用標準溶液作工作曲線和樣品分析時，都用同一套比色皿，在同樣工作條件下操作，比色皿的厚薄對分析結果沒有影響。光光度計中不同比色皿厚度之間吸光度的換算可以進行換算,公式為:①A=abc或②A=εbcA為吸光度，b為液層厚度即比色皿厚度，單位用釐米，c為濃度，在①中，c的單位為克每升，在②中c的單位為摩爾每升，a為常數，ε是吸光物質在特定波長下的特徵常數比色皿的正確使用和注意事項在使用比色皿時,兩個透光面要完全平行,並垂直置於比色皿架中,以保證在測量時,入射光垂直於透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。比色皿一般為長方體,其底及兩側為磨毛玻璃,另兩面為光學玻璃製成的透光面粘結而成。所以使用時應注意以下幾點:2.1拿取比色皿時,只能用手指接觸兩側的毛玻璃,避免接觸光學面。2.2不得將光學面與硬物或髒物接觸。盛裝溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然後再用鏡頭紙或絲綢擦拭。2.3凡含有腐蝕玻璃的物質的溶液,不得長期盛放在比色皿中。2.4比色皿在使用後,應立即用水沖洗乾淨。必要時可用1∶1的鹽酸浸泡,然後用水沖洗乾淨。2.5不能將比色皿放在火焰或電爐上進行加熱或乾燥箱內烘烤;2.6在測量時如對比色皿有懷疑,可自行檢測。使用者可將波長選擇置實際使用的波長上,將一套比色皿都注入蒸餾水,將其中一隻的透射比調至95%（數顯儀器調置100%）處,測量其他各只的透射比,凡透射比之差不大於0.5%,即可配套使用。2.7有人用過的經驗：2.7.1使用前將比色皿在2%的硝酸溶液中浸泡24小時，然後用水，蒸餾水依次沖洗乾淨，擦乾。2.7.2比色前將各個比色皿中裝入蒸餾水，在比色波長下進行比較，誤差在±0.001吸光度以內的比色皿選出4-8個進行比色測定，可避免因比色皿差異造成測量誤差2.7.3比色皿中的液體，應沿毛面傾斜，慢慢倒掉，不要將比色皿翻轉，直介面向下放在乾淨的濾紙上吸乾剩餘液，然後用蒸餾水沖洗比色皿內部倒掉（操作同上）避免液體外流，使第2次測量時不用擦拭比色皿，不致因擦拭帶來的誤差。