步驟一、醋酸菌菌種擴大增殖培養
1)醋酸菌菌種活化;
2)醋酸菌篩選;
3)醋酸菌的擴大培養;
步驟二、紅曲米醋的製備。
進一步的,本發明的紅曲米醋的製備工藝具體包括以下步驟:
1)醋酸菌菌種活化:
①在含有50-100mg醋酸菌凍乾粉的安培管內加入0.3mL無菌水,混合均勻,製成菌懸液,備用;
②將步驟1)中製得的菌懸液接種到含有50ml富集培養基的三角瓶內,放入搖床中,在轉速為120r/min、溫度為30-33℃條件下,培養48小時,製得醋酸菌菌種富集液;
2)醋酸菌篩選:
①用無菌去離子水將醋酸菌菌種富集液分別稀釋成濃度為10-4的醋酸菌菌種稀釋液、10-5的醋酸菌菌種稀釋液、10-6的醋酸菌菌種稀釋液,備用;
②在分離培養基平板上分別接種0.2ml的10-4的醋酸菌菌種稀釋液、0.2ml的10-5的醋酸菌菌種稀釋液、0.2ml的10-6的醋酸菌菌種稀釋液,在溫度為30-33℃條件下,培養3天,後從分離培養基平板上挑選透明圈直徑為3-5mm、菌落豐厚且佔生長優勢的單菌落,挑取1個單菌落接種在6ml的斜面分離培養基上,在溫度為30-33℃下培養2天,製得醋酸菌接種菌,4℃儲存,備用;
3)醋酸菌的擴大培養:
①在裝有150mL基礎培養基的三角瓶內刮入0.2mg的醋酸菌接種菌,混合均勻,將其放入搖床內,在轉速為120r/min、溫度為30-33℃條件下,培養24h,製備醋酸菌擴大培養初液,備用;
②在裝有300mL基礎培養基的三角瓶內接種30ml的醋酸菌擴大培養初液,在轉速為120r/min、溫度為30℃條件下培養12h,製得醋酸菌擴大培養液,4℃儲存,備用;
步驟二、紅曲米醋的製備
1)按重量百分計取99.87-99.94%的紅曲發酵過濾液、0.06-0.13%的營養鹽,混合均勻,送入發酵罐內,在溫度為121℃,滅菌30分鐘,製得無菌紅曲發酵濾液,備用;
2)無菌紅曲發酵濾液自然冷卻至70-75℃時,用酒精度為65-80%的食用乙醇將無菌紅曲發酵濾液的酒精度調至4-12%,酸度為0-0.5度,製得紅曲發酵液備用;
3)按體積百分計取85-94%的紅曲發酵液、6-15%的醋酸菌擴大培養液,在發酵罐內加入紅曲發酵液、醋酸菌擴大培養液,混合均勻,在溫度為30-33℃,空氣流量為45-60m3/h條件下,發酵3-4天,檢測酒精度<0.5%、酸度為3.5-11.5度,形成紅曲米醋半成品,在溫度為135℃-150℃條件下,滅菌4-15秒,然後陳化20-40天,製得成品。
步驟一、醋酸菌菌種擴大增殖培養
1)醋酸菌菌種活化;
2)醋酸菌篩選;
3)醋酸菌的擴大培養;
步驟二、紅曲米醋的製備。
進一步的,本發明的紅曲米醋的製備工藝具體包括以下步驟:
步驟一、醋酸菌菌種擴大增殖培養
1)醋酸菌菌種活化:
①在含有50-100mg醋酸菌凍乾粉的安培管內加入0.3mL無菌水,混合均勻,製成菌懸液,備用;
②將步驟1)中製得的菌懸液接種到含有50ml富集培養基的三角瓶內,放入搖床中,在轉速為120r/min、溫度為30-33℃條件下,培養48小時,製得醋酸菌菌種富集液;
2)醋酸菌篩選:
①用無菌去離子水將醋酸菌菌種富集液分別稀釋成濃度為10-4的醋酸菌菌種稀釋液、10-5的醋酸菌菌種稀釋液、10-6的醋酸菌菌種稀釋液,備用;
②在分離培養基平板上分別接種0.2ml的10-4的醋酸菌菌種稀釋液、0.2ml的10-5的醋酸菌菌種稀釋液、0.2ml的10-6的醋酸菌菌種稀釋液,在溫度為30-33℃條件下,培養3天,後從分離培養基平板上挑選透明圈直徑為3-5mm、菌落豐厚且佔生長優勢的單菌落,挑取1個單菌落接種在6ml的斜面分離培養基上,在溫度為30-33℃下培養2天,製得醋酸菌接種菌,4℃儲存,備用;
3)醋酸菌的擴大培養:
①在裝有150mL基礎培養基的三角瓶內刮入0.2mg的醋酸菌接種菌,混合均勻,將其放入搖床內,在轉速為120r/min、溫度為30-33℃條件下,培養24h,製備醋酸菌擴大培養初液,備用;
②在裝有300mL基礎培養基的三角瓶內接種30ml的醋酸菌擴大培養初液,在轉速為120r/min、溫度為30℃條件下培養12h,製得醋酸菌擴大培養液,4℃儲存,備用;
步驟二、紅曲米醋的製備
1)按重量百分計取99.87-99.94%的紅曲發酵過濾液、0.06-0.13%的營養鹽,混合均勻,送入發酵罐內,在溫度為121℃,滅菌30分鐘,製得無菌紅曲發酵濾液,備用;
2)無菌紅曲發酵濾液自然冷卻至70-75℃時,用酒精度為65-80%的食用乙醇將無菌紅曲發酵濾液的酒精度調至4-12%,酸度為0-0.5度,製得紅曲發酵液備用;
3)按體積百分計取85-94%的紅曲發酵液、6-15%的醋酸菌擴大培養液,在發酵罐內加入紅曲發酵液、醋酸菌擴大培養液,混合均勻,在溫度為30-33℃,空氣流量為45-60m3/h條件下,發酵3-4天,檢測酒精度<0.5%、酸度為3.5-11.5度,形成紅曲米醋半成品,在溫度為135℃-150℃條件下,滅菌4-15秒,然後陳化20-40天,製得成品。