1利用ResourceTM Phe為色譜柱,摸索了FPLC一步分離純化HMW-GS的方法。其最佳洗脫條件為:以含有4M脲和0.25M (NH4)2SO4的0.05M Tris-HC(lpH8.0)BufferA作為平衡液,以含有4M脲的0.05M Tris-HCl (pH8.0) Buffer B作為洗脫液,以0.5ml/min流速進行非線性梯度洗脫,可以純化到部分HMW-GS。HMW-GSs的脫順序為:y-亞基、1Dx亞基、1Bx亞基和1Ax亞基。 2利用所建立的FPLC方法對所選材料的HMW-GSs進行了分離純化,從小偃6中純化到了1Dx2亞基和1Bx14亞基;從小偃503中純化到1Bx7亞基和1Dx2亞基;從預展2000中純化到1Bx13亞基和1Dx4亞基;從濟南17中純化到1Bx7亞基和1Dx5亞基。 3用所建立方法可以分離純化任一基因型小麥中的1Bx-和1Dx型亞基;同時還可分離到純的y-型亞基的混合物。 4建立了利用Reaction Red-120親和層析分離純化小偃6號中HMW-GS1Bx14亞基的方法。其最佳的洗脫條件為:0.05M Tris-HCL+4M脲(pH8.0)緩衝體系,SDS濃度為0.04%。 這些研究結果為單一HMW-GS的有效分離純化提供了新方法。
1利用ResourceTM Phe為色譜柱,摸索了FPLC一步分離純化HMW-GS的方法。其最佳洗脫條件為:以含有4M脲和0.25M (NH4)2SO4的0.05M Tris-HC(lpH8.0)BufferA作為平衡液,以含有4M脲的0.05M Tris-HCl (pH8.0) Buffer B作為洗脫液,以0.5ml/min流速進行非線性梯度洗脫,可以純化到部分HMW-GS。HMW-GSs的脫順序為:y-亞基、1Dx亞基、1Bx亞基和1Ax亞基。 2利用所建立的FPLC方法對所選材料的HMW-GSs進行了分離純化,從小偃6中純化到了1Dx2亞基和1Bx14亞基;從小偃503中純化到1Bx7亞基和1Dx2亞基;從預展2000中純化到1Bx13亞基和1Dx4亞基;從濟南17中純化到1Bx7亞基和1Dx5亞基。 3用所建立方法可以分離純化任一基因型小麥中的1Bx-和1Dx型亞基;同時還可分離到純的y-型亞基的混合物。 4建立了利用Reaction Red-120親和層析分離純化小偃6號中HMW-GS1Bx14亞基的方法。其最佳的洗脫條件為:0.05M Tris-HCL+4M脲(pH8.0)緩衝體系,SDS濃度為0.04%。 這些研究結果為單一HMW-GS的有效分離純化提供了新方法。