1．將0.8%的瓊脂糖在0.25×TBE中熔化後冷卻至50～60℃，立即注入凝膠框架中，並插入梳子。
2．凝膠固化後小心地拔出齒梳，用2把無菌手術刀將DNA凝膠塊上樣。若用不同內切酶消化凝膠塊，則取不同樣品時應將手術刀片燒灼後冷卻。將DNA大小標誌物上樣至凝膠的兩旁。
3．用1%液態低熔點瓊脂糖凝膠（0.25×TBE配製）密封狹槽。
4．若有氣泡存在，用注射器驅趕氣泡。
5．一旦密封的低熔點瓊脂糖已固化（大約10min），可將凝膠擱入腔室，並用電泳緩衝液覆蓋過膠面。
6．應設定合適的電壓及轉換時間（參考《分子醫學技術》84頁表8.1）並開始電泳。兩個不同電泳方向的電流應相等。
7．電泳結束後，凝膠用0.25×TBE配製成的EB（0.4μg/ml）染色。
8．用泵自槽中排除緩衝液，續以雙蒸水沖洗電泳槽。
9．凝膠成像：DNA在曝光的過程中可能會形成缺口。
10． 用0.25mol/L HCl漂洗凝膠30min，讓DNA脫嘌呤，並有利於轉移。
11． 凝膠用鹼（變性溶液中）變性20min，兩次，續以中性溶液1～5min。
12． 採用標準Southern印跡方案將DNA轉印至尼龍膜上。一般來說，印跡PFGE凝膠的時間較普通凝膠印跡時間長（約48h）。
https://iknow-pic.cdn.bcebos.com/2f738bd4b31c8701070fe133207f9e2f0608ffae
1．將0.8%的瓊脂糖在0.25×TBE中熔化後冷卻至50～60℃，立即注入凝膠框架中，並插入梳子。
2．凝膠固化後小心地拔出齒梳，用2把無菌手術刀將DNA凝膠塊上樣。若用不同內切酶消化凝膠塊，則取不同樣品時應將手術刀片燒灼後冷卻。將DNA大小標誌物上樣至凝膠的兩旁。
3．用1%液態低熔點瓊脂糖凝膠（0.25×TBE配製）密封狹槽。
4．若有氣泡存在，用注射器驅趕氣泡。
5．一旦密封的低熔點瓊脂糖已固化（大約10min），可將凝膠擱入腔室，並用電泳緩衝液覆蓋過膠面。
6．應設定合適的電壓及轉換時間（參考《分子醫學技術》84頁表8.1）並開始電泳。兩個不同電泳方向的電流應相等。
7．電泳結束後，凝膠用0.25×TBE配製成的EB（0.4μg/ml）染色。
8．用泵自槽中排除緩衝液，續以雙蒸水沖洗電泳槽。
9．凝膠成像：DNA在曝光的過程中可能會形成缺口。
10． 用0.25mol/L HCl漂洗凝膠30min，讓DNA脫嘌呤，並有利於轉移。
11． 凝膠用鹼（變性溶液中）變性20min，兩次，續以中性溶液1～5min。
12． 採用標準Southern印跡方案將DNA轉印至尼龍膜上。一般來說，印跡PFGE凝膠的時間較普通凝膠印跡時間長（約48h）。
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