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  • 1 # 使用者2986026289744

    採用瓊脂固體培養基塗抹培養計數分離法 條件:無菌室、過濾空氣鼓風工作臺、平皿、接種針、固體培養基、液體培養基、密封玻璃試管、高壓鍋、加熱器、培養箱等。 步驟:(在無菌室內操作)

    1.將適量瓊脂固體培養基高壓蒸煮(120℃)20分鐘後,倒入若干個平皿冷卻到45℃以下,製成固體培養基待用。

    2.取待測光合細菌菌液,分別用蒸餾水以10萬倍、50萬倍、100萬倍、500萬倍、5000萬倍、10000萬倍 稀釋。

    3.分別從每個稀釋倍液中取1毫升的樣本各10個,均勻塗布於貼好相應標籤的平皿內固體瓊脂培養基平面上。

    4.將平皿放入培養箱培養12-50個小時,如菌落未長成,再繼續培養,直到有明顯的菌落長成為止。

    5.各種菌的菌落顏色、形狀各不相同,根據光合細菌菌落特徵,找出光合細菌菌落,並計數。取同稀釋倍液10個樣本菌落的平均數,乘以它的稀釋倍數,即可大約得出待測菌液每毫升含光合細菌的活菌數。取各稀釋倍液算出的每毫升含光合細菌活菌的平均數,即可較為準確地檢測出該待測菌液的濃度。實際操作並不如此簡單,因為菌落有雜菌和光合菌交錯在一起的,也有兩個以上光合細菌菌落合在一起的,很難分辨計數。

    6.用接種針將光合細菌菌落挑出,用適量蒸餾水稀釋後,再塗布於固體培養基平面上,進行培養,待光合細菌在培養基上再次長成菌落後,在鼓風工作臺內用接種針挑出,接入盛有經高壓蒸煮滅活過液體培養基的試管內,進行密封厭氧培養,培養好的光合細菌就是純菌種。 純菌種的分離是專業性很強的一門技術,只有專業人員,且經驗豐富的,才能識別各種菌落,從中分離出有用的菌株。

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