(1)培育轉基因奶牛時,根據基因的選擇性表達原理,需要在生長激素編碼序列前插入乳腺蛋白基因的啟動子,使生長激素編碼序列只在乳腺組織細胞中表達.
(2)因為基因中啟動子的鹼基序列不能被轉錄,所以由基因表達產物無法推知啟動子鹼基序列.
(3)含有目的基因的外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、MboⅠ、HindⅢ的識別序列和切割位點,但是用限制酶HindⅢ、MboⅠ和HindⅢ切割都會破壞目的基因,所以過程①應選擇限制酶BamHⅠ.而限制酶BamHⅠ和MboⅠ的識別序列相同,所以過程③中要將基因表達載體中的目的基因切開,應選擇位於目的基因上的另一個限制酶HindⅢ.過程④表示採用PCR技術體外擴增目的基因的過程,該過程在高溫條件下進行,因此需要使用耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶).
(4)過程④中可以根據基因編碼序列兩端的部分鹼基序列設計引物進行擴增.擴增過程中,在第三輪迴圈產物中開始出現兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段.
(5)因為基因中相鄰的3個鹼基決定一個密碼子,所以過程⑤中將克隆的啟動子與外源基因編碼序列連線時,原引物a所在的P片段的鹼基對數目應是3的整數倍,目的是保證外源基因編碼序列編碼正確的氨基酸序列.
故答案為:
(1)乳腺蛋白基因
(2)基因中啟動子的鹼基序列不能被轉錄
(3)BamHⅠHindⅢ耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)
(4)引物 三
(5)保證外源基因編碼序列編碼正確的氨基酸序列
(1)培育轉基因奶牛時,根據基因的選擇性表達原理,需要在生長激素編碼序列前插入乳腺蛋白基因的啟動子,使生長激素編碼序列只在乳腺組織細胞中表達.
(2)因為基因中啟動子的鹼基序列不能被轉錄,所以由基因表達產物無法推知啟動子鹼基序列.
(3)含有目的基因的外源DNA分子上含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、MboⅠ、HindⅢ的識別序列和切割位點,但是用限制酶HindⅢ、MboⅠ和HindⅢ切割都會破壞目的基因,所以過程①應選擇限制酶BamHⅠ.而限制酶BamHⅠ和MboⅠ的識別序列相同,所以過程③中要將基因表達載體中的目的基因切開,應選擇位於目的基因上的另一個限制酶HindⅢ.過程④表示採用PCR技術體外擴增目的基因的過程,該過程在高溫條件下進行,因此需要使用耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶).
(4)過程④中可以根據基因編碼序列兩端的部分鹼基序列設計引物進行擴增.擴增過程中,在第三輪迴圈產物中開始出現兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段.
(5)因為基因中相鄰的3個鹼基決定一個密碼子,所以過程⑤中將克隆的啟動子與外源基因編碼序列連線時,原引物a所在的P片段的鹼基對數目應是3的整數倍,目的是保證外源基因編碼序列編碼正確的氨基酸序列.
故答案為:
(1)乳腺蛋白基因
(2)基因中啟動子的鹼基序列不能被轉錄
(3)BamHⅠHindⅢ耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)
(4)引物 三
(5)保證外源基因編碼序列編碼正確的氨基酸序列