水泉小學的高老師（高恩滿飾）要回家看望病重的母親，村長從鄰村找來魏敏芝（魏敏芝飾）代一個月課，那時魏敏芝只有13歲。

在那會農村讀書是一件奢侈的事情特別是貧困山區，影片的小泉小學總共有二十八個人，只有一個鄉村老師（高老師），高老師回家之前再三叮囑魏敏芝“一定要把學生看住，一個都不能少。”（看得出來高老師的認真負責）也就從這拉開了影片的序幕。

魏敏芝是隻有13歲她哪能教得了學生，整天讓學生抄課文，按照理解就是農村孩子多大孩子帶小孩子，還有不聽話的時間一長開始搗蛋，不聽魏敏芝的。但她謹記高老師的吩咐每天清點學生人數，以免缺少。

其中有個學生張慧科（張慧科飾）因家裡欠了債無力償還，不得不棄學到城裡打工。一天魏敏芝來到學校清點人數少了一個，一看是張慧科，她打聽清楚原因得知張慧科城裡的住處，魏敏芝謹記高老師的吩咐，孤身一人踏上了尋找張慧科之路，13歲的魏敏芝進城後四處碰壁尋找無果，透過不懈努力得到電視臺臺長的幫助，找回了張慧科並苦心勸說，最終還得到了好心人的幫助，捐助大量的粉筆和文具。

魏敏芝不負高老師的吩咐，把孩子一個不少的交給高老師，其中的艱辛建議看影片。

《一個都不能少》導演張藝謀拍攝 ,在1999年上映的一部劇情片，根據施祥生小說《天上有個太陽》改編。該片是張藝謀巔峰時期作用，演員都是名副當地的學生和老師，並未請專業演員，從演員名字可以看出都一樣，可以說是一部準記錄片電影。