TMB即四甲基聯苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應,
且由於這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產生粗大的、深蘭色沉澱物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的髮色團。同時反應產物的沉澱,使得HRP的活性部位更加暴露,利於酶氧化反應進行。
TMB的反應產物為深藍色,利於光鏡觀察,且反應產物越聚越大,常超出單個細胞器的範圍(而DAB則被限制在其內),故TMB反應的檢測閾較低。
由於上述優點,目前TMB常用於光鏡及超微結構水平的HRP及HRP-WGA神經投射的研究。需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應在2h內新鮮配製。另外,TMB是一種較強的面板刺激劑,並有致癌的潛在可能,故使用時應帶手套及在通風條件下操作。
TMB經HRP作用後共產物顯藍色,目視對比鮮明。TMB性質較穩定,可配成溶液試
劑,只需與H2O2溶液混和即成應用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有無致癌性等
優點,因此在ELISA中應用日趨廣泛。酶反應用HCL或H2SO4終止後,TMB產物由藍色呈
黃色,可在比色計中定量,最適吸收波長為405nm。
ABTS雖不如OPD和TMB敏感,但空白值極低,也為一些試劑盒所採用
TMB即四甲基聯苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應,
且由於這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產生粗大的、深蘭色沉澱物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的髮色團。同時反應產物的沉澱,使得HRP的活性部位更加暴露,利於酶氧化反應進行。
TMB的反應產物為深藍色,利於光鏡觀察,且反應產物越聚越大,常超出單個細胞器的範圍(而DAB則被限制在其內),故TMB反應的檢測閾較低。
由於上述優點,目前TMB常用於光鏡及超微結構水平的HRP及HRP-WGA神經投射的研究。需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應在2h內新鮮配製。另外,TMB是一種較強的面板刺激劑,並有致癌的潛在可能,故使用時應帶手套及在通風條件下操作。
TMB經HRP作用後共產物顯藍色,目視對比鮮明。TMB性質較穩定,可配成溶液試
劑,只需與H2O2溶液混和即成應用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有無致癌性等
優點,因此在ELISA中應用日趨廣泛。酶反應用HCL或H2SO4終止後,TMB產物由藍色呈
黃色,可在比色計中定量,最適吸收波長為405nm。
ABTS雖不如OPD和TMB敏感,但空白值極低,也為一些試劑盒所採用