基因工程的基本工具:
1、“分子手術刀”——限制性核酸內切酶(限制酶) 來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。 功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,並且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。 結果:經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。
2、“分子縫合針”——DNA連線酶 兩種DNA連線酶(E·coliDNA連線酶和T4-DNA連線酶)的比較:相同點:都縫合磷酸二酯鍵。 區別:E·coliDNA連線酶來源於大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連線起來;而T4DNA連線酶能縫合兩種末端,但連線平末端的之間的效率較低。 與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連線酶是連線兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。
3、“分子運輸車”——載體 載體具備的條件:能在受體細胞中複製並穩定儲存。具有一至多個限制酶切點,供外源DNA片段插入。具有標記基因,供重組DNA的鑑定和選擇。 最常用的載體是:質粒,它是一種裸露的、結構簡單的、獨立於細菌擬核之外,並具有自我複製能力的雙鏈環狀DNA分子。 其它載體:λ 噬菌體的衍生物、動植物病毒。
ps:基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術,是以分子遺傳學為理論基礎,以分子生物學和微生物學的現代方法為手段,將不同來源的基因按預先設計的藍圖,在體外構建雜種DNA分子,然後匯入活細胞,以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產新產品。
基因工程的基本工具:
1、“分子手術刀”——限制性核酸內切酶(限制酶) 來源:主要是從原核生物中分離純化出來的。 功能:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,並且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。 結果:經限制酶切割產生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。
2、“分子縫合針”——DNA連線酶 兩種DNA連線酶(E·coliDNA連線酶和T4-DNA連線酶)的比較:相同點:都縫合磷酸二酯鍵。 區別:E·coliDNA連線酶來源於大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連線起來;而T4DNA連線酶能縫合兩種末端,但連線平末端的之間的效率較低。 與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連線酶是連線兩個DNA片段的末端,形成磷酸二酯鍵。
3、“分子運輸車”——載體 載體具備的條件:能在受體細胞中複製並穩定儲存。具有一至多個限制酶切點,供外源DNA片段插入。具有標記基因,供重組DNA的鑑定和選擇。 最常用的載體是:質粒,它是一種裸露的、結構簡單的、獨立於細菌擬核之外,並具有自我複製能力的雙鏈環狀DNA分子。 其它載體:λ 噬菌體的衍生物、動植物病毒。
ps:基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術,是以分子遺傳學為理論基礎,以分子生物學和微生物學的現代方法為手段,將不同來源的基因按預先設計的藍圖,在體外構建雜種DNA分子,然後匯入活細胞,以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產新產品。