應,所有細菌製劑都可引起發燒和區域性的腫、痛、熱的炎症反應,一般在接種後48小時內發生。
精製類毒素和病毒類疫苗,一般反應比較輕微。
活疫苗類接種後實際上產生一次輕度感染過程,在活菌或病毒增殖到引起發燒或其他反應之前,常有幾天或長一些的潛伏期,這些感染反應常伴有低熱,有的有皮疹、淋巴結腫大等。
細菌多糖疫苗 細菌多糖疫苗是提取有效抗原成分,去掉內毒素,其反應也較輕微。
馬血清製備的抗毒素引起的主要不良反應是血清病。
現今製品透過精製提純,反應減少,人血液製劑克服了異性蛋白反應。
這些製品的反應,有時伴有發熱、蕁麻疹、哮喘,少數偶爾出現一過性血壓降低,過敏性休克和血管性水腫罕見,干擾素等治療免疫製劑,反應情況類似疫苗類,反應輕微。