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  • 1 # 哼哼會

    換個詞可能更容易理解,藥敏試驗又稱為藥物敏感試驗(或耐藥試驗)

    旨在瞭解病原微生物對各種抗生素的敏感(或耐受)程度,測試抗菌藥物在體外對病原微生物有無抑制作用,方便臨床給藥。

    藥敏試驗的操作步驟很簡單,關鍵是你需要懂得做藥敏試驗的價值!

    它的作用是什麼?

    檢測病原菌對各種抗生素的敏感性,避免盲目用藥、濫用藥、大劑量用藥;監測耐藥性,控制和預防耐藥菌株的流行;為經驗用藥提供所選藥物的參考依據;新抗菌藥的研究。

    哪些情況需要做藥敏?

    對任何分離的可疑病原菌,若不能從該菌的種屬特徵可靠地推知其對抗菌藥物的敏感性,就需要進行藥敏試驗。

    哪些情況不需要做藥敏?

    非致病細菌引起;已知某些抗菌藥對某菌有良好的抗菌作用且很少有耐藥菌產生;已知細菌全部耐藥的藥物;對營養要求高而不易生長的細菌。

    試驗室常用的藥敏測定方法:擴散法、稀釋法、E測定法

    最為普世的是紙片法(WHO推薦的全球統一的標準方法)

    紙片法(擴散法):用病料直接在平板上進行塗抹後貼藥敏片,培養後觀察。或者先進行細菌的增值培養後,再取培養菌進行平板藥敏試驗。

    用單紙片法進行藥敏測定時,透過測試藥物紙片在固定培養基上的抑菌圈的大小,判斷細菌對該種藥物是否敏感。透過領取直徑大小來判斷。

    敏感(S):常規劑量即可治癒;中介(I):需要高劑量藥物進行治療;耐藥(R):細菌不能被該種藥物抑制。

    除此之外,還可以雙紙片測定,原理一樣,用於聯合藥物藥敏試驗,主要會出現四種結果:

    協調作用:甲+乙>甲單+乙單;

    累加作用:甲+乙=甲單+乙單;

    無關作用:甲+乙=甲單或乙單;

    拮抗作用:甲+乙<甲單或乙單。

    其他說明:

    抑菌圈邊緣分界清晰、內部潔淨透明,說明該抗菌藥物作用迅速,多半為殺菌劑;

    邊緣不十分清晰、顳部朦朧說明可能是慢效抑菌劑或有耐藥的產生、或分解較快維持抗菌時間段。

    抑菌圈中分層次形成同心年輪樣,可能是聯合使用抗菌藥物或該抗菌藥物失效過快或細菌產生了耐藥性。

    注意:

    藥敏試驗確定的首選藥物不是一成不變的,要定期進行藥敏檢驗藥敏試驗結果僅為臨床選擇高敏藥物的參考。在選擇高敏藥物時還應考慮藥物的吸收途徑窄譜抗生素能解決的問題就不選廣譜抗生素,單一抗生素能治療就不要聯合用藥。避開已經使用過的藥物或其他同類藥物,發病期間已用過的藥物或同類藥物一般不用。

    名詞解釋:

    MIC:體外能抑制細菌生長的最低藥物濃度,臨床上根據MIC確定藥物劑量,通常達到穩態的血液藥峰濃度應為MIC的4-8倍,重症感染以大於8倍為妥。

  • 2 # 亡命之徒在路上

    藥敏試驗是臨床中最常用的檢驗細菌耐藥性的手段,同時也為臨床使用抗菌藥物提供了第一手資料。

    藥敏試驗也有許多不同的方法,常見的方法主要有紙片擴散法、稀釋法以及Etest法。

    紙片擴散法是將含有定量抗菌藥物的紙片貼在已接種測試菌的瓊脂培養皿上,紙片中所含的藥物吸取瓊脂中的水分,溶解後便不斷向紙片周圍區域擴散形成遞減的濃度梯度,在紙片周圍抑菌濃度範圍內測試菌的生長被抑制,從而形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小就反映了測試菌對抗菌藥物的敏感程度。抑菌圈越大,測試菌對抗菌藥物越敏感。這種方法簡便易行,藥物選擇靈活自由,成本低廉,但是美中不足的是這種方法的準確性受到很多因素影響,例如藥物紙片的質量、培養皿中的生長條件等等,因此只能作為定性試驗。

    稀釋法則是一種定量試驗,其原理是將配製好的不同濃度的抗菌藥物與瓊脂或肉湯混合,使其中的藥物濃度成為依次遞增或遞減的測試系列,接種定量細菌後,經35℃培育一定時間,肉眼觀察能抑制細菌生長的最低藥物濃度為該藥物的最低抑菌濃度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC)。以MIC值位於CLSI規定的敏感(S)、中介(I)和耐藥(R)折點值範圍而判斷結果。稀釋法的結果可以作為評價標準,尤其是瓊脂稀釋法是耐藥菌檢測的金標準,其他方法必須與稀釋法相比較才能確定其可靠性。但是稀釋法操作繁瑣,不適用於臨床大規模的使用,同時只能用於營養要求不高的細菌。

    Etest法則結合了上述兩種方法的優點,其原理是使用濃度呈連續梯度的抗菌藥物從塑膠試條中向藥敏瓊脂中擴散,在試條周圍細菌的生長被抑制,從而形成了透明樣的水滴狀抑菌圈。這樣的方法克服了兩種方法的缺點,在簡單易行的操作下可以獲得抗菌藥物定量的MIC值,同時降低了對細菌營養需求的要求。目前這種方法還比較昂貴,無法替代紙片擴散法。

    除了上述這些之外,還可以使用全自動微生物鑑定藥敏分析儀,透過檢測菌液的濁度、熒光指示劑的熒光強度或熒光底物的水解反應來判讀MIC結果。這樣的方法可以最大程度的節省人力成本,同時兼具簡單、準確、快速的優點,然而這樣的儀器也限制了抗生素選擇的自由度。這些方法都是檢測細菌的耐藥表型,即細菌是否表現出耐藥,還有一種是使用聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)檢測細菌的耐藥基因,這樣的方法對低水平耐藥或臨界水平耐藥的超級細菌有較高的敏感性,不會出現漏檢的情況。

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