核酸分子大小與瓊脂糖濃度有怎樣的關係
一般要根據要電泳分離的核酸的分子量大小:分子量大的核酸電泳時使用濃度較小的凝膠,分子量小的核酸電泳時使用濃度較大的凝膠.核酸在濃度越大的凝膠中電泳速度越小.如果膠濃度偏高,可能跑不動,如果膠濃度偏低,可能跑得太快,分不開.
可以查到核酸分子大小與瓊脂糖濃度範圍的對應關係.
天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約佔80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由於這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與某些蛋白質作用而影響電泳速度及分離效果。因此,目前多用瓊脂糖為電泳支援物進行平板電泳,其優點如下。
(1)瓊脂糖凝膠電泳操作簡單,電泳速度快,樣品不需事先處理就可以進行電泳。
(2)瓊脂糖凝膠結構均勻,含水量大(約佔98%~99%),近似自由電泳,樣品擴散較自由電流,對樣品吸附極微,因此電泳圖譜清晰,解析度高,重複性好。
(3)瓊脂糖透明無紫外吸收,電泳過程和結果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。
(4)電泳後區帶易染色,樣品極易洗脫,便於定量測定。製成幹膜可長期儲存。
目前,常用瓊脂糖作為電泳支援物,分離蛋白質和同工酶。將瓊脂糖電泳與免疫化學相結合,發展成免疫電泳技術,能鑑別其他方法不能鑑別的複雜體系,由於建立了超微量技術,0.1ug蛋白質就可檢出。
核酸分子大小與瓊脂糖濃度有怎樣的關係
一般要根據要電泳分離的核酸的分子量大小:分子量大的核酸電泳時使用濃度較小的凝膠,分子量小的核酸電泳時使用濃度較大的凝膠.核酸在濃度越大的凝膠中電泳速度越小.如果膠濃度偏高,可能跑不動,如果膠濃度偏低,可能跑得太快,分不開.
可以查到核酸分子大小與瓊脂糖濃度範圍的對應關係.
天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約佔80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構成的中性物質,不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強酸性多糖,由於這些基團帶有電荷,在電場作用下能產生較強的電滲現象,加之硫酸根可與某些蛋白質作用而影響電泳速度及分離效果。因此,目前多用瓊脂糖為電泳支援物進行平板電泳,其優點如下。
(1)瓊脂糖凝膠電泳操作簡單,電泳速度快,樣品不需事先處理就可以進行電泳。
(2)瓊脂糖凝膠結構均勻,含水量大(約佔98%~99%),近似自由電泳,樣品擴散較自由電流,對樣品吸附極微,因此電泳圖譜清晰,解析度高,重複性好。
(3)瓊脂糖透明無紫外吸收,電泳過程和結果可直接用紫外光燈檢測及定量測定。
(4)電泳後區帶易染色,樣品極易洗脫,便於定量測定。製成幹膜可長期儲存。
目前,常用瓊脂糖作為電泳支援物,分離蛋白質和同工酶。將瓊脂糖電泳與免疫化學相結合,發展成免疫電泳技術,能鑑別其他方法不能鑑別的複雜體系,由於建立了超微量技術,0.1ug蛋白質就可檢出。