定音器按照音高從高到低吹響的順序就是吉他上從1弦到6弦所對應的音高，在一個安靜的房間裡，吹響最高的那個孔，這個音高就是吉他上1弦所應在音高E，一邊吹這個音孔，一邊彈奏1弦並慢慢的調整1弦，直到吉他上1弦的音高與定音笛上的音高相同。然後按同樣的方法調整其他的琴絃即可。

電子定音器定音時，先將定音器按響，然後調整綠弦，把它調到儘量和定音器的音高一致。

la弦定完，根據五度關係，定上方的mi,或是下方的re，

然後根據八度關係定上方的re和下方的mi，繼續用五度和八度將其他弦定好。

如果你對五度和八度的聽覺印象不是很好的話，建議你使用帶有音高指示的定音器。

對應指示

1：D 2：E 3：#F 5：A（標準音，綠弦） 6：B

使用方法包括以下步驟：A．透過對應的按鍵輸入指令；B．微控制器處理單元根據輸入指令找到所儲存的標準音程式碼；C．根據程式碼產生該標準音的音訊訊號輸出，在發出標準音的同時，顯示單元輸出所發出標準音的音名、組序或弦序、所設定的A4值及模擬在五線譜上標示音。本發明由於可以將發出的標準音與實際樂器鍵盤對應起來，所以很容易表達出對應樂器中相鄰或相近的琴鍵或琴絃所發標準音的高低變化規律，非常直觀。