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  • 1 # 使用者4010787134523

    我是搞生物研究,從專業角度回答你的問題,綜合各方因素,經濟,簡便操作,易於獲取等方面,考慮到實驗無需過於精確,故此處採用第一種方法,以下是其詳細說明:提取: (1) 取菠菜或其他植物新鮮葉片4-5片(2g左右),洗淨,擦乾,去掉中脈剪碎,放入研。(2) 研缽中加入少量石英砂及碳酸鈣粉,加2-3ml 95%乙醇,研磨至糊狀,再加10-15ml 95%乙醇,離心35min,提取上清液過濾於三角瓶中,殘渣用10ml 95%乙醇沖洗,一同過濾於三角瓶中。(3) 如無新鮮葉片,也可用事先制好的葉乾粉提取。取新鮮葉片(以菠菜葉最好),先用105℃殺青,再在80℃下烘乾,研成粉末,密閉儲存。用時稱葉粉2g放入小燒杯中,加95%乙醇20-30ml 浸提,並隨時攪動。待乙醇呈深綠色時,濾出浸提液備用。分離: (1) 取圓形定性濾紙一張(直徑11cm),將其剪成濾紙條(9cm×3cm),用滴管吸取乙醇葉綠體色素提取液,沿紙條的長度方向塗在紙條的一邊(距邊約1cm),使色素擴散的寬度限制在0.5cm以內,風乾後,再重複運算元次。(2) 在層析缸中加入適量的推動劑,將濾紙條帶有色素的一端插入層析缸中,使濾紙條下端浸入推動劑中。迅速蓋好層析缸蓋。此時,推動劑借毛細管引力順濾紙條向上擴散,並把葉綠體色素向上推動,不久即可看到各種色素的條帶。(3) 當推動劑前沿接近濾紙邊緣時,取出濾紙,風乾,即可看到分離的各種色素:葉綠素a為藍綠色,葉綠素b為黃綠色,葉黃素為鮮黃色,胡蘿蔔素為橙黃色。用鉛筆標出各種色素的位置和名稱。

    各種色素在層析液中的溶解度不同,溶解度高的隨層析液在濾紙上擴散的快,反之則慢。最快:胡蘿蔔素次之:葉黃素次之:葉綠素A 最慢:葉綠素B 最寬的是葉綠素A 最窄的是胡蘿蔔素胡蘿蔔素和葉綠素B最遠葉綠素A和葉綠素B最近另外,綠葉中的色素中葉綠素含量約佔3/4 類胡蘿蔔素含量約佔1/4 光照中,紅光有利於澱粉合成,藍紫光有利於蛋白質的合成以下是實驗改進方面要求:1 實驗材料的改進:應根據不同地區不用氣候選用不同葉片,但切記一點不用含蠟質葉片2:提取液的改進:丙酮易揮發且有毒,可選用無水乙醇替代3:層析液改進:一般教材給出兩種配方:93號汽油或者20份石油醚+2份丙酮+1份苯,經研究發現以下四種方法較好:

    1:CCI4+少許NASO4

    2: 95%酒精

    3:9份95%酒精+1份苯

    4: 20份汽油+2份丙酮+2份石油醚+1份苯

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