色譜峰均展寬的可能原因:
一、樣品量過載
稀釋樣品或減少進樣體積使色譜柱恢復平衡。注意:使用強度較弱(相對於流動相而言)的樣品溶劑,進樣體積可以達到色譜柱死體積的10%左右;而使用強度較強的溶劑,進樣體積可能高僅為柱死體積的1%。
二、室溫變化過大
需要使用色譜柱恆溫箱,以保證色譜柱溫度恆定。
三、系統沒有達到平衡
請保證色譜柱、檢測器等有足夠的時間平衡。如果是梯度洗脫,兩次進樣間保證足夠的時間使系統重新達到平衡。色譜柱次使用離子對試劑時,要有充足體積的流動相和足夠的沖洗時間確保色譜柱充分平衡。
四、色譜柱問題
若色譜柱問題可能會導致多種譜圖異常情況。色譜柱被汙染,如果是因為色譜柱被汙染導致了問題的出現,則應按照相關方法沖洗色譜柱,如果這樣做仍不能使問題得到解決,則需更換色譜柱;色譜柱柱效下降,如懷疑因色譜柱柱效降低導致,則要用一支柱效好的色譜柱更換當前色譜柱,然後用一系列標準樣品進行測試,比較保留時間的重複性,如果保留時間是重複的,則表明原來的色譜柱柱效已經下降,需更換色譜柱,如果保留時間不穩定,則問題可能出在流動相混合不均勻、溶劑或保護柱、線上過濾器被汙染等;如果系統中使用了保護柱,在測試柱效時應將其卸下,保護柱也可能是汙染源,所以在更換色譜柱的時候有必要將保護柱一同更換。
五、色譜柱選擇不當
檢查使用的色譜柱內徑和填料是否正確。
六、保護柱問題
所有的色譜峰都展寬通常是由於儀器或色譜柱選擇不當而造成的。一般要先檢查色譜柱和保護柱,因為它們是系統的核心組成部分,需要重點排查。
色譜峰均展寬的可能原因:
一、樣品量過載
稀釋樣品或減少進樣體積使色譜柱恢復平衡。注意:使用強度較弱(相對於流動相而言)的樣品溶劑,進樣體積可以達到色譜柱死體積的10%左右;而使用強度較強的溶劑,進樣體積可能高僅為柱死體積的1%。
二、室溫變化過大
需要使用色譜柱恆溫箱,以保證色譜柱溫度恆定。
三、系統沒有達到平衡
請保證色譜柱、檢測器等有足夠的時間平衡。如果是梯度洗脫,兩次進樣間保證足夠的時間使系統重新達到平衡。色譜柱次使用離子對試劑時,要有充足體積的流動相和足夠的沖洗時間確保色譜柱充分平衡。
四、色譜柱問題
若色譜柱問題可能會導致多種譜圖異常情況。色譜柱被汙染,如果是因為色譜柱被汙染導致了問題的出現,則應按照相關方法沖洗色譜柱,如果這樣做仍不能使問題得到解決,則需更換色譜柱;色譜柱柱效下降,如懷疑因色譜柱柱效降低導致,則要用一支柱效好的色譜柱更換當前色譜柱,然後用一系列標準樣品進行測試,比較保留時間的重複性,如果保留時間是重複的,則表明原來的色譜柱柱效已經下降,需更換色譜柱,如果保留時間不穩定,則問題可能出在流動相混合不均勻、溶劑或保護柱、線上過濾器被汙染等;如果系統中使用了保護柱,在測試柱效時應將其卸下,保護柱也可能是汙染源,所以在更換色譜柱的時候有必要將保護柱一同更換。
五、色譜柱選擇不當
檢查使用的色譜柱內徑和填料是否正確。
六、保護柱問題
所有的色譜峰都展寬通常是由於儀器或色譜柱選擇不當而造成的。一般要先檢查色譜柱和保護柱,因為它們是系統的核心組成部分,需要重點排查。