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  • 1 # emegg11453

    原代細胞和傳代細胞培養有含義、培養過程、培養結果和應用四個方面區別:

    1、含義不同原代培養是直接從生物體獲取組織或器官的一部分進行培養,也稱初代培養。原代培養是將培養物放置在體外生長環境中持續培養,中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義:原代培養中的代並非細胞的代數,因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞。傳代培養是指需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養的過程。

    2、培養過程不同原代培養的基本過程包括取材、培養材料的製備、接種、加培養液、置培養條件下培養等步驟,在所有的操作過程中,都必須保持培養物及生長環境的無菌。傳代培養時要注意無菌操作並防止細胞之間的交叉汙染。所有操作要儘量靠近酒精燈火焰。每次最好只進行一種細胞的操作。取出長成單層的原代培養細胞,倒掉瓶內培養液,加入消化液。細胞變圓,相互之間不再連片時將消化液倒掉,加入新鮮培養液,吹打,製成細胞懸液。 

    3、培養結果不同原代培養細胞會分裂。原代培養的細胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細胞的生長就會出現停滯,大部分細胞衰老死亡。細胞接種後一般幾小時內就能貼壁,並開始生長,如接種的細胞密度適宜,5天到一週即可形成單層。傳代培養一般傳到40到50代。一般情況,傳代後的細胞在2小時左右就能附著在培養瓶壁上,2到4天就可在瓶內形成單層,需要再次進行傳代。原代細胞培養為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以後傳代培養創造條件。利用此方法還可直接服務於臨床實踐。例如,用從手術中切除的腫瘤細胞進行原代培養,然後用該培養細胞進行抗癌藥物的篩選,來幫助選擇最有效的化療方案。傳代培養主要應用在醫學領域,如口腔醫學領域重新構建結構複雜的牙根,還有改良羊水細胞培養技術,可多次獲得有效地細胞克隆,大大提高培養成功率,增加了可分析核型數量,提高了產前診斷工作的質量和效益。

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