稀釋水要預處理。
測定BOD5時，在稀釋水中加入營養物質，主要是為了使微生物正常發揮降解作用。
1.水樣的pH值若超出6.5~7.5範圍時,可用鹽酸或氫氧化鈉稀溶液將pH值調節到接近於7,但用量不要超過水樣體積的0.5%。若水樣的酸度或鹼度過高,可改用高濃度的鹼或酸進行中和。
2.水樣中含有銅、鉛、鋅、鎘、鉻、砷、氰等有毒物質時,可使用經馴化的微生物接種液的稀釋水進行稀釋,或提高稀釋倍數以減少毒物的濃度。
3.含有少量遊離氯的水樣,一般放置1~2h,遊離氯即可消失。對於遊離氯在短時間不能消散的水樣,可加入亞硫酸鈉溶液除去。其加入量由下述方法決定：取已中和好的水樣100ml,加入(1+1)乙酸10ml,10%(m/V)碘化鉀溶液1ml混合均勻。以澱粉溶液為指示劑,用亞硫酸鈉溶液滴定遊離碘。由亞硫酸鈉溶液消耗的體積,計算出水樣中應加入亞硫酸鈉溶液的量
4.從水溫較低的水域或富營養化的湖泊中採集的水樣,會遇到含有過飽和的溶解氧,此時應將水樣迅速升溫至20℃左右,在不使滿瓶的情況下,充分振搖,並進行開塞放氣,以趕出過飽和的溶解氧。 從水溫較高的水域或廢水排放口取得的水樣,則應迅速使其冷卻至20℃左右,並充分振搖使其與空氣中氧分壓接近平衡。
稀釋水的質量對BOD5的測定結果的準確性意義重大，因此要求稀釋水空白5日耗氧必須小於0.2mg/L，最好能控制在0.1mg/L以下，接種稀釋水5日耗氧應在0.3~1.0mg/L之間。
保證稀釋水質量的關鍵在於控制其有機物的含量最低和抑制微生物繁殖的物質含量最低，因此最好使用蒸餾水作為稀釋水，不宜使用離子交換樹脂製得的純水作為稀釋水，因為去離子水往往含有從樹脂中分離出的有機物。如果製備蒸餾水的自來水中含有某些揮發性有機物，為預防其殘留在蒸餾水中，就應在蒸餾前進行去除有機物的預處理。由金屬蒸餾器製得的蒸餾水，應注意檢查其中的金屬離子含量，以免發生抑制微生物的繁殖和代謝，影響BOD5測定結果的準確性。
如果所用稀釋水因含有有機物而不符合使用要求時，可採取加入適量曝氣池接種液後，在室溫或20℃條件下貯存一定時間的方法予以消除影響。接種的量以5d耗氧約0.1mg/L為原則，為防止藻類繁殖，貯存必須在暗室中進行。如果貯存後的稀釋水有沉渣，只能取用上清液，可過濾去除沉渣。
為確保稀釋水的溶解氧接近飽和，必要時可用真空泵或水射器吸入經淨化的空氣，也可用微型空壓機注入經淨化的空氣，還可用氧氣瓶通入純氧，然後將經過充氧的稀釋水在20℃培養箱中放置一定時間，使溶解氧達到平衡。冬季在較低室溫放置的稀釋水可能含有過多的溶解氧，夏季高溫季節則恰好相反，因此在室溫與20℃有明顯差別時，一定要放置在培養箱內穩定一段時間，使之和培養環境的氧分壓平衡。
稀釋水要預處理。
測定BOD5時，在稀釋水中加入營養物質，主要是為了使微生物正常發揮降解作用。
1.水樣的pH值若超出6.5~7.5範圍時,可用鹽酸或氫氧化鈉稀溶液將pH值調節到接近於7,但用量不要超過水樣體積的0.5%。若水樣的酸度或鹼度過高,可改用高濃度的鹼或酸進行中和。
2.水樣中含有銅、鉛、鋅、鎘、鉻、砷、氰等有毒物質時,可使用經馴化的微生物接種液的稀釋水進行稀釋,或提高稀釋倍數以減少毒物的濃度。
3.含有少量遊離氯的水樣,一般放置1~2h,遊離氯即可消失。對於遊離氯在短時間不能消散的水樣,可加入亞硫酸鈉溶液除去。其加入量由下述方法決定：取已中和好的水樣100ml,加入(1+1)乙酸10ml,10%(m/V)碘化鉀溶液1ml混合均勻。以澱粉溶液為指示劑,用亞硫酸鈉溶液滴定遊離碘。由亞硫酸鈉溶液消耗的體積,計算出水樣中應加入亞硫酸鈉溶液的量
4.從水溫較低的水域或富營養化的湖泊中採集的水樣,會遇到含有過飽和的溶解氧,此時應將水樣迅速升溫至20℃左右,在不使滿瓶的情況下,充分振搖,並進行開塞放氣,以趕出過飽和的溶解氧。 從水溫較高的水域或廢水排放口取得的水樣,則應迅速使其冷卻至20℃左右,並充分振搖使其與空氣中氧分壓接近平衡。
稀釋水的質量對BOD5的測定結果的準確性意義重大，因此要求稀釋水空白5日耗氧必須小於0.2mg/L，最好能控制在0.1mg/L以下，接種稀釋水5日耗氧應在0.3~1.0mg/L之間。
保證稀釋水質量的關鍵在於控制其有機物的含量最低和抑制微生物繁殖的物質含量最低，因此最好使用蒸餾水作為稀釋水，不宜使用離子交換樹脂製得的純水作為稀釋水，因為去離子水往往含有從樹脂中分離出的有機物。如果製備蒸餾水的自來水中含有某些揮發性有機物，為預防其殘留在蒸餾水中，就應在蒸餾前進行去除有機物的預處理。由金屬蒸餾器製得的蒸餾水，應注意檢查其中的金屬離子含量，以免發生抑制微生物的繁殖和代謝，影響BOD5測定結果的準確性。
如果所用稀釋水因含有有機物而不符合使用要求時，可採取加入適量曝氣池接種液後，在室溫或20℃條件下貯存一定時間的方法予以消除影響。接種的量以5d耗氧約0.1mg/L為原則，為防止藻類繁殖，貯存必須在暗室中進行。如果貯存後的稀釋水有沉渣，只能取用上清液，可過濾去除沉渣。
為確保稀釋水的溶解氧接近飽和，必要時可用真空泵或水射器吸入經淨化的空氣，也可用微型空壓機注入經淨化的空氣，還可用氧氣瓶通入純氧，然後將經過充氧的稀釋水在20℃培養箱中放置一定時間，使溶解氧達到平衡。冬季在較低室溫放置的稀釋水可能含有過多的溶解氧，夏季高溫季節則恰好相反，因此在室溫與20℃有明顯差別時，一定要放置在培養箱內穩定一段時間，使之和培養環境的氧分壓平衡。