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    幾種新材料的DNA粗提取與鑑定介紹

    3.1新鮮菜花(或蒜黃、菠菜)DNA粗提取與鑑定

    一.材料用具

    新鮮菜花(或蒜黃、菠菜)。

    塑膠燒杯,量筒,玻璃棒,尼龍紗布,陶瓷研缽,試管,試管架,試管夾,漏斗,酒精燈,石棉網,三角架,火柴,刀片,天平。

    研磨液,體積分數為95%的酒精溶液,二苯胺試劑,蒸餾水。

    二.方法步驟

    (1)DNA的粗提取

    ①準備材料 將新鮮菜花和體積分數為95%的酒精溶液放入冰箱冷凍室,至少24 h。

    ②取材 稱取30 g菜花,去梗取花,切碎。

    ④過濾 在漏斗中墊上尼龍紗布,將菜花研磨液濾入燒杯中(有條件的學校可將濾液倒入塑膠離心管中進行離心,用1 000r/min的旋轉頻率,離心25 min,取上清液放入燒杯中)。在4S冰箱中放置幾分後,再取上清液。

    ⑤加冷酒精 將一倍體積的上清液倒入兩倍體積的體積分數為95%的冷酒精溶液中,並用玻璃棒緩緩地輕輕攪拌溶液(玻璃棒不要直插燒杯底部)。沉澱35 min後,可見白色的DNA絮狀物出現。用玻璃棒緩緩旋轉,絮狀物會纏在玻璃棒上。

    (2)DNA的鑑定

    ①配製二苯胺試 劑取0.1 mL B液,滴入到10 mL A液中,混勻。

    ②鑑定 取4 mL DNA提取液放入試管中,加入4 mL 二苯胺試劑,混勻後觀察溶液顏色(不變藍)。用沸水浴(100 ℃)加熱10 min 。在加熱過程中,隨時注意試管中溶液顏色的變化(逐漸出現淺藍色)。

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