LAMP 原理:
環介導等溫擴增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),是一種新型的核酸擴增方法,其特點是針對靶基因的6個區域設計4種特異引物,在鏈置換DNA聚合酶(Bst DNA polymerasc)的作用下,60--65℃恆溫擴增,15-60rain左右即可核酸擴增,效率可達109~10m個數量級,具有操作簡單、特異性強、產物易檢測等特點。在DNA合成時, 從脫氧核酸三磷酸基質(dNTPs) 中析出的焦磷酸根離子與反應溶液中的鎂離子反應,產生大量焦磷酸鎂沉澱,呈現白色。因此,可以把渾濁度作為反應的指標,只用肉眼觀察白色渾濁沉澱,就能鑑定擴增與否,而不需要繁瑣的電泳和紫外觀察。由於LAMP反應不需要PCR儀和昂貴的試劑,有著廣泛的應用前景。
LAMP法的應用領域:
靈活運用能夠簡單、快速地進行基因擴增的特徵,在各個領域得到廣泛應用
食品領域:食物中毒致病菌的檢測,食品的衛生管理,食物中毒的防止;
臨床領域:病原菌、病毒的檢測及鑑定,透過SNP多型性分型決定用藥量;
農業領域:植物病害的早期發現及蔓延防止,轉基因作物的檢測;
環境領域:環境、水中病原微生物的檢測;
工業領域:工業產品用大量DNA的生產成為可能;
畜牧業領域:雌雄性別判斷,病原微生物的檢測,遺傳病的發現.
LAMP 原理:
環介導等溫擴增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),是一種新型的核酸擴增方法,其特點是針對靶基因的6個區域設計4種特異引物,在鏈置換DNA聚合酶(Bst DNA polymerasc)的作用下,60--65℃恆溫擴增,15-60rain左右即可核酸擴增,效率可達109~10m個數量級,具有操作簡單、特異性強、產物易檢測等特點。在DNA合成時, 從脫氧核酸三磷酸基質(dNTPs) 中析出的焦磷酸根離子與反應溶液中的鎂離子反應,產生大量焦磷酸鎂沉澱,呈現白色。因此,可以把渾濁度作為反應的指標,只用肉眼觀察白色渾濁沉澱,就能鑑定擴增與否,而不需要繁瑣的電泳和紫外觀察。由於LAMP反應不需要PCR儀和昂貴的試劑,有著廣泛的應用前景。
LAMP法的應用領域:
靈活運用能夠簡單、快速地進行基因擴增的特徵,在各個領域得到廣泛應用
食品領域:食物中毒致病菌的檢測,食品的衛生管理,食物中毒的防止;
臨床領域:病原菌、病毒的檢測及鑑定,透過SNP多型性分型決定用藥量;
農業領域:植物病害的早期發現及蔓延防止,轉基因作物的檢測;
環境領域:環境、水中病原微生物的檢測;
工業領域:工業產品用大量DNA的生產成為可能;
畜牧業領域:雌雄性別判斷,病原微生物的檢測,遺傳病的發現.