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  • 1 # 芒種1234

    常用的剛果紅染色法有兩種,一種是先培養微生物,再加入剛果紅進行顏色反應,另一種是在倒平板時就加入剛果紅。

    方法一 在長出茵落的培養基上,覆蓋質量濃度為1 mg/mI。的CR溶液,10~15 min後,倒去CR溶液,加入物質的量濃度為l mol/I。的NaCI溶液,15 min後倒掉NaCl溶液,此時,產生纖維素酶的茵落周圍將會出現透明圈。

    方法二 配製質量濃度為10 mg/mI。的CR溶液,滅菌後,按照每200 mI。培養基加入1 mI。的比例加入CR溶液,混勻後倒平板。等培養基上長出茵落後,產生纖維素酶的菌落周圍將會出現明顯的透明圈。

    兩種剛果紅染色法的比較

    剛果紅在篩選纖維素分解菌上的應用已經有超過20年的歷史,課本中給出了兩種方法。方法一是傳統的方法,缺點是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發生混雜;其優點是這樣顯示出的顏色反應基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優點是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點是由於在纖維素粉和瓊脂、土豆汁中都含有澱粉類物質,可以使能夠產生澱粉酶的微生物出現假陽性反應。但這種只產生澱粉酶的微生物產生的透明圈較為模糊,因為培養基中纖維素佔主要地位,因此可以與纖維素酶產生的透明圈相區分。方法二的另一缺點是:有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時間培養過程中會降解剛果紅而形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區分。

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