tris-hcl緩衝液的配製方法:
tris:三羥甲基氨基甲烷
三羥甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱為tris)是一種有機化合物,其分子式為(hoch2)3cnh2。tris被廣泛應用於生物化學和分子生物學實驗中的緩衝液的製備。例如,在生物化學實驗中常用的tae和tbe緩衝液(用於核酸的溶解)都需要用到tris。由於它含有氨基因此可以與醛發生縮合反應
tris為弱鹼,在室溫(25℃下,它的pka為8.1;根據緩衝理論,tris緩衝液的有效緩衝範圍在ph7.0到9.2之間。
tris鹼的水溶液ph在10.5左右,一般加入鹽酸以調節ph值至所需值,即可獲得該ph值的緩衝液。但同時應注意溫度對於tris的pka的影響。
由於tris緩衝液為弱鹼性溶液,dna在這樣的溶液中會被去質子化,從而提高其溶解性。人們常常在tris鹽酸緩衝液中加入edta製成“te緩衝液”,te緩衝液被用於dna的穩定和儲存。如果將調節ph值的酸溶液換成乙酸,則獲得“tae緩衝液”(tris/acetate/edta),而換成硼酸則獲得“tbe緩衝液”(tris/borate/edta)。這兩種緩衝液通常用於核酸電泳實驗中。用途:有機合成中間體。在電泳緩衝液中同甘氨酸構成緩衝體系,穩定電泳過程中的ph值。在凝膠中也起到穩定ph的作用,只不過是tris-hcl緩衝體系。
tris緩衝液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑,還有許多重要用途。tris被用於不同ph條件下的蛋白質晶體生長。tris緩衝液的低離子強度特點可用於線蟲(c.elegans核纖層蛋白lamin)的中間纖維的形成。tris也是蛋白質電泳緩衝液的主要成分之一。此外,tris還是製備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。tris也被用作滴定標準物。
1mtris-hcl(ph7.4,7.6,8.0)
組份濃度1mtris-hcl配製量1l配製方法:
1.稱量121.1gtris置於ll燒杯中。
2.加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。3.按下表加入濃hcl量調節所需要的ph值。
ph值濃hcl7.4約70ml7.6約60ml8.0約42ml
4.將溶液定容至1l。
5.高溫高壓滅菌後,室溫儲存。注意:應使溶液冷卻至室溫後再調定ph值,因為tris溶液的ph值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的ph值大約降低0.03個單位。
1.5mtris-hcl(ph8.8)
組份濃度1.5mtris-hcl配製量1l配製方法
1.稱量181.7gtris置於1l燒杯中。
2.加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。3.用濃hcl調節ph值至8.8。4.將溶液定容至1l。
te即tris-edtabuffer(10mmtris,1mmedta,ph7.4ph7.6ph8.0)。
常用分子生物學試劑,用於dna的溶解等。配製10×tebuffer(ph7.4,7.6,8.0)
組份濃度:100mmtris-hcl,10mmedta配製量:1l配製方法:
1.量取下列溶液,置於ll燒杯中。
1mtris-hclbuffer(ph7.4,7.6,8.0)100ml500mmedta(ph8.0)20ml
2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,均勻混合。3.將溶液定容至1l後,高溫高壓滅菌。4.室溫儲存。
tris-hcl緩衝液的配製方法:
tris:三羥甲基氨基甲烷
三羥甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)aminomethane,一般簡稱為tris)是一種有機化合物,其分子式為(hoch2)3cnh2。tris被廣泛應用於生物化學和分子生物學實驗中的緩衝液的製備。例如,在生物化學實驗中常用的tae和tbe緩衝液(用於核酸的溶解)都需要用到tris。由於它含有氨基因此可以與醛發生縮合反應
tris為弱鹼,在室溫(25℃下,它的pka為8.1;根據緩衝理論,tris緩衝液的有效緩衝範圍在ph7.0到9.2之間。
tris鹼的水溶液ph在10.5左右,一般加入鹽酸以調節ph值至所需值,即可獲得該ph值的緩衝液。但同時應注意溫度對於tris的pka的影響。
由於tris緩衝液為弱鹼性溶液,dna在這樣的溶液中會被去質子化,從而提高其溶解性。人們常常在tris鹽酸緩衝液中加入edta製成“te緩衝液”,te緩衝液被用於dna的穩定和儲存。如果將調節ph值的酸溶液換成乙酸,則獲得“tae緩衝液”(tris/acetate/edta),而換成硼酸則獲得“tbe緩衝液”(tris/borate/edta)。這兩種緩衝液通常用於核酸電泳實驗中。用途:有機合成中間體。在電泳緩衝液中同甘氨酸構成緩衝體系,穩定電泳過程中的ph值。在凝膠中也起到穩定ph的作用,只不過是tris-hcl緩衝體系。
tris緩衝液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑,還有許多重要用途。tris被用於不同ph條件下的蛋白質晶體生長。tris緩衝液的低離子強度特點可用於線蟲(c.elegans核纖層蛋白lamin)的中間纖維的形成。tris也是蛋白質電泳緩衝液的主要成分之一。此外,tris還是製備表面活性劑、硫化促進劑和一些藥物的中間物。tris也被用作滴定標準物。
1mtris-hcl(ph7.4,7.6,8.0)
組份濃度1mtris-hcl配製量1l配製方法:
1.稱量121.1gtris置於ll燒杯中。
2.加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。3.按下表加入濃hcl量調節所需要的ph值。
ph值濃hcl7.4約70ml7.6約60ml8.0約42ml
4.將溶液定容至1l。
5.高溫高壓滅菌後,室溫儲存。注意:應使溶液冷卻至室溫後再調定ph值,因為tris溶液的ph值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的ph值大約降低0.03個單位。
1.5mtris-hcl(ph8.8)
組份濃度1.5mtris-hcl配製量1l配製方法
1.稱量181.7gtris置於1l燒杯中。
2.加入約800ml的去離子水,充分攪拌溶解。3.用濃hcl調節ph值至8.8。4.將溶液定容至1l。
5.高溫高壓滅菌後,室溫儲存。注意:應使溶液冷卻至室溫後再調定ph值,因為tris溶液的ph值隨溫度的變化差異很大,溫度每升高1℃,溶液的ph值大約降低0.03個單位。
te即tris-edtabuffer(10mmtris,1mmedta,ph7.4ph7.6ph8.0)。
常用分子生物學試劑,用於dna的溶解等。配製10×tebuffer(ph7.4,7.6,8.0)
組份濃度:100mmtris-hcl,10mmedta配製量:1l配製方法:
1.量取下列溶液,置於ll燒杯中。
1mtris-hclbuffer(ph7.4,7.6,8.0)100ml500mmedta(ph8.0)20ml
2.向燒杯中加入約800ml的去離子水,均勻混合。3.將溶液定容至1l後,高溫高壓滅菌。4.室溫儲存。