本菌雖屬厭氧性細菌，但對厭氧程度的要求並不太嚴，甚至在EH=200-250mv的環境內也能生長。在普通培養基上能生長，若加葡萄糖，血液，則生長更好。生長適宜溫度為37-47℃，多認為43-47℃為最宜本菌生長和繁殖速度極快，在適宜條件下增代時間僅8min，可利用高溫快速培養法，對本菌進行選擇分離，如在45℃下，每培養3-4小時傳種1次，即可較易獲得純培養，在深層葡萄糖瓊脂中大量產氣，致使瓊脂破碎。在庖肉培養基中培養數小時即可見到生長，產生大量氣體，肉渣或肉塊變為略帶粉色，但不被消化。在普通瓊脂平板上培養15小時左右可見到菌落，培養24小時菌落直徑2~4mm，圓形、凸起、光滑、半透明、邊緣整齊、無遷徙生長現象。在血平板上，多數菌株有雙層溶血環，內環完全溶血，是由於θ毒素的作用；外環不完全溶血則是由α毒素所致。在牛奶培養基中能分解乳糖產酸，使酪蛋白凝固，同時產生大量氣體，將凝固的酪蛋白衝成蜂窩狀，並將液麵上的凡士林層向上推擠，甚至衝開管口棉塞，氣勢兇猛，稱為“洶湧發酵”（stormy fermentation），是此菌的特徵。 所有型菌株均能發酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖和蔗糖，產酸產氣。不發酵甘露醇或水楊苷；液化明膠，產生H2S，不能消化已凝固的蛋白質和血清，吲哚陰性。主要代謝產物為乙酸和丁酸，有時也形成丁醇。分型根據本菌產生外毒素種類之不同，可將產氣夾膜梭菌分成A、B、C、D、E5個毒素型。5型中對人治病的主要是A型和C型，A型最常見，引起氣性壞疽和胃腸炎型食物中毒；C型能引起壞死性腸炎。