用試管制成斜面培養基，並接種原始試管種（保留種，並用於生產的母種即為生產母種），可用於擴接原種。1、培養基配方配方一：綜合馬鈴薯培養基、馬鈴薯200克葡萄糖20克磷酸氫二鉀2克硫酸鎂0.5克、維生素B110毫克瓊脂20克水1000毫升PH值自然。配方二：合成培養基、馬鈴薯20克葡萄糖20克磷酸二氫鉀2克蛋白腖10克牛肉膏5克、酵母膏5克硫酸鎂0.8克水1000毫升PH值自然。2、培養基製作方法：先將馬鈴薯洗淨去皮切成簿片，稱取200克，加水1000毫升，煮沸15—20分鐘，用4層紗布過濾，取其濾液並補足水至1000毫升，加入瓊脂20克，再加熱，瓊脂溶化後，再加入其它配方中的藥品。培養基的分裝，應在培養凝固前進行（瓊脂培養基40℃凝固）一般用漏斗，或分裝瓶，下端連線一段軟橡皮管，橡皮管下面再連線一水段玻璃管，在橡皮管上安裝一個止水彈簧夾，分裝時將玻璃管細口插入試管內，但不要碰到管壁，每支試管裝入量為度管長度1/4。裝好後塞上棉塞，每10支試管扎一捆，棉塞上用塑膠紙封紮好，用線繩捆紮起來。3、滅菌：將分裝後的試管扎捆好，放入高壓蒸氣滅菌鍋，在1公斤/釐米壓力下(鍋入溫度達121℃)滅菌20分鐘,使微生物包括芽子色全部殺死。待壓力降到0度時，慢慢放出鍋內氣體，趁培養基沒有凝固時，將試管擺成斜面。4、接種、培養：透過無菌操作方法將菌種接入試管斜面上，置28℃、3天后將溫度降至24℃繼續培養，12—15天左右，菌絲長滿整個試管斜面，即成(生產)母種。 擴充套件資料：菌種質量鑑定：菌種質量不僅與能否成功發菌有關，也關係到產量和效益，從事木耳栽培必須嚴把質量關。菌種的質量鑑定有兩個方面的含義：一是分離培養的菌種是否是栽培所需種類。二是菌種是否為優良菌株。黑木耳菌種正常菌絲應潔白，生活力旺盛，發菌培養45天后，瓶（袋）間自上而下會出現菊花狀或梅花型膠質原基，顏色明褐至黑褐色。如果瓶（袋）底積淡黃色液體，或上半部出現黃色粘液，培養基收縮，為過期老化菌種，應予淘汰。如果菌種菌絲僅發至瓶（袋）1/3－1/2處時出現淡黑色的膠狀耳基，說明菌種早熟，或擴大次數太多，或由於培養室光線過強。