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  • 1 # 陽光魯寧

    方法如下

    可以改變以下條件:

    1,實用適當細粒度和顆粒度均勻的載體,並儘量填充均勻,是減少渦流擴散、提高柱效的有效途徑 。

    2,改變色譜柱的柱長,因為色譜柱的塔板數一定時,色譜柱長越短,虛擬塔板間距離越短,柱效越高。

    理論塔板數

    理論塔板數(theoretical plate number)N,色譜的柱效引數之一,用於定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。N取決於固定相的種類、性質(粒度、粒徑分佈等)、填充狀況、柱長、流動相的種類和流速及測定柱效所用物質的性質。如果峰形對稱並符合正態分佈,N可近似表示為:

    理論塔板數=5.54(保留時間/半高峰寬)2 (2是平方)

    柱效率用理論塔板數定量地表示:N=16*(t/w )2。其中,t是溶質從進樣到最大洗脫峰出現的時間,w為該溶質的洗脫峰在基線處的寬度。在一色譜柱中用相同的洗脫條件時候,不同化合物的滯留時間與其洗脫峰寬度之比接近常數。因此理論塔板數大的色譜柱效率高。當然,N的大小和柱子長度有密切關係:理論塔板高度H=柱長/N,用H可以衡量單位長度的色譜柱的效率,H越小,則色譜柱效率越高。。。

    N為常量時,W隨tR成正比例變化。在一張多組分色譜圖上,如果各組份含量相當,則後洗脫的峰比前面的峰要逐漸加寬,峰高則逐漸降低。

    用半峰寬計算理論塔板數比用峰寬計算更為方便和常用,因為半峰寬更容易準確測定,尤其是對稍有拖尾的峰。

    N與柱長成正比,柱越長,N越大。用N表示柱效時應註明柱長,,如果未註明,則表示柱長為1米時的理論塔板數。(一般HPLC柱的N在1000以上。)

    若用調整保留時間(tR’)計算理論塔板數,所得值稱為有效理論塔板數(N有效或Neff)=16(tR’/W)2

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