蟹妖，哈哈哈哈哈這個放著我來！先寫個基本流程後面再填坑。1土樣破碎，2無菌水衝懸，3低速離心取上清，4梯度稀釋，5平板塗布，6挑單菌落液體培養，並在平板上畫線培養（菌落較單一的話可以省略），7在畫方格的纖維素平板上挑單菌落培養，8（1）挑水解圈的菌落液體培養，8（2）利用濾紙條鑑定水解能力，8（3）做生長曲線，8（4）最佳化培養條件。要做鑑定的話就是看菌落形態，理化性質，16s測序做進化樹……----------------------------------慢慢填坑的線-------------------------------1，圖樣，啊不對，土樣破碎。。。不解釋了，最好找造紙廠、木材廠周圍的樣品。2，不解釋。。3，也不解釋了吧。。。轉速別太快，這樣混合的細菌就留在上清液裡面。4，梯度稀釋：一般說要從到按梯度稀釋菌液，每個梯度三個重複~哈哈哈兩桶板子就沒了~以平板上長出這個數量級的菌落最好。5，塗布就不說了，儘量塗勻6，一定一定挑單菌落，每個挑出來的菌落都丟進5ml液體裡面搖啊搖，通常步驟7之前用LB培養基就可以了。後面的劃線是為了保證液體搖出來的都是單一的菌種，而不會夾有雜菌。如果有，則從劃線之後重複步驟6。7，所謂畫了方格的平板就是這樣的這是我篩菌的一個板子，正好是纖維素酶的，發紅是加了剛果紅在裡面，然而沒什麼卵用，師兄留下的菌種都掛了~。CMC培養基配方：羧甲基纖維素鈉
(CMC-Na)培養基（g/L）：
CMC-Na 20 ；Na2HPO4 2.5 ；KH2PO4 1.5；蛋白腖2.5；瓊脂20 ；pH 7.0—7.5；剛果紅0.2g；定容至1000ml，高壓滅菌，倒平板。
8（1）：水解圈如下圖（我自己纖維素酶沒做出來，這是網上找
的其他酶的，侵刪。）
有水解圈就說明這個菌株可以以纖維素為單一碳源生存，挑出來，搖起~這個時候可以量一下水解圈的直徑，初步定性分析下水解能力。
（我先把手頭工作弄一下，來不及就明晚再更了。。。被老闆罵了一天了QAQ）
蟹妖，哈哈哈哈哈這個放著我來！先寫個基本流程後面再填坑。1土樣破碎，2無菌水衝懸，3低速離心取上清，4梯度稀釋，5平板塗布，6挑單菌落液體培養，並在平板上畫線培養（菌落較單一的話可以省略），7在畫方格的纖維素平板上挑單菌落培養，8（1）挑水解圈的菌落液體培養，8（2）利用濾紙條鑑定水解能力，8（3）做生長曲線，8（4）最佳化培養條件。要做鑑定的話就是看菌落形態，理化性質，16s測序做進化樹……----------------------------------慢慢填坑的線-------------------------------1，圖樣，啊不對，土樣破碎。。。不解釋了，最好找造紙廠、木材廠周圍的樣品。2，不解釋。。3，也不解釋了吧。。。轉速別太快，這樣混合的細菌就留在上清液裡面。4，梯度稀釋：一般說要從到按梯度稀釋菌液，每個梯度三個重複~哈哈哈兩桶板子就沒了~以平板上長出這個數量級的菌落最好。5，塗布就不說了，儘量塗勻6，一定一定挑單菌落，每個挑出來的菌落都丟進5ml液體裡面搖啊搖，通常步驟7之前用LB培養基就可以了。後面的劃線是為了保證液體搖出來的都是單一的菌種，而不會夾有雜菌。如果有，則從劃線之後重複步驟6。7，所謂畫了方格的平板就是這樣的這是我篩菌的一個板子，正好是纖維素酶的，發紅是加了剛果紅在裡面，然而沒什麼卵用，師兄留下的菌種都掛了~。CMC培養基配方：羧甲基纖維素鈉
(CMC-Na)培養基（g/L）：
CMC-Na 20 ；Na2HPO4 2.5 ；KH2PO4 1.5；蛋白腖2.5；瓊脂20 ；pH 7.0—7.5；剛果紅0.2g；定容至1000ml，高壓滅菌，倒平板。
8（1）：水解圈如下圖（我自己纖維素酶沒做出來，這是網上找
的其他酶的，侵刪。）
有水解圈就說明這個菌株可以以纖維素為單一碳源生存，挑出來，搖起~這個時候可以量一下水解圈的直徑，初步定性分析下水解能力。
（我先把手頭工作弄一下，來不及就明晚再更了。。。被老闆罵了一天了QAQ）