正常細胞培養時,不論細胞的種類和供體的年齡如何,在細胞全生存過程中,大致都經歷以下三個階段:
1.原代培養(Primary Culture)期:
也稱初代培養,即從體內取出組織接種培養到第一次傳代階段,一般持續1一4周。此期細胞呈活躍的移動,可見細胞分裂,但不旺盛。初代培養細胞與體內原組織在形態結構和功能活動上相似性大。細胞群是異質的(Heterogeneous),也即各細胞的遺傳性狀互不相同,細胞相互依存性強。如把這種細胞群稀釋分散成單細胞,在軟瓊脂培養基中進行培養時,細胞克隆形成率(Cloning Efficiency)很低,即細胞獨立生存性差。克隆形成率即細胞群被稀釋分散成單個細胞進行培養時,形成細胞小群(克隆)的百分數。初代培養細胞多呈二倍體核型;由於原代培養細胞和體內細胞性狀相似性大,是檢測藥物很好的實驗物件。
2.傳代期:
初代培養細胞一經傳代後便改稱做細胞系(Cell Line)。在全生命期中此期的持續時間最長。在培養條件較好情況下,細胞增殖旺盛,並能維持二倍體核型,呈二倍體核型的細胞稱二倍體細胞系(Diploid Cell Line)。為保持二倍體細胞性質,細胞應在初代培養期或傳代後早期凍存。當前世界上常用細胞均在不出十代內凍存。如不凍存,則需反覆傳代以維持細胞的適宜密度,以利於生存。但這樣就有可能導致細胞失掉二倍體性質或發生轉化。一般情況下當傳代10~50次左右,細胞增殖逐漸緩慢,以至完全停止,細胞進入第三期。
3.衰退期:
此期細胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖;細胞形態輪廓增強,最後衰退凋亡。在細胞生命期階段,少數情況下,在以上三期任何一點(多發生在傳代末或衰退期),由於某種因素的影響,細胞可能發生自發轉化(Spontaneous Transformation)。轉化的標誌之一是細胞可能獲得永生性(Immortality)或惡性性(Malignancy)。細胞永生性也稱不死性,即細胞獲永續性增殖能力,這樣的細胞群體稱無限細胞系(Infinite Cell Line),也稱連續細胞系(Continuous Cell Line)。在早期文獻中無限細胞系也稱已建立細胞系(Established Cell Line),現已不用。無限細胞系的形成主要發生在第二期末,或第三期初階段。細胞獲不死性後,核型大多變成異倍體(Heteroploid)。細胞轉化亦可用人工方法誘發,轉化後的細胞也可能具有惡性性質。細胞永生性和惡性性非同一性狀。
正常細胞培養時,不論細胞的種類和供體的年齡如何,在細胞全生存過程中,大致都經歷以下三個階段:
1.原代培養(Primary Culture)期:
也稱初代培養,即從體內取出組織接種培養到第一次傳代階段,一般持續1一4周。此期細胞呈活躍的移動,可見細胞分裂,但不旺盛。初代培養細胞與體內原組織在形態結構和功能活動上相似性大。細胞群是異質的(Heterogeneous),也即各細胞的遺傳性狀互不相同,細胞相互依存性強。如把這種細胞群稀釋分散成單細胞,在軟瓊脂培養基中進行培養時,細胞克隆形成率(Cloning Efficiency)很低,即細胞獨立生存性差。克隆形成率即細胞群被稀釋分散成單個細胞進行培養時,形成細胞小群(克隆)的百分數。初代培養細胞多呈二倍體核型;由於原代培養細胞和體內細胞性狀相似性大,是檢測藥物很好的實驗物件。
2.傳代期:
初代培養細胞一經傳代後便改稱做細胞系(Cell Line)。在全生命期中此期的持續時間最長。在培養條件較好情況下,細胞增殖旺盛,並能維持二倍體核型,呈二倍體核型的細胞稱二倍體細胞系(Diploid Cell Line)。為保持二倍體細胞性質,細胞應在初代培養期或傳代後早期凍存。當前世界上常用細胞均在不出十代內凍存。如不凍存,則需反覆傳代以維持細胞的適宜密度,以利於生存。但這樣就有可能導致細胞失掉二倍體性質或發生轉化。一般情況下當傳代10~50次左右,細胞增殖逐漸緩慢,以至完全停止,細胞進入第三期。
3.衰退期:
此期細胞仍然生存,但增殖很慢或不增殖;細胞形態輪廓增強,最後衰退凋亡。在細胞生命期階段,少數情況下,在以上三期任何一點(多發生在傳代末或衰退期),由於某種因素的影響,細胞可能發生自發轉化(Spontaneous Transformation)。轉化的標誌之一是細胞可能獲得永生性(Immortality)或惡性性(Malignancy)。細胞永生性也稱不死性,即細胞獲永續性增殖能力,這樣的細胞群體稱無限細胞系(Infinite Cell Line),也稱連續細胞系(Continuous Cell Line)。在早期文獻中無限細胞系也稱已建立細胞系(Established Cell Line),現已不用。無限細胞系的形成主要發生在第二期末,或第三期初階段。細胞獲不死性後,核型大多變成異倍體(Heteroploid)。細胞轉化亦可用人工方法誘發,轉化後的細胞也可能具有惡性性質。細胞永生性和惡性性非同一性狀。