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  • 1 # pllhd43874

    pMD®19-T Vector是一種高效克隆PCR產物(TA Cloning)的專用載體。本載體由pUC19載體改建而成,在pUC19載體的多克隆位點處的Xba I和Sal I識別位點之間插入了EcoR V識別位點,用EcoR V進行酶切反應後,再在兩側的3’端新增“T”而成。因大部分耐熱性DNA聚合酶進行PCR反應時都有在PCR 產物的3’末端新增一個“A”的特性,所以使用本製品可以大大提高PCR產物的連線、克隆效率。由於本載體以pUC19載體為基礎構建而成,所以它具有同pUC19載體相同的功能。此外,本製品中的高效連線液Solution I可以在短時間內(約30分鐘)完成連線反應,其連線液可以直接用於細菌轉化,大大方便了實驗操作。本製品中的Control Insert(500 bp)還可以用於Control反應。本載體與pMD®18-T Vector 相比,本製品的 β-半乳糖苷酶的表達活性更高,菌落顯示藍色的時間縮短,菌落顯示的藍色更深。因此,克隆後更容易進行克隆體的藍白篩選。 簡而言之,就是一種可以將taq酶(注意:pfu不具備在產物兩端加“A”鹼基的能力)擴增的兩端帶有A鹼基的產物連入這種載體,從而透過大腸桿菌擴增的載體,而且可以透過藍白篩選來篩選陽性克隆,插入成功的為白,不成功為藍。圖譜可以去takara上下說明書。

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