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  • 1 # 使用者3035107224521

    色譜柱法屬於柱色譜,高中生物實驗中使用的是紙上層析法,也就是紙色譜法,柱色譜和紙色譜二者的基本原理是類似的。但是二氧化矽和碳酸鈣的作用卻不相同,高中生物實驗使用的紙上層析法,二氧化矽和碳酸鈣僅在研磨綠色葉片時使用,隨後在研磨液的過濾中,二者已經被過濾掉了,與色譜柱法使用碳酸鈣和二氧化矽(實際上是矽膠)填充柱子作為吸附劑是兩回事情。

    高中生物實驗中,研磨綠色葉片時加入的少量二氧化矽,實際上用洗乾淨的細河沙或者細石英砂代替都是可以的,起到一個使得研磨均勻的目的。但充分研磨時植物細胞破裂,含有有機酸的細胞液流出,有可能破壞葉綠素,因為從本質上講,葉綠素是有機鹼與鎂離子的絡合物,有機酸有破壞這種絡合物的可能,因此加入少量碳酸鈣,可以與有機酸反應除去有機酸,就可以保護葉綠素不被破壞。

    葉綠素紙上層析實驗甚至可以在家裡做(雖然效果差一些,時間長一些),將10g左右菠菜葉片儘量切碎,加入少量洗乾淨的細河沙和小蘇打(碳酸氫鈉),再加入10ml 95%醫用酒精(乙醇),充分研磨成勻漿狀,用塞有少量脫脂棉的小漏斗過濾得到溶液後,直接倒入乾燥大容器底部(較細的玻璃罐頭瓶即可),將大的普通定性濾紙剪成寬1.5cm—2cm的濾紙條,下端剪去兩個角(如同高中生物實驗中的做法),插入大容器中(最好在濾紙條上端打孔,用線吊入),濾紙條下端浸入葉綠素溶液,容器加蓋,在沒有光直射的位置靜置,很快即可看到綠色逐漸沿濾紙條上移,過一小會可看到綠色上方出現黃色(胡蘿蔔素和葉黃素),待黃色上升到濾紙條一半左右時,取出濾紙條,換一個盛有少量95%酒精的乾燥大容器,將濾紙條下端重新浸入95%酒精,容器加蓋靜置,一段較長時間後即可得到幾條色素色帶,做成功的關鍵是濾紙條要儘量長一些。

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