材料與試劑

以布氏桿菌病平板凝集反應為例。

1．玻璃板、刻度吸管等。

2．布氏桿菌平板凝集抗原、布氏桿菌標準陽性血清。

操作方法

1．取潔淨玻板一塊，用玻璃鉛筆劃成方格，並註明待檢血清號碼。

2．取０.２ml吸管分別吸取0.08ml、0.04ml、0.02ml和0.01ml各放入一方格內。大規模檢驗時，可只做２個血清量，大動物用0.04ml和0.02ml，中小動物用0.08ml和0.04ml。每檢一個樣品需換一隻吸管。

3．每格內加布氏桿菌平板凝集抗原0.03ml，滴在血清附近，而不要與血清接觸。用牙籤（或火柴桿）自血清量最小的一格起，將血清與抗原混勻，每份血清用一根牙籤。

4．混合完畢，將玻板置凝集反應箱上均勻加溫或採用別的辦法適當加溫，使溫度達到３０℃左右。3min～5min內記錄結果。

結果判定

＋＋＋＋：出現大的凝集塊，液體完全清亮透明，即100％凝集。

＋＋＋ ：有明顯的凝集片，液體幾乎完全透明，即75％凝集。

＋＋ ：有可見的凝集片，液體不甚透明，即50％凝集。

＋ ：液體混濁，有小的顆粒狀物，即25％的凝集。

－ ：液體均勻混濁，即不凝集。

以出現＋＋凝集的血清最高稀釋倍數作為該份血清的凝集價。大動物（牛、馬、駱駝等）以0.02ml出現凝集價判為布氏桿菌病血清陽性，0.04ml出現凝集價判為可疑。中小動物（豬、山羊、綿羊等）以0.04ml出現凝集價判為該份血清為布氏桿菌病陽性血清，0.08ml出現凝集價判為可疑。

注意事項

1．每次試驗必須以標準陽性血清和標準陰性血清進行對照。

2．加抗原前必須搖勻。

3．反應溫度最好保證在30℃左右，3min～5min內判定。如反應溫度偏低，可適當延

長判讀時間。

4．如用兩個血清量作試驗，任何一個血清量出現凝集反應時，則需要用四個血清量重檢。

5．平板凝集反應最好是用於初篩，如出現陽性或可疑反應，再用試管凝集反應進行復檢，以定性。

6．平板凝集反應與試管凝集反應的關係。

表 平板凝集反應與試管凝集反應的關係

平 板 凝集 反 應

0.08

0.04

0.02

0.01

試管凝集反應

1︰25

1︰50

1︰100

1︰200

材料與試劑

以布氏桿菌病平板凝集反應為例。

1．玻璃板、刻度吸管等。

2．布氏桿菌平板凝集抗原、布氏桿菌標準陽性血清。

操作方法

1．取潔淨玻板一塊，用玻璃鉛筆劃成方格，並註明待檢血清號碼。

2．取０.２ml吸管分別吸取0.08ml、0.04ml、0.02ml和0.01ml各放入一方格內。大規模檢驗時，可只做２個血清量，大動物用0.04ml和0.02ml，中小動物用0.08ml和0.04ml。每檢一個樣品需換一隻吸管。

3．每格內加布氏桿菌平板凝集抗原0.03ml，滴在血清附近，而不要與血清接觸。用牙籤（或火柴桿）自血清量最小的一格起，將血清與抗原混勻，每份血清用一根牙籤。

4．混合完畢，將玻板置凝集反應箱上均勻加溫或採用別的辦法適當加溫，使溫度達到３０℃左右。3min～5min內記錄結果。

結果判定

＋＋＋＋：出現大的凝集塊，液體完全清亮透明，即100％凝集。

＋＋＋ ：有明顯的凝集片，液體幾乎完全透明，即75％凝集。

＋＋ ：有可見的凝集片，液體不甚透明，即50％凝集。

＋ ：液體混濁，有小的顆粒狀物，即25％的凝集。

－ ：液體均勻混濁，即不凝集。

以出現＋＋凝集的血清最高稀釋倍數作為該份血清的凝集價。大動物（牛、馬、駱駝等）以0.02ml出現凝集價判為布氏桿菌病血清陽性，0.04ml出現凝集價判為可疑。中小動物（豬、山羊、綿羊等）以0.04ml出現凝集價判為該份血清為布氏桿菌病陽性血清，0.08ml出現凝集價判為可疑。

注意事項

1．每次試驗必須以標準陽性血清和標準陰性血清進行對照。

2．加抗原前必須搖勻。

3．反應溫度最好保證在30℃左右，3min～5min內判定。如反應溫度偏低，可適當延

長判讀時間。

4．如用兩個血清量作試驗，任何一個血清量出現凝集反應時，則需要用四個血清量重檢。

5．平板凝集反應最好是用於初篩，如出現陽性或可疑反應，再用試管凝集反應進行復檢，以定性。

6．平板凝集反應與試管凝集反應的關係。

表 平板凝集反應與試管凝集反應的關係

平 板 凝集 反 應

0.08

0.04

0.02

0.01

試管凝集反應

1︰25

1︰50

1︰100

1︰200