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  • 1 # 牛犇NBB

    一種羊肚菌菌種的培育方法,該方法包括以下步驟:

    (1)母種的製作及培養

    ①製作母種培養基:將250g土豆,30g瓊脂,25g葡萄糖和3g維生素B放入2000m1

    的水中加熱,直至瓊脂完全煮化即得母種培養基;

    ②培育母種:取所述母種培養基 200ml裝入300ml的試管中,用棉花塞住管口,將所述試管放在125℃的高壓滅菌鍋內滅菌1. 5h冷卻至室溫後,將所述試管放入密封的無菌接種箱中,每個試管中接入1cmX 1cm的菌絲後,置於20℃培養箱中,直至生長成母種。

    在步驟(1)中,土豆需要預先放入水中煮半小時,之後將其撈山,再與瓊脂、葡萄糖、維生素B一起放入水中煮,直至瓊脂煮化,將煮好的培養基放在試管裡,等凝固之後,再用棉花寒住試管的管口。進行母種的培育時,在將試管放入接種箱之前,還需要用75%的酒精擦拭試管,對試管的外壁進行灑精消毒。

    在將試管放進無菌接種箱內時,還需要將用於接種的下其一同放進接種箱的,如:托盤、酒精燈、打火機、器皿、接種鉤、鑷子等一起放入接種箱內進行消毒處理.對於接種箱內的消毒處理,可以將裝有高錳酸鉀和甲醛混合物的被子放入接種箱內,消毒時保證接種箱的密封。

    (2)原種的製作及培養

    ①製作原種培養基:以質量分數計,取小麥80 %、木銷10%和麥麩10%,將所述小麥煮熟後撈出,與所述木銷和麥數攪拌均勻,水分控制在60-80 % ,裝入培養瓶中,瓶口用棉花塞住,將所述培養瓶放在火菌鍋裡火菌後,100℃下保溫6小時,取出冷卻後即得原種培養基;

    ②培育原種:將所述培養瓶和裝有母種的試管放入接種箱中密封半小時後,再將試管中的毋種接入到所述原種培養基的培養瓶中,保持溫度20℃即可。

    (3)較培中的製作及培養

    ①製作栽培種培養基:以質量分數計,取小麥75%煮熟後撈出,放入15%木銷、

    5%麥麩和5%泥上攪拌均勻,含水量60% -80%.裝入聚丙烯袋中封口,將所述聚丙烯袋放在滅菌鍋裡滅菌.常壓100℃下儲存4小時,取出冷卻至室溫:

    ②培育栽培種:將所述聚丙烯袋和原種培養基的培養瓶置於接種箱中密封半小時後,再將步驟(2)培養的原種接入到所述聚丙烯袋巾,在20℃環境下培養15-20天可獲得栽培種。

    在上述的步驟(1)之前,還需要採集新鮮的羊肚菌子實體,將子實體切成直徑

    2-3mm的菌塊,取經過高壓滅菌的PDA培養纂,將所述菌塊放在PDA培養基上,將所述PDA培養基置於20℃的培養箱中,,周後可獲得菌絲。

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