酵母菌的培養和觀察 實驗前的思考 人類認識和利用酵母菌的歷史悠久，早在史前時期，先人們就學會釀酒。約在6000年前，就發明發麵的方法。直到十九世紀有了顯微鏡，人們才窺探到醉母菌的真面目。對酵母菌做純系培養分類研究的是與巴斯德同時代的丹麥人漢斯，他是為尋求釀造高品質啤酒的途徑才去深入研究酵母菌 目的要求 認識酵母菌的形態結構和出芽生殖。 酵母菌的利用。 材料用具 酵母菌培養液，顯微鏡，解剖針，載玻片，蓋玻片，吸管，鑷子，稀釋的碘酒，吸水紙（或白紙），放大鏡，紗布。 方法步驟 一 酵母菌的利用 1查閱酵母菌的利用相關資料：屬真菌。體呈圓形、卵形或橢圓形，內有細胞核、液泡和顆粒體物質。通常以出芽繁殖；有的能進行二等分分裂；有的種類能產生子囊孢子。廣泛分佈於自然界... 酵母菌的培養和觀察 實驗前的思考 人類認識和利用酵母菌的歷史悠久，早在史前時期，先人們就學會釀酒。約在6000年前，就發明發麵的方法。直到十九世紀有了顯微鏡，人們才窺探到醉母菌的真面目。對酵母菌做純系培養分類研究的是與巴斯德同時代的丹麥人漢斯，他是為尋求釀造高品質啤酒的途徑才去深入研究酵母菌 目的要求 認識酵母菌的形態結構和出芽生殖。 酵母菌的利用。 材料用具 酵母菌培養液，顯微鏡，解剖針，載玻片，蓋玻片，吸管，鑷子，稀釋的碘酒，吸水紙（或白紙），放大鏡，紗布。 方法步驟 一 酵母菌的利用 1查閱酵母菌的利用相關資料：屬真菌。體呈圓形、卵形或橢圓形，內有細胞核、液泡和顆粒體物質。通常以出芽繁殖；有的能進行二等分分裂；有的種類能產生子囊孢子。廣泛分佈於自然界，尤其在葡萄及其他各種果品和蔬菜上更多。是重要的發酵素，能分解碳水化合物產生酒精和二氧化碳等。生產上常用的有面包酵母、飼料酵母、酒精酵母和葡萄酒酵母等。有些能合成纖維素供醫藥使用，也有用於石油發酵的。啤酒酵母屬酵母菌屬。細胞呈圓形、卵形或橢圓形。以出芽繁殖，能形成子囊孢子。在發酵工業上，可用來發酵生產酒精或藥用酵母，也可透過菌體的綜合利用提取凝血質、麥角固醇、卵磷脂、輔酶甲與細胞色素丙等產品。 2聯絡實際，參觀沙灣啤酒廠，獲得酵母菌，麥芽，帶回準備試驗 二、觀察酵母菌 1．取一滴酵母菌培養液，製成臨時裝片。用顯微鏡觀察酵母菌的形態和顏色。 2．用稀釋的碘酒染色，觀察酵母菌的細胞壁、細胞核、細胞質和液泡。 3．畫一個正在進行出芽生殖的酵母菌，注出芽體。 三 酵母菌的擴培 3 菌種和培養基 3.1 菌種：啤酒酵母 3.2 培養基 3.2.1 酵母斜面培養基 10°麥芽汁固體斜面，pH5.0 3.2.2 酵母搖瓶種子培養基 10°麥芽汁，pH5.0或葡萄糖10%，玉米漿1%，尿素O.2%，pH5.0。 3.2.3 酵母分批發酵培養基 玉米粉經液化、糖化，摺合葡萄糖濃度為10%，玉米漿1%，硫酸銨0.4%，pH5.5。 3.2.4酵母分批補料發酵培養基(學生討論提出) 4 實驗儀器、裝置 （1）5升發酵罐； （2）搖瓶機或手搖； （3）超淨工作臺； （4）離心機 （5）顯微鏡 （6）分光光度計 （7）三角瓶。 5 實驗過程 5.1 分批培養 5.1.1 總流程 斜面培養 斜面培養基配製與滅菌，接種，培養 ↓ 所需儀器物品：滅菌鍋，試管，棉塞，培養基原料，培養箱 搖瓶種子 300毫升種子液，500ml三角瓶三隻。裝液100ml，培養基，培養搖瓶，紗布。 ↓ 上罐培養 (雙酶製糖)糖化液稀釋至l0%濃度，新增輔料，滅菌，接種。 ↓ 菌體分離 離心機或板框過濾器 5.1.2 斜面種子製備 自保藏斜面中挑取一環酵母菌體接入新鮮的斜面試管中，於28℃培養箱中培養24h。 5.1.3 搖瓶種子的製備 將上述培養好的斜面種子接入500ml三角瓶裝的滅過菌的100ml搖瓶種子培養基中，在28℃，200rpm震盪培養15-20h。 5.1.4 發酵罐培養 5升發酵罐裝入2升發酵培養基，121℃滅菌20min，冷卻至30℃，將培養好的搖瓶種子接入發酵罐（接種量2~3%）進行發酵。發酵條件為：溫度28℃， 5.1.5 過程監控 0小時：取樣測定總糖和還原糖； 4~24小時：每隔4小時取樣鏡檢、、菌體濃度； 6 實驗時間 三天 7 實驗分析專案和方法 （1）酵母鏡檢； （2）酵母濃度測定(溼重法)：吸取5ml菌液，2500rpm離心5min，去上清液，稱量菌體溼重 （3）發酵活力的測定 8 實驗報告內容和資料處理 9 實驗結果和討論 。 補充：5升發酵罐可用玻璃器皿代替，
酵母菌的培養和觀察 實驗前的思考 人類認識和利用酵母菌的歷史悠久，早在史前時期，先人們就學會釀酒。約在6000年前，就發明發麵的方法。直到十九世紀有了顯微鏡，人們才窺探到醉母菌的真面目。對酵母菌做純系培養分類研究的是與巴斯德同時代的丹麥人漢斯，他是為尋求釀造高品質啤酒的途徑才去深入研究酵母菌 目的要求 認識酵母菌的形態結構和出芽生殖。 酵母菌的利用。 材料用具 酵母菌培養液，顯微鏡，解剖針，載玻片，蓋玻片，吸管，鑷子，稀釋的碘酒，吸水紙（或白紙），放大鏡，紗布。 方法步驟 一 酵母菌的利用 1查閱酵母菌的利用相關資料：屬真菌。體呈圓形、卵形或橢圓形，內有細胞核、液泡和顆粒體物質。通常以出芽繁殖；有的能進行二等分分裂；有的種類能產生子囊孢子。廣泛分佈於自然界... 酵母菌的培養和觀察 實驗前的思考 人類認識和利用酵母菌的歷史悠久，早在史前時期，先人們就學會釀酒。約在6000年前，就發明發麵的方法。直到十九世紀有了顯微鏡，人們才窺探到醉母菌的真面目。對酵母菌做純系培養分類研究的是與巴斯德同時代的丹麥人漢斯，他是為尋求釀造高品質啤酒的途徑才去深入研究酵母菌 目的要求 認識酵母菌的形態結構和出芽生殖。 酵母菌的利用。 材料用具 酵母菌培養液，顯微鏡，解剖針，載玻片，蓋玻片，吸管，鑷子，稀釋的碘酒，吸水紙（或白紙），放大鏡，紗布。 方法步驟 一 酵母菌的利用 1查閱酵母菌的利用相關資料：屬真菌。體呈圓形、卵形或橢圓形，內有細胞核、液泡和顆粒體物質。通常以出芽繁殖；有的能進行二等分分裂；有的種類能產生子囊孢子。廣泛分佈於自然界，尤其在葡萄及其他各種果品和蔬菜上更多。是重要的發酵素，能分解碳水化合物產生酒精和二氧化碳等。生產上常用的有面包酵母、飼料酵母、酒精酵母和葡萄酒酵母等。有些能合成纖維素供醫藥使用，也有用於石油發酵的。啤酒酵母屬酵母菌屬。細胞呈圓形、卵形或橢圓形。以出芽繁殖，能形成子囊孢子。在發酵工業上，可用來發酵生產酒精或藥用酵母，也可透過菌體的綜合利用提取凝血質、麥角固醇、卵磷脂、輔酶甲與細胞色素丙等產品。 2聯絡實際，參觀沙灣啤酒廠，獲得酵母菌，麥芽，帶回準備試驗 二、觀察酵母菌 1．取一滴酵母菌培養液，製成臨時裝片。用顯微鏡觀察酵母菌的形態和顏色。 2．用稀釋的碘酒染色，觀察酵母菌的細胞壁、細胞核、細胞質和液泡。 3．畫一個正在進行出芽生殖的酵母菌，注出芽體。 三 酵母菌的擴培 3 菌種和培養基 3.1 菌種：啤酒酵母 3.2 培養基 3.2.1 酵母斜面培養基 10°麥芽汁固體斜面，pH5.0 3.2.2 酵母搖瓶種子培養基 10°麥芽汁，pH5.0或葡萄糖10%，玉米漿1%，尿素O.2%，pH5.0。 3.2.3 酵母分批發酵培養基 玉米粉經液化、糖化，摺合葡萄糖濃度為10%，玉米漿1%，硫酸銨0.4%，pH5.5。 3.2.4酵母分批補料發酵培養基(學生討論提出) 4 實驗儀器、裝置 （1）5升發酵罐； （2）搖瓶機或手搖； （3）超淨工作臺； （4）離心機 （5）顯微鏡 （6）分光光度計 （7）三角瓶。 5 實驗過程 5.1 分批培養 5.1.1 總流程 斜面培養 斜面培養基配製與滅菌，接種，培養 ↓ 所需儀器物品：滅菌鍋，試管，棉塞，培養基原料，培養箱 搖瓶種子 300毫升種子液，500ml三角瓶三隻。裝液100ml，培養基，培養搖瓶，紗布。 ↓ 上罐培養 (雙酶製糖)糖化液稀釋至l0%濃度，新增輔料，滅菌，接種。 ↓ 菌體分離 離心機或板框過濾器 5.1.2 斜面種子製備 自保藏斜面中挑取一環酵母菌體接入新鮮的斜面試管中，於28℃培養箱中培養24h。 5.1.3 搖瓶種子的製備 將上述培養好的斜面種子接入500ml三角瓶裝的滅過菌的100ml搖瓶種子培養基中，在28℃，200rpm震盪培養15-20h。 5.1.4 發酵罐培養 5升發酵罐裝入2升發酵培養基，121℃滅菌20min，冷卻至30℃，將培養好的搖瓶種子接入發酵罐（接種量2~3%）進行發酵。發酵條件為：溫度28℃， 5.1.5 過程監控 0小時：取樣測定總糖和還原糖； 4~24小時：每隔4小時取樣鏡檢、、菌體濃度； 6 實驗時間 三天 7 實驗分析專案和方法 （1）酵母鏡檢； （2）酵母濃度測定(溼重法)：吸取5ml菌液，2500rpm離心5min，去上清液，稱量菌體溼重 （3）發酵活力的測定 8 實驗報告內容和資料處理 9 實驗結果和討論 。 補充：5升發酵罐可用玻璃器皿代替，