在進行質量研究的過程中,一項重要的工作就是要對質量標準中所涉及到的分析方法進行方法學驗證,以保證所用的分析方法確實能夠用於在研藥品的質量控制.為規範對各種分析方法的驗證要求,中國已於2005年頒佈了分析方法驗證的指導原則.該指導原則對需要驗證的分析方法及驗證的具體指標做了比較詳細的闡述.但是文中未涉及各具體指標在驗證時的可接受標準,國際上已頒佈的指導原則中也未發現相關的要求.另一方面,大多數藥品研發單位在進行質量研究時,已逐步認識到分析方法驗證的必要性與重要性,大都也在按照指導原則的要求進行分析方法驗證,但驗證完後卻因沒有一個明確的可接受標準,而難以判斷該分析方法是否符合要求.本文結合國外一些大型藥品研發企業在此方面的要求,提出了在對含量測定方法進行驗證時的可接受標準,供國內的藥品研發單位在進行研究時參考.
1．準確度
該指標主要是透過回收率來反映.驗證時一般要求分別配製濃度為80％、100％和120％的供試品溶液各三份,分別測定其含量,將實測值與理論值比較,計算回收率.
可接受的標準為：各濃度下的平均回收率均應在98.0%-102.0%之間,9個回收率資料的相對標準差（RSD）應不大於2.0%.
2．線性
線性一般透過線性迴歸方程的形式來表示.具體的驗證方法為：
在80％至120％的濃度範圍內配製6份濃度不同的供試液,分別測定其主峰的面積,計算相應的含量.以含量為橫座標（X）,峰面積為縱座標（Y）,進行線性迴歸分析.
可接受的標準為：迴歸線的相關係數（R）不得小於0.998,Y軸截距應在100％響應值的2％以內,響應因子的相對標準差應不大於2.0%.
3．精密度
1）重複性
配製6份相同濃度的供試品溶液,由一個分析人員在儘可能相同的條件下進行測試,所得6份供試液含量的相對標準差應不大於2.0%.
2）中間精密度
配製6份相同濃度的供試品溶液,分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試,所得12個含量資料的相對標準差應不大於2.0%.
4．專屬性
可接受的標準為：空白對照應無干擾,主成分與各有關物質應能完全分離,分離度不得小於2.0.以二極體陣列檢測器進行純度分析時,主峰的純度因子應大於980.
5．檢測限
主峰與噪音峰訊號的強度比應不得小於3.
6．定量限
主峰與噪音峰訊號的強度比應不得小於10.另外,配製6份最低定量限濃度的溶液,所測6份溶液主峰的保留時間的相對標準差應不大於2.0%.
7．耐用性
分別考察流動相比例變化±5％、流動相pH值變化±0.2、柱溫變化±5℃、流速相對值變化±20％時,儀器色譜行為的變化,每個條件下各測試兩次.可接受的標準為：主峰的拖尾因子不得大於2.0,主峰與雜質峰必須達到基線分離；各條件下的含量資料（n=6）的相對標準差應不大於2.0%.
8、系統適應性
配製6份相同濃度的供試品溶液進行分析,主峰峰面積的相對標準差應不大於2.0%,主峰保留時間的相對標準差應不大於1.0%.另外,主峰的拖尾因子不得大於2.0,主峰與雜質峰必須達到基線分離,主峰的理論塔板數應符合質量標準的規定.
在進行質量研究的過程中,一項重要的工作就是要對質量標準中所涉及到的分析方法進行方法學驗證,以保證所用的分析方法確實能夠用於在研藥品的質量控制.為規範對各種分析方法的驗證要求,中國已於2005年頒佈了分析方法驗證的指導原則.該指導原則對需要驗證的分析方法及驗證的具體指標做了比較詳細的闡述.但是文中未涉及各具體指標在驗證時的可接受標準,國際上已頒佈的指導原則中也未發現相關的要求.另一方面,大多數藥品研發單位在進行質量研究時,已逐步認識到分析方法驗證的必要性與重要性,大都也在按照指導原則的要求進行分析方法驗證,但驗證完後卻因沒有一個明確的可接受標準,而難以判斷該分析方法是否符合要求.本文結合國外一些大型藥品研發企業在此方面的要求,提出了在對含量測定方法進行驗證時的可接受標準,供國內的藥品研發單位在進行研究時參考.
1．準確度
該指標主要是透過回收率來反映.驗證時一般要求分別配製濃度為80％、100％和120％的供試品溶液各三份,分別測定其含量,將實測值與理論值比較,計算回收率.
可接受的標準為：各濃度下的平均回收率均應在98.0%-102.0%之間,9個回收率資料的相對標準差（RSD）應不大於2.0%.
2．線性
線性一般透過線性迴歸方程的形式來表示.具體的驗證方法為：
在80％至120％的濃度範圍內配製6份濃度不同的供試液,分別測定其主峰的面積,計算相應的含量.以含量為橫座標（X）,峰面積為縱座標（Y）,進行線性迴歸分析.
可接受的標準為：迴歸線的相關係數（R）不得小於0.998,Y軸截距應在100％響應值的2％以內,響應因子的相對標準差應不大於2.0%.
3．精密度
1）重複性
配製6份相同濃度的供試品溶液,由一個分析人員在儘可能相同的條件下進行測試,所得6份供試液含量的相對標準差應不大於2.0%.
2）中間精密度
配製6份相同濃度的供試品溶液,分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試,所得12個含量資料的相對標準差應不大於2.0%.
4．專屬性
可接受的標準為：空白對照應無干擾,主成分與各有關物質應能完全分離,分離度不得小於2.0.以二極體陣列檢測器進行純度分析時,主峰的純度因子應大於980.
5．檢測限
主峰與噪音峰訊號的強度比應不得小於3.
6．定量限
主峰與噪音峰訊號的強度比應不得小於10.另外,配製6份最低定量限濃度的溶液,所測6份溶液主峰的保留時間的相對標準差應不大於2.0%.
7．耐用性
分別考察流動相比例變化±5％、流動相pH值變化±0.2、柱溫變化±5℃、流速相對值變化±20％時,儀器色譜行為的變化,每個條件下各測試兩次.可接受的標準為：主峰的拖尾因子不得大於2.0,主峰與雜質峰必須達到基線分離；各條件下的含量資料（n=6）的相對標準差應不大於2.0%.
8、系統適應性
配製6份相同濃度的供試品溶液進行分析,主峰峰面積的相對標準差應不大於2.0%,主峰保留時間的相對標準差應不大於1.0%.另外,主峰的拖尾因子不得大於2.0,主峰與雜質峰必須達到基線分離,主峰的理論塔板數應符合質量標準的規定.