1、乳酸菌不產酸,

我於去年下半年分離的乳酸菌，現在卻沒有產酸了，接入牛奶中培養好幾天了但牛奶不凝固,不知道是怎麼回,請哪位高手指點一下。這半年我都是把菌種接在MRS培養基上培養的，並且一個月轉接一次。

半年了都在MRS培養傳代，肯定不行的，容易變異應該在分純之後凍存;轉接太頻繁了，可能出現變異盡力減少傳代，並進行復壯;

進行劃線分純，挑取幾個菌落染色鑑定一下，然後再接種脫脂牛奶，也許可以重新篩選到一個有活力的;

將菌種接種到雙斜面乳酸瓊脂平板上，選取離含乳酸厚度最大的生長乳酸菌復壯～、乳酸菌活化後沒長出怎麼回事

近期將原來已儲存的乳酸菌菌種進行活化，但是平板上沒長出來。後來又重新做了一次還是沒有。這是怎麼回事呢,

可以先用液體培養基富集，如果均懸液混濁後再劃線接種;

乳酸菌的生存條件很寬。因為它是原核生物，結構相對簡單。可以用50ml飽和脫脂奶粉溶液，30ml 50,甘油， 20,對數期細菌原液在 -85度條件下儲存好幾年。我做的實驗中，pH到達3，乳酸菌還可以生長。不過培養乳酸菌不要培養時間過長，不然會出現自溶現象，菌液裡的細菌數反而減少。

細菌生長曲線分潛伏期，對數期/生長期，成熟期，衰退期，一般而言，成熟期的細菌對外界因數的抵抗力最強但乳酸菌容易自溶，成熟期很難控制，一不小心就生產過頭，出現自溶。那樣的話，解凍後的細菌潛伏期會加長，甚至無法生長。所以儲存的時候最好取對數期的細菌，活力大一點;

3、第一次做乳酸菌檢測,請高人指點菌落特徵