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  • 1 # 使用者1852303238923

    目前有哪些蛋白質工程分子改造的常用方法 蛋白質工程(protein engineering)是根據蛋白質的結構和生物活力之間的關係,利用基因工程的手段,按照人類需要定向地改造天然蛋白質或設計製造新的蛋白質。

    蛋白質工程與基因工程密不可分。基因工程是透過基因操作把外源基因轉入適當的生物體內,並在其中進行表達,它的產品還是該基因編碼的天然存在的蛋白質。蛋白質工程則更進一步根據分子設計的方案,透過對天然蛋白質的基因進行改造,來實現對其所編碼的蛋白質的改造,它的產品已不再是天然的蛋白質,而是經過改造的,具有人類需要的優點的蛋白質。天然蛋白質都是透過漫長的進化過程自然選擇而來的,而蛋白質工程對天然蛋白質的改造則是加快了的進化過程,能夠更快、更有效地為人類的需要服務。傳統的常規誘變及篩選技術雖然能夠創造一個突變基因,產生一個突變蛋白,但這種誘變方法是隨機的,很少能導致靶基因或靶蛋白髮生改變;在蛋白質水平上的化學修飾雖然能夠改變天然蛋白,但其工藝十分繁雜,甚至不能進行,而且由於基因沒有改變,不能再產生所修飾的蛋白質。蛋白質工程則不存在這些問題,所以當人們需要某種具有一定特性的蛋白質時,可以透過蛋白質工程,在基因水平上定做一個非天然變異蛋白質。也就是說,蛋白質工程製造的蛋白質的特點是:天然不存在的(人工設計製作)、經特異性改造的和在基因水平上改變的。蛋白質工程的研究內容包括:透過改變蛋白質的活性部位,提高其生物功效;透過改變蛋白質的組成和空間結構,提高其在極端條件下的穩定性,如酸、鹼、酶穩定性;透過改變蛋白質的遺傳資訊,提高其獨立工作能力,不再需要輔助因子;透過改變蛋白質的特性,使其便於分離純化,如融合蛋白b-半乳糖苷酶(抗體);透過改變蛋白質的調控位點,使其與抑制劑脫離,解除反饋抑制作用等。研究中通常採用的方法有:在蛋白質分子中引入二硫鍵以提高蛋白質的穩定性;減少半胱氨酸殘基數目以避免錯誤摺疊的可能性;置換天冬醯胺、谷氨醯胺或其他氨基酸,以修飾酶的催化特異性或增加酶的活性等。這些研究首先要對該蛋白質的精細結構和功能關係有深入的瞭解,具備必要的催化化學和結構化學的知識,然後才能運用基因工程的原理和技術,開展蛋白質工程的探索實驗。

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