基本步驟：1、常用玻璃儀器的準備製備。
培養基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷後用清水沖洗乾淨，晾乾後備用。（1）平皿用紙或布包好，或裝在金屬盒內，於121℃高壓蒸汽菌3min後烘乾，備用。（2）試管管口用棉花塞或矽氟塑膠試管塞塞好，再用布或報紙包紮好，121℃高壓蒸汽滅菌20℃後烘乾，備用。（3）吸管及滴管先用少許棉花塞於吸口端（防止汙染物吸出，或橡皮帽內的氣體汙染），然後用紙包後或裝入金屬吸管筒內，於121℃高壓蒸汽滅菌20min後烘乾，備用。其他玻璃器皿均應按上法處理，也應裝金屬筒內160℃乾熱滅菌2h後，備用。
2、培養基的製備及儲存。（1）溶化：一般應放在玻璃器皿或搪瓷齊內。加入蒸餾水，隔水加熱以促其溶解，加熱時應經常攪拌，防止焦結，待其溶解後補足水分。在使用乾燥培養基時，先將蒸餾水按定量加入容器中，然後稱取一定量培養基幹粉放入水中，靜置10—15min，攪拌，振盪，或延長時間以促進溶解，一般不要熱，必要時加熱，但時間不宜過長，溫度不宜過高，避免某些營養成分被破壞。（2）校正酸鹼度。測定pH的標準溫度為25士2℃。調節pH可用無菌的1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液。當調節緩衝液的pH時，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液。滅菌後的pH會比滅菌前的pH升高或降低，一般高壓滅菌前培養基的pH會比最終pH調高0.2左右，滅菌後基本合適。因此對培養基、緩衝液、試劑在滅菌前後的pH均進行測定，並記下每次pH的測定結果，有助於積累資料考察每種培養基、緩衝液、試劑對滅菌程式的耐受性，從而指導滅菌前pH的調節。測定時，一般用指示劑滴入培養基觀察其顏色的變化，或用pH計校正，如與所需pH不符，可用以上的酸或鹼液加以校正。調整pH後要加熱過濾，使培養基澄清。（3）培養基的分裝：大批次配製時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前後，均要對分配器的管道系統進行沖洗，在分裝無菌培養基前，則要採用無菌矽膠管。固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌後根據需要分裝平皿。平皿：傾注平皿，應在無菌室中放置3—4h，如用塑膠平皿須在35℃培養箱 中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。
基本步驟：1、常用玻璃儀器的準備製備。
培養基所用的吸管、錐形瓶、毛細吸管、平皿等玻璃儀器用前要用肥皂水洗刷後用清水沖洗乾淨，晾乾後備用。（1）平皿用紙或布包好，或裝在金屬盒內，於121℃高壓蒸汽菌3min後烘乾，備用。（2）試管管口用棉花塞或矽氟塑膠試管塞塞好，再用布或報紙包紮好，121℃高壓蒸汽滅菌20℃後烘乾，備用。（3）吸管及滴管先用少許棉花塞於吸口端（防止汙染物吸出，或橡皮帽內的氣體汙染），然後用紙包後或裝入金屬吸管筒內，於121℃高壓蒸汽滅菌20min後烘乾，備用。其他玻璃器皿均應按上法處理，也應裝金屬筒內160℃乾熱滅菌2h後，備用。
2、培養基的製備及儲存。（1）溶化：一般應放在玻璃器皿或搪瓷齊內。加入蒸餾水，隔水加熱以促其溶解，加熱時應經常攪拌，防止焦結，待其溶解後補足水分。在使用乾燥培養基時，先將蒸餾水按定量加入容器中，然後稱取一定量培養基幹粉放入水中，靜置10—15min，攪拌，振盪，或延長時間以促進溶解，一般不要熱，必要時加熱，但時間不宜過長，溫度不宜過高，避免某些營養成分被破壞。（2）校正酸鹼度。測定pH的標準溫度為25士2℃。調節pH可用無菌的1mol/l氫氧化鈉溶液或10%碳酸鈉溶液、1mol/l鹽酸溶液。當調節緩衝液的pH時，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氫氧化鉀溶液。滅菌後的pH會比滅菌前的pH升高或降低，一般高壓滅菌前培養基的pH會比最終pH調高0.2左右，滅菌後基本合適。因此對培養基、緩衝液、試劑在滅菌前後的pH均進行測定，並記下每次pH的測定結果，有助於積累資料考察每種培養基、緩衝液、試劑對滅菌程式的耐受性，從而指導滅菌前pH的調節。測定時，一般用指示劑滴入培養基觀察其顏色的變化，或用pH計校正，如與所需pH不符，可用以上的酸或鹼液加以校正。調整pH後要加熱過濾，使培養基澄清。（3）培養基的分裝：大批次配製時使用的自動分配器須經校準和確認。每次使用前後，均要對分配器的管道系統進行沖洗，在分裝無菌培養基前，則要採用無菌矽膠管。固體培養基一般分裝在250ml、500ml錐形瓶中，高壓滅菌後根據需要分裝平皿。平皿：傾注平皿，應在無菌室中放置3—4h，如用塑膠平皿須在35℃培養箱 中倒置30—60min。讓水蒸汽自然蒸發。