蛋白質的提取
準備試劑：異丙醇含0.3M鹽酸胍的95%乙醇無水乙醇1%SDS。
操作步驟：
1.取沉澱DNA後剩餘的上清，用異丙醇沉澱蛋白質。每使用1ml TRIzol加1.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘，2～8℃12000×g離心10分鐘棄上清。
2.用含0.3M鹽酸胍的95%乙醇洗滌蛋白質沉澱。每使用1mlTRIzol加2ml洗滌液，室溫放置20分鐘，2～8℃7500×g離心5分鐘，棄上清，重複兩次。用2ml無水乙醇同樣方法再洗一次。
3.真空抽乾蛋白質沉澱5～10分鐘，用1%SDS溶解蛋白質，反覆吸打，50℃溫浴使其完全溶解，不溶物2～8℃10000×g離心10分鐘除去。分離得到的蛋白質樣品可用於Western Blot或-5至-20℃儲存備用。
注意事項：
1.蛋白質沉澱可儲存在含0.3M鹽酸胍的95%乙醇或無水乙醇中2～8℃一個月以上或-5至-20℃一年以上。
2.用0.1% SDS在2～8℃透析三次，10000×g離心10分鐘取上清即可用於Western Blot。
常見問題分析：
得率低：
A.樣品裂解或勻漿處理不徹底。
B.最後得到的蛋白質沉澱未完全溶解。
蛋白質降解：組織取出後沒有馬上處理或冷凍。
電泳時條帶變形：蛋白質沉澱洗滌不充分。
蛋白質的提取
準備試劑：異丙醇含0.3M鹽酸胍的95%乙醇無水乙醇1%SDS。
操作步驟：
1.取沉澱DNA後剩餘的上清，用異丙醇沉澱蛋白質。每使用1ml TRIzol加1.5ml異丙醇，室溫放置10分鐘，2～8℃12000×g離心10分鐘棄上清。
2.用含0.3M鹽酸胍的95%乙醇洗滌蛋白質沉澱。每使用1mlTRIzol加2ml洗滌液，室溫放置20分鐘，2～8℃7500×g離心5分鐘，棄上清，重複兩次。用2ml無水乙醇同樣方法再洗一次。
3.真空抽乾蛋白質沉澱5～10分鐘，用1%SDS溶解蛋白質，反覆吸打，50℃溫浴使其完全溶解，不溶物2～8℃10000×g離心10分鐘除去。分離得到的蛋白質樣品可用於Western Blot或-5至-20℃儲存備用。
注意事項：
1.蛋白質沉澱可儲存在含0.3M鹽酸胍的95%乙醇或無水乙醇中2～8℃一個月以上或-5至-20℃一年以上。
2.用0.1% SDS在2～8℃透析三次，10000×g離心10分鐘取上清即可用於Western Blot。
常見問題分析：
得率低：
A.樣品裂解或勻漿處理不徹底。
B.最後得到的蛋白質沉澱未完全溶解。
蛋白質降解：組織取出後沒有馬上處理或冷凍。
電泳時條帶變形：蛋白質沉澱洗滌不充分。