儀器分析——熒光分析法
某些物質受紫外光或可見光照射激發後能發射出比激發光波長較長的熒光。物質的激發光譜和熒光發射光譜，可以用作該物質的定性分析。當激發光強度、波長、所用溶劑及溫度等條件固定時，物質在一定濃度範圍內，其發射光強度與溶液中該物質的濃度成正比關係，可以用作定量分析。熒光分析法的靈敏度一般較紫外分光光度法或比色法為高，但濃度太大的溶液會有“自熄滅”作用，以及由於在液麵附近溶液會吸收激發光，使發射光強度下降，導致發射光強度與濃度不成正比，故熒光分析法應在低濃度溶液中進行。
由於不易測定絕對熒光強度，故熒光分析法都是在一定條件下，用對照品溶液測定熒光強度與濃度的線性範圍後，再在每次測定前，用一定濃度的對照品溶液校正儀器的靈敏度；然後在相同的條件下，分別讀取對照品溶液及其試劑空白的熒光讀數與供試品溶液及其試劑空白的熒光讀數，用下式計算供試品濃度：
式中CX為供試品溶液的濃度；
Cr為對照品溶液的濃度；
RX為供試品溶液的熒光讀數；
RXb為供試品溶液試劑空白的熒光讀數；
Rr為對照品溶液的熒光讀數；
Rrb為對照品溶液試劑空白的熒光讀數。
因熒光分析法中的濃度與讀數的線性較窄，故（RX－RXb）/（Rr－Rrb）應為0.50～2.0；如有超過，應在調節溶液濃度後再測。偏離線性時應改用工作曲線法。
對易被光分解或馳豫時間較長的品種，為使儀器靈敏度定標準確，避免因激發光多次照射而影響熒光強度，可選擇一種激發光和發射光波長與之近似而對光穩定的物質配成適當濃度的溶液，作為基準溶液，例如藍色熒光可用硫酸奎寧的稀硫酸溶液，黃綠色熒光可用熒光素鈉水溶液，紅色熒光可用羅丹明B水溶液等。在測定供試品溶液時用基準溶液代替對照品溶液校正儀器的靈敏度。
熒光分析法因靈敏度高，故干擾因素也多。溶劑不純會帶入較大誤差，應先作空白檢查，必要時，應用玻璃磨口蒸餾器蒸餾後再用。溶液中的懸浮物對光有散射作用，必要時，應用垂熔玻璃濾器濾過或用離心法除去。所用的玻璃儀器與測定池等也必須保持高度潔淨。溫度對熒光強度有較大的影響，測定時應控制溫度一致。溶液中的溶氧有降低熒光作用，必要時可在測定前通入惰性氣體除氧。測定時需注意溶液的pH值和試劑的純度等對熒光強度的影響。
儀器分析——熒光分析法
某些物質受紫外光或可見光照射激發後能發射出比激發光波長較長的熒光。物質的激發光譜和熒光發射光譜，可以用作該物質的定性分析。當激發光強度、波長、所用溶劑及溫度等條件固定時，物質在一定濃度範圍內，其發射光強度與溶液中該物質的濃度成正比關係，可以用作定量分析。熒光分析法的靈敏度一般較紫外分光光度法或比色法為高，但濃度太大的溶液會有“自熄滅”作用，以及由於在液麵附近溶液會吸收激發光，使發射光強度下降，導致發射光強度與濃度不成正比，故熒光分析法應在低濃度溶液中進行。
由於不易測定絕對熒光強度，故熒光分析法都是在一定條件下，用對照品溶液測定熒光強度與濃度的線性範圍後，再在每次測定前，用一定濃度的對照品溶液校正儀器的靈敏度；然後在相同的條件下，分別讀取對照品溶液及其試劑空白的熒光讀數與供試品溶液及其試劑空白的熒光讀數，用下式計算供試品濃度：
式中CX為供試品溶液的濃度；
Cr為對照品溶液的濃度；
RX為供試品溶液的熒光讀數；
RXb為供試品溶液試劑空白的熒光讀數；
Rr為對照品溶液的熒光讀數；
Rrb為對照品溶液試劑空白的熒光讀數。
因熒光分析法中的濃度與讀數的線性較窄，故（RX－RXb）/（Rr－Rrb）應為0.50～2.0；如有超過，應在調節溶液濃度後再測。偏離線性時應改用工作曲線法。
對易被光分解或馳豫時間較長的品種，為使儀器靈敏度定標準確，避免因激發光多次照射而影響熒光強度，可選擇一種激發光和發射光波長與之近似而對光穩定的物質配成適當濃度的溶液，作為基準溶液，例如藍色熒光可用硫酸奎寧的稀硫酸溶液，黃綠色熒光可用熒光素鈉水溶液，紅色熒光可用羅丹明B水溶液等。在測定供試品溶液時用基準溶液代替對照品溶液校正儀器的靈敏度。
熒光分析法因靈敏度高，故干擾因素也多。溶劑不純會帶入較大誤差，應先作空白檢查，必要時，應用玻璃磨口蒸餾器蒸餾後再用。溶液中的懸浮物對光有散射作用，必要時，應用垂熔玻璃濾器濾過或用離心法除去。所用的玻璃儀器與測定池等也必須保持高度潔淨。溫度對熒光強度有較大的影響，測定時應控制溫度一致。溶液中的溶氧有降低熒光作用，必要時可在測定前通入惰性氣體除氧。測定時需注意溶液的pH值和試劑的純度等對熒光強度的影響。