（1）培養基常用配方

PDA培養基：馬鈴薯（或玉米粉或麥麩）100克，葡萄糖20克，瓊脂20克，水1000毫升，pH為6.5。

（2）一級種培養基製作

①將馬鈴薯洗淨去皮（已發芽的要挖掉芽眼），稱量取200克切成薄片，置於鋁鍋加水煮沸30分鐘，用4層紗布過濾取汁，補足1000毫升容量；稱取瓊脂20克，用剪刀剪碎後加入馬鈴薯汁液內，微火加熱，不時攪拌直至瓊脂全部溶化，加入葡萄糖，稍煮幾分鐘後，用4層溼紗布過濾，其液汁裝入試管。

②趁熱分裝入管，裝量為試管長度的1/5，塞緊棉塞，立放於試管籠上。分裝時應注意不使培養基粘附在試管口上，以免雜菌感染。

③及時高壓滅菌，滅菌時將試管每10支紮成一捆，棉塞一端用牛皮紙包好，垂直放入高壓鍋內進行蒸汽滅菌，當壓力達0.05兆帕時，微開排氣閥，使壓力降至“0”，重新加熱滅菌，在0.110兆帕的壓力下保持30分鐘，待壓力錶自動降到“0”時，再開啟鍋蓋，取出試管趁熱排斜面。

④試管取出後趁熱將試管口一端墊高，斜靠在桌上的小木棒上，使管內培養液斜面上長度達4/5，試管上面覆蓋毛巾，冷卻後即成斜面固體培養基。

⑤滅菌後置常溫下48小時，未發現有雜菌產生，即可作為一級種斜面培養基用於接種，一級種培養的適宜溫度為22～28℃，大約經10～15天菌絲可長滿斜面。瓊脂斜面培養基配製工藝流程如圖9所示。

圖9 瓊脂培養基配製工藝流程

1.分裝試管 2.管口塞棉 3.包紮成捆 4.高壓滅菌 5.擺成斜面